ISBN/价格: | CNY20.00 (估\呈缴)学位论文 |
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作品语种: | chi |
出版国别: | CN 530000 |
题名责任者项: | 表儿茶素对辣木叶粗蛋白潜在致敏性的调节机制研究/.彭君著/.范江平指导 |
出版发行项: | 2023.6.12 |
载体形态项: | 111页:;+图表:;+30cm |
一般附注: | 食品科学技术学院, 学号2020210103 |
提要文摘: | 天然活性物质具有缓解食物过敏的潜力以及安全、来源广等优势,已逐渐成为食物过敏研究领域的热点。丽江山荆子表儿茶素(Epicatechin,EC)是从丽江山荆子果实中得到的黄烷醇类化合物,具有抗炎、免疫调节等作用。本课题旨在探讨EC抗辣木叶粗蛋白(Moringa oleifera leaf protein,MopA)诱导的过敏作用及潜在机制,采用硫酸铵沉淀法提取辣木鲜叶中的MopA,构建MopA过敏BALB/c小鼠模型和RBL-2H3细胞模型。通过酶联免疫吸附法(Enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)检测β-氨基己糖胺酶(β-hexosaminidase,β-Hex)、组胺(Histamine,HIS)、特异性免疫球蛋白(immunoglobulin,Ig)E抗体、白细胞介素(interleukin,IL)-4和肿瘤坏死因子-α(Tumor necrosis factor-alpha,TNF-α)含量;RT-qPCR测定Foxp3、GATA-3、T-bet mRNA的表达,Western blot测定NF-κB/MyD88/MAPK通路相关蛋白NF-κBp65、MyD88、p-p38/p38、p-JNK/JNK、p-ERK1/2/ERK1/2的表达;苏木精-伊红染色法(Hematoxylin-eosin staining,H&E)观察小鼠空肠组织病理变化;16S rRNA高通量测序分析肠道菌群变化情况。基于动物模型和细胞模型综合评价EC的抗过敏活性,拟阐明其作用机制,主要研究结果如下: (1)体外RBL-2H3细胞试验结果表明,与空白对照组(Normal control group,NC)相比,MopA模型组(Model control group,MC)细胞上清液中IgE、HIS、β-Hex、IL-4的含量升高,TNF-α含量降低。经EC干预后,有效抑制RBL-2H3细胞脱颗粒。EC通过上调Th1型细胞因子TNF-α水平,下调Th2型细胞因子IL-4水平,发挥抗过敏作用,其抑制作用随作用浓度的升高而增强。同时,EC能够上调T-bet(Th1型)和Foxp3(Treg型)mRNA表达量,下调GATA-3(Th2型)mRNA表达量。Western blot结果表明,EC能够抑制ERK、JNK、p-38蛋白磷酸化以及NF-κBp65和MyD88蛋白表达,进而实现对RBL-2H3细胞脱颗粒的抑制。 (2)BALB/c小鼠试验结果表明,模型组(MC)小鼠临床评分显著升高,出现腹泻等不良反应,并伴有抓挠头部、呼吸急促、胡须脱落等现象。同时,脾脏肿大、空肠绒毛受损,IgE、HIS等炎症介质和Th2型细胞因子IL-4含量显著升高,Th1型细胞因子TNF-α含量显著降低。经EC干预后,小鼠临床评分和脾脏指数明显改善,肠道功能得到一定程度的修复。EC通过抑制肥大细胞释放IgE和HIS,调节细胞因子水平,维持Th1/Th2平衡以及改善机体免疫功能起到减轻MopA过敏的作用。此外,EC可以改善肠绒毛断裂及萎缩情况;降低GATA-3 mRNA表达量,对NF-κBp65和MyD88蛋白表达和ERK、JNK、p-38蛋白的磷酸化表达水平起到抑制作用。 (3)16S rRNA高通量测序表明,EC没有显著改变小鼠肠道菌群多样性,但可以影响肠道菌群的结构。门水平,EC上调Bacteroidia丰度和下调Firmicutes丰度。科水平,EC上调Lactobacillaceae和Muribaculaceae丰度,下调Erysipelotrichaceae水平。属水平,EC上调Lactobacillus丰度,下调Dubosiella水平。 综上所述,MopA具有潜在的体内外诱导过敏反应的能力,可能是由IL-4信号增强驱动的,导致Th2诱导和IgE产生增加。EC通过Th1/Th2调节机体免疫平衡,从而起到抗MopA过敏的作用。其作用机制可能是通过调节MyD88/NF-κB/MAPK信号通路来抑制炎症因子的产生,且EC能够改变MopA过敏小鼠肠道菌群的结构,对调节过敏小鼠的肠道菌群稳态具有重要作用。 |
并列题名: | Regulatory mechanisms of epicatechin on the potential allergenicity of Moringa oleifera leaf crude protein |
题名主题: | 表儿茶素 食物过敏 粗蛋白 辣木叶 Th1/Th2平衡 学位论文 |
中图分类: | TS201.4-533 |
个人名称等同: | 彭君 著 |
个人名称次要: | 范江平 指导 |
团体名称等同: | 云南农业大学 授予 |
记录来源: | CN YNAUL 20240301 |