书目详细信息
： 阿糖腺苷缓解洛哌丁胺诱导的慢传输型便秘的作用机制研究
书目信息 机读格式(MARC)
| ISBN/价格： | CNY20.00 (估\呈缴)学位论文 |
|---|---|
| 作品语种： | chi |
| 出版国别： | CN 530000 |
| 题名责任者项： | 阿糖腺苷缓解洛哌丁胺诱导的慢传输型便秘的作用机制研究/.郭凯枫著/.高晓余, 伍苏然指导 |
| 出版发行项： | 2023.06.19 |
| 载体形态项： | 66页:;+图表:;+30cm |
| 一般附注： | 食品科学技术学院, 学号2021240081 |
| 提要文摘： | 便秘是由于肠道功能紊乱，传导失常而导致的排便周期延长和排便困难的一类常见疾病。慢传输型便秘（slow transit constipation，STC）是功能性便秘中常见的类型，约占功能性便秘的45.5%。流行病学调查显示，中国慢性便秘患者占普通人群的3.0%-17.6%，长期便秘会使肠道疾病风险提高，增加患结直肠癌、心血管疾病的风险，以及诱发精神心理问题等。目前，药物治疗是便秘患者的首要选择。 阿糖腺苷（Vidarabine）是一种天然的核苷类似物，科学家最早从海绵里提取出来，课题组前期的研究发现草果和辣木中都有阿糖腺苷存在。阿糖腺苷常用于治疗手足口病、疱疹、单纯疱疹病毒性脑炎、乙型肝炎等疾病，在这些疾病发展中，常伴有便秘的并发症。研究发现阿糖腺苷及其代谢物能够促进血管平滑肌收缩，促进兴奋性神经递质的释放，这些作用与便秘的发病机制有关。目前，阿糖腺苷与便秘的相关研究研究还未见报道。为此，本研究采用洛哌丁胺建立慢传输型便秘小鼠模型，通过排便实验和小肠运动实验，评价阿糖腺苷的通便活性；同时，利用ELISA方法检测小鼠血清神经递质，RT-qPCR检测小鼠结肠炎症因子、肠道屏障、胃肠转运因子和水通道蛋白关键基因的表达，WB法检测水通道蛋白相关因子的基因表达量，16S rRNA高通量测序法分析小鼠肠道微生物组成，探究阿糖腺苷缓解便秘的作用机制。主要研究结果如下： （1）阿糖腺苷对洛哌丁胺诱导的慢传输型便秘小鼠有良好的通便效果。与空白组相比，模型组小鼠6 h内粪便重量、粪便含水量、粪便粒数均显著减少，表明便秘模型建立成功。与模型组相比，中剂量的阿糖腺苷能显著增加小鼠6 h粪便重量、粪便粒数和粪便含水率，显著缩短便秘小鼠首粒黑便时间，显著提高便秘小鼠墨汁推进率，表明阿糖腺苷具有良好的通便作用。 （2）阿糖腺苷能显著提高兴奋性神经递质的表达，显著降低抑制性神经递质的相对表达。与空白组相比，模型组小鼠结肠中的血管活性肠肽（VIP）和乙酰胆碱酯酶（AchE）mRNA的表达量显著升高；与模型组相比，阿糖腺苷干预组小鼠结肠中的VIP mRNA和AchE mRNA表达量显著下降。与空白组相比，模型组小鼠血清中VIP和AchE含量显著下降，阿糖腺苷干预组小鼠血清中VIP和AchE含量也显著升高。表明阿糖腺苷可以通过提高兴奋性神经递质、降低抑制性神经递质的表达来促进肠道运动。 （3）阿糖腺苷能影响腺苷A2A受体及A2A-CALM -MLCK-MLC通路的表达。RT-qPCR实验表明，模型组小鼠结肠中A2A mRNA的表达量显著升高;与模型组相比，阿糖腺苷能显著降低便秘小鼠结肠中腺苷A2A受体的mRNA的表达量；能显著提高钙调蛋白（CALM）和肌球蛋白轻链（MLC）的mRNA的表达。Western blot实验表明，阿糖腺苷能显著提高结肠中MYL9蛋白的表达量。结果表明，阿糖腺苷可通过影响腺苷A2A受体的表达，进而调控A2A下游的A2A-CALM -MLCK-MLC通路，从而影响肌动球蛋白，引起肠道平滑肌活动，进而促进肠道蠕动，缓解便秘。 （4）阿糖腺苷能显著影响水通道蛋白的mRNA的表达量。排便实验中，我们发现阿糖腺苷能显著影响便秘小鼠的粪便含水率，通过检测我们发现阿糖腺苷能显著降低便秘小鼠结肠中AQP3、AQP4和AQP8的mRNA的表达量。结果表明，阿糖腺苷可能通过调控便秘小鼠结肠中水通道蛋白的表达，调节便秘小鼠结肠中水分的重吸收，进而提高便秘小鼠粪便的含水率，从而促进小鼠排便，缓解便秘症状。 （5）阿糖腺苷能够缓解便秘小鼠肠道内炎症的状况。通过组织病理学观察和实时荧光定量PCR的方法，我们发现，阿糖腺苷能减少便秘小鼠肠黏膜的炎性浸润，促进肠黏膜恢复，显著降低结肠中炎症因子MCP-1、TNF-α、IL-β、IL-17的mRNA的表达量，从而缓解便秘症状。 （6）阿糖腺苷能显著改变肠道微生物的群落结构和物种组成。在门水平上，阿糖腺苷能显著提高厚壁菌门（Firmicutes）的丰度，降低变拟杆菌门（Proteobacteria）的相对丰度；在科水平上，阿糖腺苷能显著提高双歧杆菌科（Bifidobacteriaceae）、乳杆菌科（Lactobacteriaceae）和丁酸球菌科（Butyrococcaceae）的相对丰度，显著降低拟杆菌科（Bacteroidaceae）、Atopobiaceae和Muribaculaceae菌科的相对丰度；在属水平上，阿糖腺苷能显著提高乳杆菌属（Lactobacillus）和芽孢杆菌属（Bacillus）的相对丰度，降低Faecalibaculum、Dubosiella和Lachnospiraceae_NK4A136_group的相对丰度。结果说明阿糖腺苷可能会通过增加肠道有益菌的相对丰度，降低肠道有害菌的丰度，调节肠道微生态，发挥通便作用。 （7）本研究构建了肠道菌群与宿主参数的相关网络。通过这个网络，我们发现，在科水平上，乳杆菌科（Lactobacillaceae）、Lachnospiraceae和芽胞杆菌科（Bacillaceae）与宿主表型指标和功能基因表达之间存在显著的相关性；在属水平上，乳杆菌属（Lactobacillus）和芽孢杆菌属（Bacillus）与宿主参数存在极强的相关性。由此可得，乳杆菌属（Lactobacillus）和芽孢杆菌属（Bacillus）是阿糖腺苷缓解便秘的关键菌属。 综上所述，阿糖腺苷能有效缓解洛哌丁胺诱导的小鼠便秘，其作用机制可能与其对神经递质、胃肠动力因子、腺苷A2A受体下游通路、水通道蛋白、肠道稳态以及肠道菌群等的调控有关。本研究结果可为阿糖腺苷的“老药新用”提供依据，也为防治便秘药物的开发提供新思路。 |
| 并列题名： | Study on the mechanism of vidarabine in alleviating loperamide induced slow transit constipation eng |
| 题名主题： | 阿糖腺苷 慢传输型便秘 腺苷A2A受体 肠道稳态 肠道菌群 学位论文 |
| 中图分类： | R574.4-533 |
| 个人名称等同： | 郭凯枫 著 |
| 个人名称次要： | 高晓余 指导 |
| 个人名称次要： | 伍苏然 指导 |
| 团体名称等同： | 云南农业大学 授予 |
| 记录来源： | CN YNAUL 20240301 |