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： 乳酸菌分离鉴定及对巨菌草青贮发酵效果研究
书目信息 机读格式(MARC)
| ISBN/价格： | CNY20.00 (估\呈缴)学位论文 |
|---|---|
| 作品语种： | chi |
| 出版国别： | CN 530000 |
| 题名责任者项： | 乳酸菌分离鉴定及对巨菌草青贮发酵效果研究/.廖隽锐著/.霍金龙， 赵智勇指导 |
| 出版发行项： | 2023.05.24 |
| 载体形态项： | 61页:;+图表:;+30cm |
| 一般附注： | 动物科学技术学院, 学号2021240428 |
| 提要文摘： | 巨菌草（Pennisetum giganteum）属于狼尾草属，具有营养价值高、高蛋白和产量大等特点，有极大的饲用潜力。开发巨菌草作为优质青贮原料，有利于缓解我国饲料资源短缺的现状。本研究旨在从青贮巨菌草饲料中分离筛选具有抑菌活性的优质乳酸菌，将具有抑菌活性的乳酸菌作为青贮添加剂加到青贮巨菌草饲料中，通过常规营养成分、感官评价、霉菌毒素含量、短链脂肪酸含量和高通量测序技术及非靶向代谢组学技术，研究乳酸菌添加剂对青贮巨菌草饲料营养水平、发酵品质、微生物多样性和代谢产物的影响，研究的主要结果如下： 从青贮巨菌草饲料中分离出9株具有典型乳酸菌落特征的菌株，其中R-09对金黄葡萄球菌、大肠杆菌和鼠伤寒沙门氏菌具有抑制能力，对金黄葡萄球菌和鼠伤寒沙门氏菌产生的抑菌圈大于其他菌株（P ＜ 0.05）。R-09经革兰氏染色鉴定为革兰氏阳性菌，电子显微镜观察呈短杆状单生细菌。16S rDNA测序结合BLAST在线比对，R-09被鉴定为短乳杆菌。 生长曲线分析显示R-09生长停滞期短，2-8 h处于对数生长期，生长至22 h时检测到最大OD600值1.988。产酸曲线显示R-09的pH值呈下降趋势，20 h达到最低值3.82。通过生化发酵管鉴定R-09能利用纤维二糖、麦芽糖、甘露醇、水杨苷、山梨醇、蔗糖、菊糖和七叶苷。抗生素耐药性研究结果表明R-09对氯霉素、复方新诺明、氨苄西林和红霉素敏感，对四环素中度敏感，对大观霉素、链霉素、青霉素、卡那霉素、庆大霉素、多粘菌素B、氟氯沙星、环丙沙星和妥布霉素具有耐药性。 添加短乳杆菌R-09的LT组青贮巨菌草饲料相比自然发酵的LC组巨菌草青贮饲料黄曲霉毒素、T2毒素、铵态氮含量和pH降低（P ＜ 0.05），粗纤维和酸性洗涤纤维含量显著降低（P ＜ 0.01），粗脂肪含量增大（P ＜ 0.05），丁酸含量显著降低（P ＜ 0.01），异己酸含量显著增大（P ＜ 0.01），LT组相比LC组更接近巨菌草原本的颜色，没有刺鼻气味。 利用高通量测序技术发现细菌340个、真菌702个。Alpha多样性分析显示LT组和LC组中细菌和真菌群落的多样性指数没有显著差异，PCoA得分图表明两组间细菌和真菌整体差别不大，但LT组各样本之间更集中。门水平上优势细菌是厚壁菌门和变形杆菌门，属水平上的优势细菌是乳酸杆菌属、未分类的肠杆菌属和魏斯氏菌属，种水平上的优势细菌是植物乳杆菌、短乳杆菌、布氏乳杆菌和未分类的肠杆菌属。在门水平上优势真菌为子囊菌门和担子菌门。在属水平上优势真菌是念珠菌属、汉娜菌属和未分类双足囊菌科，在种水平上优势真菌是假丝酵母、金黄隐球酵母、Hannaella zeae、中间假丝酵母和未分类双足囊菌科。LT组中毛霉门，高粱附球菌和热带假丝酵母的相对丰度降低（P ＜ 0.05），中国汉纳酵母和毛红曲霉相对丰度显著降低（P ＜ 0.01）。相关性网络图中LT组霉菌整体连出度降低。 通过非靶向代谢组学技术，鉴定出991种代谢物，HMDB化合物分类出脂质和类脂分子134种，根据P ＜ 0.05，Vip值 ＞ 1筛选出差异代谢物464种。PCA分析显示LC与LT组之间存在一点差异，OPLS-DA显示两组之间差异进一步增大，在OPLS-DA中LT组分布较LC组更为集中。所有代谢物归为7个一级代谢通路和37个二级代谢通路，二级代谢通路中包含代谢物多的通路有氨基酸代谢和脂代谢等，青贮巨菌草饲料中在“代谢”途径中被显著富集的三级代谢通路有酪氨酸代谢、色氨酸代谢、嘌呤代谢、甘氨酸代谢及丝氨酸和苏氨酸代谢等。关联性分析显示多个乳酸菌目下的乳酸菌与代谢物之间具有相关性。 综上所述，短乳杆菌R-09具有良好的生物学特性，可提升青贮巨菌草饲料的营养价值、发酵品质，降低青贮巨菌草饲料的霉菌毒素水平，使青贮巨菌草饲料的微生物群体和代谢产物趋于单一化，对微生物群落多样性影响不显著，能显著降低部分霉菌的相对丰度和霉菌在青贮巨菌草菌群中的作用效果。LT组与LC组代谢物存在差异，并与乳酸菌存在关联。可推荐为巨菌草青贮的添加剂。 |
| 并列题名： | Isolation and Identification of Lactobacillus and Its Effect on Silage Fermentation of Pennisetum giganteum eng |
| 题名主题： | 短乳杆菌 巨菌草青贮 微生物特性 微生物组学 非靶向代谢组学 学位论文 |
| 中图分类： | S816.33-533 |
| 个人名称等同： | 廖隽锐 著 |
| 个人名称次要： | 霍金龙 指导 |
| 个人名称次要： | 赵智勇 指导 |
| 团体名称等同： | 云南农业大学 授予 |
| 记录来源： | CN YNAUL 20240301 |