ISBN/价格: | CNY20.00 (估\呈缴)学位论文 |
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作品语种: | chi |
出版国别: | CN 530000 |
题名责任者项: | 脱脂核桃粕中抗氧化多肽的制备、筛选及其活性研究/.朱婉榕著/.陶亮, 邵金良指导 |
出版发行项: | 2023.06.16 |
载体形态项: | 69页:;+图表:;+30cm |
一般附注: | 食品科学技术学院, 学号2021240089 |
提要文摘: | 核桃油加工主要副产物核桃粕的低值化利用是制约核桃产业持续健康发展的重要问题,核桃粕富含优质蛋白,能较好满足人体对蛋白的营养需求。基于核桃蛋白质制备的核桃蛋白肽具有一定的抗氧化潜力。本文以核桃粕为原料提取核桃蛋白,并通过超声波辅助双酶分步酶解技术制备具有抗氧化活性的核桃多肽;基于超滤分离技术研究不同肽段抗氧化活性差异,进一步采用LC-MS/MS液相串联质谱对目标肽段进行序列鉴定,利用分子对接技术筛选抗氧化活性较高的目标肽段并探究其构效关系。具体研究结果如下:
3. 抗氧化活性核桃多肽筛选。利用BIOPEP、EROP-Moscow数据库结合Bioware网站初步筛选具有潜在抗氧化活性的50个肽段;筛选得到富含疏水性氨基酸(Trp、Val、Phe、Leu、Ile、Pro、Gly)的高潜力活性肽段15个,并采用ToxinPred网站完成肽段的毒性预测。利用分子对接技术,基于2FLU对接筛选得到4个高抗氧化潜力肽段NPIFR、IPILR、NLPLIR、DFLLR,其结合能分别为 -3.03 kcal/moL、-3.66 kcal/moL、-4.51 kcal/moL、-4.36 kcal/moL,并确定NLPLIR肽段进一步开展细胞实验,完成抗氧化活性验证。 4. 核桃抗氧化肽对HepG2细胞氧化损伤保护效应、胃肠道消化模拟。培养HepG2细胞,建立氧化损伤模型,探究核桃抗氧化肽的细胞毒性及细胞氧化损伤保护效应。不同浓度NLPLIR(50、100、200、300、400、500 μg/mL)处理细胞24 h,结果表明NLPLIR对HepG2细胞无毒性作用,同时明确了诱导HepG2细胞氧化损伤的最佳条件为:在800 μM H2O2条件下作用4 h,模型组细胞存活率为46.9%。以GSH作对照,设置不同浓度NLPLIR(50、100、200 μg/mL),研究NLPLIR肽段对HepG2细胞氧化损伤保护作用,结果表明NLPLIR肽段能够有效防止细胞氧化损伤,细胞存活率分别提高至54.9%、55.4%、55.9%。同时对细胞内GSH、CAT、MDA、SOD含量进行测定。Model组GSH含量31.77 U/mg pro、CAT含量10.34 U/mg pro、MDA含量55 nmol/mg pro、SOD含量39 U/104cell。与损伤组相比,药物组(NLPLIR)的GSH酶活有所增加(P<0.005),含量为41.03 Umg/Pro并提高CAT酶活至16.77 U/mg pro(P<0.001);提高SOD含量至43 U/104cell。且药物组(NLPLIR)能够降低细胞中MDA含量至41 nmol/mg pro。研究表明NLPLIR对HepG2细胞具有保护作用。胃肠道消化模拟结果表明NLPLIR稳定性较差。 综上所述,基于分子对接研究NLPLIR与Keap1-Nrf2信号通路中Keap1(PDB ID:2FLU)的对接结果以及NLPLIR保护HepG2细胞免受氧化应激损伤的实验结果表明,核桃多肽NLPLIR具有较好的抗氧化活性,该肽段可能通过激活Keap-Nrf2信号通路来保护HepG2细胞免受氧化应激影响,可为抗氧化食品的开发和应用提供一定的理论基础。 |
并列题名: | Preparation, screening and activity of antioxidant peptides from defatted walnut meal eng |
题名主题: | 核桃多肽 抗氧化 分子对接 HepG2细胞 学位论文 |
中图分类: | TS209-533 |
个人名称等同: | 朱婉榕 著 |
个人名称次要: | 陶亮 指导 |
个人名称次要: | 邵金良 指导 |
团体名称等同: | 云南农业大学 授予 |
记录来源: | CN YNAUL 20240301 |