书目详细信息
： 云南部分地区生肉制品中沙门氏菌污染情况及代表菌株耐药性研究
书目信息 机读格式(MARC)
| ISBN/价格： | CNY20.00 (估\呈缴)学位论文 |
|---|---|
| 作品语种： | chi |
| 出版国别： | CN 530000 |
| 题名责任者项： | 云南部分地区生肉制品中沙门氏菌污染情况及代表菌株耐药性研究/.任凌洁著/.高斌指导 |
| 出版发行项： | 2023.6.10 |
| 载体形态项： | 66页:;+图表:;+30cm |
| 一般附注： | 食品科学技术学院, 学号2020210108 |
| 提要文摘： | 食源性致病菌是引起食品安全事故的重要因素。本研究以云南生鲜肉制品（主要为生鲜猪肉、生鲜鸡肉）为研究对象，采集了云南昆明、曲靖、大理、德宏4个地州164份样品，对其被污染情况进行分析以及代表菌株SM-112对磺胺类抗生素的耐药机制进行探究。本研究通过以下研究方法进行研究：采用细菌分离国标方法结合基质辅助激光解析飞行时间质谱（MALDI-TOF MS）进行沙门氏菌的分离鉴定；采用脉冲场凝胶电泳（PFGE）技术对沙门氏菌进行分子分型，通过对其基因图谱聚类分析对沙门氏菌污染源进行追溯；采用微量肉汤稀释法对14种抗生素敏感性进行分析。利用自杀质粒pCVD442Gm介导的同源重组基因编辑技术对磺胺类耐药基因sul2进行敲除，分别通过药敏验证、细胞验证的方法探究验证sul2基因对沙门氏菌耐药性的影响。本研究为云南省生鲜肉制品的食源性致病菌风险评估提供了理论依据，也为临床治疗沙门氏菌疾病研究进展提供了数据参考。主要研究结果如下： （1）沙门氏菌的污染情况：164份样品共有12份样品检出沙门氏菌19株，总检出率为7.32％（12/164），其中生鲜猪肉样品中的沙门氏菌检出率为7.27％（4/55），生鲜鸡肉样品中的沙门氏菌检出率为14.29％（7/49），屠宰线样品的沙门氏菌检出率为1.67％ （1/60）。 （2）沙门氏菌的PFGE分型和聚类分析情况：生鲜肉中的沙门氏菌存在地域聚集，且存在地域交叉污染。 （3）沙门氏菌药敏实验情况：从生鲜肉中分离出来的沙门氏菌耐药率达89.47％，且皆为多重耐药，其中SM-112对12种抗生素耐药，SM-148和SM-013分别对10种抗生素耐药，耐药情况较为严重。 （4）sul2基因敲除情况：利用自杀质粒pCVD442Gm介导的同源重组基因敲除技术成功获得了SM/Δsul2的816bp的精准缺失株，敲除率为100％，使sul2基因功能失效。 （5）验证情况：通过K-B纸片药敏法对基因缺失菌株SM/Δsul2对磺胺类抗菌药物SXT的耐药性测定验证实验，抑菌圈大小由23.33mm扩大至35.33mm，基因缺失株SM/Δsul2对磺胺类药物SXT的耐药性显著降低；通过细胞验证实验，在使用抗生素SXT干预的前提下，基因缺失株SM/Δsul2对细胞的致凋亡率显著下降，成功将磺胺类耐药沙门氏菌逆转成为磺胺类敏感沙门氏菌。 综上所述，沙门氏菌为生鲜肉制品中主要污染食源性致病菌之一，且其耐药性均为多重耐药，耐药情况较严重。同时经过对sul2基因进行敲除验证，菌株对磺胺类抗生素的敏感性明显升高；加入SXT进行干预后，sul2基因缺失菌株对细胞致凋亡率显著下降，说明sul2基因在细菌对磺胺类药物产生耐药的机制中起着一定影响作用。 本研究获得了对云南地区生鲜肉制品中沙门氏菌污染情况系统的探究，为了解云南肉制品污染情况，食源疾病的溯源、预防和控制提供了一定的科学依据，对云南省肉制品食源性致病菌风险评价具有实践指导意义；探究验证了sul2基因对细菌耐药性的影响，为进一步研究细菌对磺胺类抗生素的耐药机制提供了有效的参考价值，为临床治疗更好地解决耐药问题提供了参考依据。 |
| 并列题名： | Study on Salmonella contamination in raw meat products and drug resistance of representative strains in some areas of Yunnan Province eng |
| 题名主题： | 沙门氏菌 自杀质粒 基因敲除 sul2基因 学位论文 |
| 中图分类： | TS251.5-533 |
| 个人名称等同： | 任凌洁 著 |
| 个人名称次要： | 高斌 指导 |
| 团体名称等同： | 云南农业大学 授予 |
| 记录来源： | CN YNAUL 20240517 |