ISBN/价格: | CNY20.00(估)缴送 |
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作品语种: | chi |
出版国别: | CN 530000 |
题名责任者项: | 应用噬菌体展示技术筛选与PRRSV结合的多肽/.张娜娜著/.张改平,张以芳指导 |
出版发行项: | 2017.5 |
载体形态项: | 51页:;+图表:;+30cm |
提要文摘: | 猪繁殖与呼吸综合征是由猪繁殖与呼吸综合征病毒(Porcine reproductive and respiratory syndrome virus, PRRSV) 引起的一种普遍接触性传染病,可引起母猪的繁育阻碍以及仔猪和育成猪严重的呼吸道疾病。猪繁殖与呼吸综合征病毒是有囊膜、单股正链的RNA病毒,分为欧洲型和美洲型两种,特征毒株有Lelystad virus (LV)株和VR-2332株。它严重危害世界列国养猪业开展,并且形成很大的经济损失。PRRS目前没有很好的药物可用,我国主要采取以预防为主的综合性防控措施,因此急需研发高效的新型抗病毒制剂和药物。对比mRNA和核糖体展示技术,噬菌体展示技术具有多肽库范围广、筛选规程简易、筛选效率迅速等优点,特别适用于作用性短肽。噬菌体展示技术在感染人类的疾病如艾滋病毒(HIV)、乙型肝炎病毒(HBV)等取得了良好的成效,为病毒亲和肽的研究奠定了基础。关于病毒亲和肽,筛选能与宿主细胞受体或病毒蛋白酶等活性位点结合的高亲和力多肽,并应用于抗病毒治疗是当前研究的热点。本试验旨在以纯化的完整病毒粒子为靶标分子,应用噬菌体展示技术,以期获得能够与 PRRSV 特异性结合并且能够抑制病毒侵染宿主细胞的多肽,为研制新型的抗病毒制剂或药物奠定基础。在实验过程中利用纯化的 PRRSV 病毒颗粒对噬菌体随机肽库进行筛选。四轮筛选后,噬菌体出现了明显的富集。利用 ELISA 实验对四轮筛选过后随机挑选的 26个噬菌体单克隆的亲和力进行了进一步的鉴定,获得了5个高亲和力的噬菌体单克隆。提取这5个噬菌体单克隆的基因组,通过翻译获得它们所展示的相应多肽的序列,利用在线数据库软件预测分析了多肽特性和功能,然后人工化学合成了这5条多肽,通过实验验证筛选到了一株与PRRSV特异性结合的多肽P4,并且通过实验得知P4与PRRSV结合的靶标蛋白为GP5,另外对P4的功能进行研究发现,其具有阻断病毒感染的能力。为进一步进行疾病的检测及治疗以及疫苗的研制等定向进化研究提供了实验依据和理论基础。 |
并列题名: | Using Phage Display Technology to Screen Peptides binding PRRSV eng |
题名主题: | 猪繁殖与呼吸综合征病毒 噬菌体展示技术 病毒亲和肽 多肽药物 |
中图分类: | S855.3-533 |
个人名称等同: | 张娜娜 著 |
个人名称次要: | 张改平 指导 |
个人名称次要: | 张以芳 指导 |
团体名称等同: | 云南农业大学 授予 |
记录来源: | CN YNAUL 20180718 |