书目详细信息
： 柘树酮A对EGFR野生型肺癌的抗肿瘤机制研究
书目信息 机读格式(MARC)
| ISBN/价格： | CNY20.00 (估\呈缴)学位论文 |
|---|---|
| 作品语种： | chi |
| 出版国别： | CN 530000 |
| 题名责任者项： | 柘树酮A对EGFR野生型肺癌的抗肿瘤机制研究/.王卓奕著/.向泽敏， 柴子奇指导 |
| 出版发行项： | 2023.06.15 |
| 载体形态项： | 53页:;+图表:;+30cm |
| 一般附注： | 食品科学技术学院, 学号2021240103 |
| 提要文摘： | 表皮生长因子受体（Epidermal growth factor receptor, EGFR）是非小细胞肺癌（Non-small cell lung cancer，NSCLC）靶向治疗的重要靶点，EGFR酪氨酸激酶抑制剂（tyrosine kinase inhibitors, TKIs）的出现成功地改变了EGFR突变肺癌患者的处境，但对于EGFR野生型肺癌来说此类药物的治疗效果欠佳，使得毒副作用大、效果不具有靶向性的化疗依旧是这些患者的主要治疗手段。因此，针对EGFR野生型肺癌研发新的治疗药物意义重大。 我国云南拥有大量的植物资源，这些植物不仅可以加工成食品为人类提供丰富营养，而且一些来源其中的天然化合物对于癌症治疗也具有积极的影响。实验室前期研究基于表面等离子共振技术和细胞增殖实验，针对1200种植物小分子化合物进行了筛选，发现了一种来源于柘树（Cudrania tricuspidata Bur.）的天然化合物柘树??酮A（Cudratricusxanthone A，CTXA），能够与EGFR胞外结构域以较强亲和力相互作用，并在10μM水平下抑制野生型肺癌细胞的增殖。因此本研究推测，CTXA能够通过靶向EGFR进而对EGFR野生型肺癌表现出良好的抗肿瘤活性。基于以上思路开展研究，并得到以下结果： （1）选取EGFR野生型肺癌细胞A549为研究对象，通过细胞增殖实验检测发现，CTXA能够显著抑制A549细胞生长，24h和48h下的IC50分别为5.803μM和3.311μM，通过显微镜观察并拍摄不同浓度下CTXA对细胞状态的影响，发现低浓度下细胞状态发生变化，高浓度下细胞大量死亡。随后通过克隆形成实验发现，CTXA能够显著抑制A549细胞集落的形成，呈浓度依赖性。细胞划痕实验表明了CTXA可以显著抑制肿瘤细胞的侵袭与迁移。 （2）为了探究CTXA的抗肿瘤机制，通过Western blot实验检测CTXA对A549细胞EGFR及其下游通路的影响，结果显示，在处理1h后，CTXA能够显著抑制EGF刺激活化后的EGFR以及下游信号蛋白ERK、AKT的磷酸化表达。 （3）为了进一步探究CTXA抑制A549细胞增殖的原因，通过流式细胞术检测了CTXA对于A549细胞周期分布的影响，结果显示CTXA能够影响A549细胞在G1期发生阻滞。Western blot 检测细胞周期相关蛋白发现，CTXA可以使G1期关键蛋白CDK4和Cyclin D1蛋白表达下降，从而导致A549细胞周期发生重排。 （4）流式细胞术检测结果显示，CTXA能够诱导A549细胞凋亡，且呈浓度依赖性，为了探究其凋亡机制，通过Western blot实验对凋亡通路关键蛋白进行了检测，结果发现CTXA主要通过影响 Bcl-2 家族蛋白的表达，上调 Bax的同时下调 Bcl-2，活化 caspase-9、caspase-3，最终 PARP1被切割从而诱导A549细胞凋亡。 （5）通过分子对接模拟探究了CTXA与EGFR的结合模式。结果显示，CTXA可以与EGFR结合，并分别与GLY-259和TYR-261形成2个氢键。结合上述实验结果，化合物结合在该区域可能会影响EGFR的二聚化，从而通过信号传递产生相应的细胞学效应。 综上所述，CTXA在调控野生型非小细胞肺癌细胞增殖等方面起到至关重要的作用，其作用机制主要是通过靶向EGFR并抑制其下游通路蛋白的磷酸化，进而影响周期、凋亡关键蛋白的表达，最终使细胞周期发生重排并诱导细胞凋亡。本研究的开展可为从植物中研发新型抗肿瘤药物提供了理论基础。 |
| 并列题名： | Antitumor mechanism of Cudratricuxanthone A against lung cancer harboring EGFR wild-type eng |
| 题名主题： | 柘树??酮A 非小细胞肺癌 EGFR野生型 A549细胞 抗肿瘤活性 学位论文 |
| 中图分类： | R734.2-533 |
| 个人名称等同： | 王卓奕 著 |
| 个人名称次要： | 向泽敏 指导 |
| 个人名称次要： | 柴子奇 指导 |
| 团体名称等同： | 云南农业大学 授予 |
| 记录来源： | CN YNAUL 20240301 |