书目详细信息
： 齐墩果酸通过HMGCR途径抑制胆固醇合成的分子机制探究
书目信息 机读格式(MARC)
| ISBN/价格： | CNY20.00 (估\呈缴)学位论文 |
|---|---|
| 作品语种： | chi |
| 出版国别： | CN 530000 |
| 题名责任者项： | 齐墩果酸通过HMGCR途径抑制胆固醇合成的分子机制探究/.蒙温露儿著/.黄业伟指导 |
| 出版发行项： | 2023.5.31 |
| 载体形态项： | 60页:;+图表:;+30cm |
| 一般附注： | 食品科学技术学院, 学号2020210079 |
| 提要文摘： | 胆固醇稳态失衡会导致动脉粥样硬化（Atherosclerosis，AS）等代谢疾病的发生。3-羟基-3-甲基戊二酸单酰辅酶A还原酶（3-hydroxy-3-methyl glutaryl coenzyme A reductase, 简称HMGCR）是胆固醇合成途径中的第一限速酶，是许多天然小分子化合物调节胆固醇代谢的靶点。齐墩果酸(oleanolicacid，简称OA)，具有改善ApoE-/-小鼠AS的作用，但具体作用机制并未完全阐明。本研究旨在探究存在于多种天然草药及食物中的小分子化合物OA是否可以通过HMGCR抑制胆固醇合成。研究内容如下： 首先通过MTT实验检测OA对HepG2细胞的毒性，结果显示OA浓度小于20 μM时对HepG2细胞的活力无显著影响。接着利用生物信息学分析OA对HepG2细胞转录组的影响，发现其显著下调了与胆固醇合成途径相关的PI3K-Akt信号通路和PPAR信号通路的基因表达，提示OA可能对细胞胆固醇合成有一定影响。为了验证转录组结果，我们开展了细胞内胆固醇含量测定、细胞生成、细胞形态学观察等实验，结果表明OA能够抑制HepG2细胞的胆固醇合成。基于相关限速酶对胆固醇合成的重要性，我们检测了OA对HepG2细胞胆固醇合成部分关键酶HMGCR、ACLY、DHCR7、DHCR24和SQLE蛋白水平的影响，发现OA显著降低了HMGCR的蛋白表达但对于ACLY、DHCR7、DHCR24和SQLE的蛋白表达无显著影响，因此选定HMGCR作为后续的研究靶点。通过Western blot和RT-PCR检测OA对于HMGCR以及其上游SREBP-2的表达情况，结果显示，OA抑制了HepG2细胞HMGCR和SREBP-2的蛋白及mRNA水平。接着探究了OA对HMGCR酶活的影响，Western blot和酶活检测试剂盒结果明确OA能通过激活AMPK磷酸化增强HMGCR磷酸化从而抑制HMGCR活性。为进一步探究OA抑制HMGCR酶活的作用机制，我们进行了分子对接模拟和分子互作实验。结果显示，OA与HMGCR可能通过疏水作用发生结合（KD=79.44 μM），进而减少HMGCR对底物的催化，发挥抑制酶活的作用。 综上所述，OA能够抑制HepG2细胞中HMGCR的蛋白和mRNA表达水平，且可与HMGCR直接结合并抑制其酶活性，进而发挥抑制胆固醇合成的作用，研究结果可为阐明OA在调节胆固醇代谢及改善AS方面的作用机理提供基础，为OA相关的功能食品开发和应用提供科学依据。 |
| 并列题名： | Molecular mechanism of inhibition of cholesterol synthesis by oleanolic acid through HMGCR pathway eng |
| 题名主题： | 胆固醇合成 HMGCR 齐墩果酸 动脉粥样硬化 低密度脂蛋白 学位论文 |
| 中图分类： | R54-533 |
| 个人名称等同： | 蒙温露儿 著 |
| 个人名称次要： | 黄业伟 指导 |
| 团体名称等同： | 云南农业大学 授予 |
| 记录来源： | CN YNAUL 20240517 |