书目详细信息
： 四种猪腹泻性病毒四重RT-PCR检测方法的建立及应用
书目信息 机读格式(MARC)
| ISBN/价格： | CNY20.00 (估)缴送 |
|---|---|
| 作品语种： | chi |
| 出版国别： | CN 530000 |
| 题名责任者项： | 四种猪腹泻性病毒四重RT-PCR检测方法的建立及应用/.刘露著/.张以芳指导 |
| 出版发行项： | 2020.05 |
| 载体形态项： | 49页:;+图表:;+30cm |
| 一般附注： | 动物医学院 |
| 提要文摘： | 近年来，随着规模化养猪业的快速发展，猪病毒性腹泻病例呈急剧增长趋势，给养猪户造成了巨大的经济损失，严重阻碍了养猪业的健康有序发展。猪流行性腹泻病毒（PEDV）、猪传染性胃肠炎病毒（TGEV）、猪星状病毒（PAstV）和猪δ冠状病毒（PDCoV）是危害养猪业的主要猪腹泻性病毒，其临床症状均为腹泻、呕吐、脱水，呈混合感染，在临床上难以进行区分。 虽然以前报道的多重RT-PCR似乎能有效地检测到的四种病毒中两种、三种，本研究成功地建立了一种针对四种腹泻病毒的四重RT-PCR检测方法，并初步应用于检测云南部分地区收集的133份临床样品。结果显示： 1. PEDV 、TGEV 、PAstV、PDCoV的单一RT-PCR的建立 针对PEDV 的S基因、TGEV的N基因、PAstV的ORF2阅读框、PDCoV的N基因设计四对特异性引物，目的片段分别为778 bp、388 bp、249 bp、187 bp。优化了单一RT-PCR的退火温度、引物浓度，并进行了特异性试验和灵敏度试验，PEDV 、TGEV 、PAstV、PDCoV的最佳退火温度均为59.5 ℃， 四种检测方法的最佳引物浓度分别为0.4 µmol/L、0.8 µmol/L、0.8 µmol/L、0.8 µmol/L，且与CSFV、PRRSV、PRV和PCV-2无交叉反应，证明四种病毒单一RT-PCR特异性良好， PEDV 、TGEV 、PAstV、PDCoV的最低检测量分别为1.47×103 copies/μL、2.6×103 copies/μL、4.08×104 copies/μL、4.8×104 copies/μL，敏感性好。 2. PEDV 、TGEV 、PAstV、PDcoV的四重RT-PCR的建立 四重RT-PCR的最佳退火温度为59.5 ℃，PEDV 、TGEV 、PAstV、PDCoV的最佳引物浓度分别为0.8 µmol/L、0.6 µmol/L、0.4 µmol/L、0.4 µmol/L，PEDV 、TGEV 、PAstV、PDcoV的最低检测量分别为1.47×104copies/μL、2.6×103copies/μL、4.08×104copies/μL、4.8×104 copies/μL，与CSFV、PRRSV、PRV和PCV-2无交叉反应，且5次重复试验条带清晰正确且一致，证明建立的四重RT-PCR特异性好、灵敏度高、重复性好。 3. 四重RT-PCR用于检测临床样品 检测来自云南部分地区的133份临床样品，PEDV检出率为39.85%（53/133）、TGEV检出率为8.27%（11/133）、PAstV检出率为5.26%（7/133）、PDCoV 检出率为2.26%（3/133），两个混合感染的PEDV ＋TGEV检出率为6.02%（8/133），PEDV ＋PAstV检出率为2.26%（3/133），PEDV ＋PDCoV检出率为2.26%（3/133），多重RT-PCR与单一RT-PCR检测结果符合率达到94.64%以上，证明该方法建立成功。 |
| 并列题名： | The establishment and application of four RT-PCR detection methods for porcine diarrhea virus |
| 题名主题： | PEDV TGEV PAstV PDCoV 多重RT-PCR 学位论文 |
| 中图分类： | S855.3-533 |
| 个人名称等同： | 刘露 著 |
| 个人名称次要： | 张以芳 指导 |
| 团体名称等同： | 云南农业大学 授予 |
| 记录来源： | CN YNAUL 20210422 |