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： 辣木籽素抑制单增李斯特菌的分子机制及其脂质体壳聚糖复合物的制备
书目信息 机读格式(MARC)
| ISBN/价格： | CNY20.00 (估\呈缴)学位论文 |
|---|---|
| 作品语种： | chi |
| 出版国别： | CN 530000 |
| 题名责任者项： | 辣木籽素抑制单增李斯特菌的分子机制及其脂质体壳聚糖复合物的制备/.温燕龙著/.李凌飞指导 |
| 出版发行项： | 2023.6.10 |
| 载体形态项： | 80页:;+图表:;+30cm |
| 一般附注： | 食品科学技术学院, 学号2020210099 |
| 提要文摘： | 随着现代食品工业的发展，人们食品安全意识逐步提高，对化学防腐剂的安全性一直心存顾虑。因此，寻找安全、高效、绿色的天然防腐剂已成为当下研究热点。辣木籽素[4-（α-L-鼠李糖氧基）苄基异硫氰酸酯]是从辣木籽中提取的异硫氰酸酯，具有多种生物活性。在食品、农业、医疗等领域受到广泛关注，但其对食源性致病菌单增李斯特菌的抑菌活性及其机制鲜有报道，且存在受光受热易分解等天然缺陷，使辣木籽素的开发与利用受到极大限制。因此，本研究旨在探究辣木籽素对单增李斯特菌的抑菌活性及其作用机制，并制备辣木籽素脂质体壳聚糖复合物以提高其稳定性，以期为辣木籽素应用于食源性致病菌的预防和控制提供理论依据。采用抑菌圈、最小抑菌浓度、最小杀菌浓度和生长曲线评价辣木籽素对单增李斯特菌的抑菌活性；通过核酸泄漏、蛋白质泄漏、碱性磷酸酶（AKP）测定、胞外总糖含量、碘化丙啶（PI）染色、扫描电镜（SEM）和荧光显微观察探究辣木籽素对单增李斯特菌细胞通透性的影响；使用丙二醛（MDA）、活性氧（ROS）和Ca2+荧光强度、凋亡率评估辣木籽素对单增李斯特菌氧化应激的影响；采用ATP含量和ATP酶活性探究辣木籽素对单增李斯特菌能量代谢的影响；通过结晶紫染色、细菌表面疏水性、菌体泳动性及扫描电镜评估辣木籽素对单增李斯特菌生物被膜的影响；运用荧光光谱和分子对接模拟探究辣木籽素对单增李斯特菌DNA的影响；通过转录组测序技术深入揭示辣木籽素抑制单增李斯特菌的潜在机制。此外，采用紫外分光光度计建立辣木籽素检测方法，并以包封率为评价指标，以磷脂胆固醇比、药脂比、壳聚糖浓度为影响因素，采用乙醇注入法，通过响应面法对辣木籽素复合物制备工艺进行优化；利用透射电镜、粒度仪及电位分析仪对辣木籽素脂质体壳聚糖复合物进行表征，并对其贮藏稳定性进行评价；最后，通过抑菌圈评价辣木籽素脂质体壳聚糖复合物对单增李斯特菌的抑菌活性。主要研究结果如下： （1）辣木籽素对单增李斯特菌具有抑制作用。当浓度为100、200、400和800 μM时，分别产生直径为8.70、10.30、11.00和11.30 mm的抑菌圈，其最小抑菌浓度和最小杀菌浓度分别为400和800 μM。生长曲线结果表明，辣木籽素能够抑制单增李斯特菌的生长，且成剂量依赖性。 （2）辣木籽素破坏了单增李斯特菌细胞壁和细胞膜的完整性，导致核酸、蛋白质、碱性磷酸酶（AKP）和糖类等大分子物质泄漏到胞外。 （3）辣木籽素诱导单增李斯特菌氧化应激反应，使得胞内丙二醛（MDA）和活性氧（ROS）水平升高，导致单增李斯特菌氧化损伤。此外，辣木籽素促使胞内Ca2+失衡进而损伤菌体的代谢功能，最终导致单增李斯特菌凋亡。 （4）辣木籽素干扰单增李斯特菌能量代谢，导致胞内ATP含量下降，胞内总ATP酶、Na+K+-ATP酶和Ca2+Mg2+-ATP酶活性受到抑制。 （5）辣木籽素促使EB-DNA复合体系荧光猝灭，通过氢键和疏水相互作用，干扰单增李斯特菌DNA复制。 （6）转录组测序结果发现，共有794个基因被上调，606个基因被下调。其中与细胞壁和细胞膜生物合成、磷酸转移酶系统、氧化应激、能量代谢、生物膜形成和DNA结合相关的基因表达受到显著影响。 （7）磷脂胆固醇比16:1、药脂比1:50、壳聚糖浓度0.6 mg/mL为辣木籽素脂质体壳聚糖复合物制备工艺的最佳条件。在此条件下辣木籽素脂质体壳聚糖复合物平均粒径为590.20 nm，Zeta电位为55.23 mV，微观结构呈球形或椭圆形，具有单分散的囊泡群。制备的辣木籽素脂质体壳聚糖复合物在4℃条件下较为稳定。 综上，本研究以单增李斯特菌为供试菌，评价了辣木籽素对单增李斯特菌的抑菌活性其抑菌机制，并基于辣木籽素稳定性较差的特点制备了辣木籽素脂质体壳聚糖复合物，以期为天然抑菌剂的开发与利用提供理论基础和科学依据。 |
| 并列题名： | Molecular mechanism of inhibition of Listeria monocytogenes by moringin and preparation of liposomal chitosan complexes eng |
| 题名主题： | 辣木籽素 单增李斯特菌 抑菌机制 脂质体 壳聚糖 学位论文 |
| 中图分类： | TS201.3-533 |
| 个人名称等同： | 温燕龙 著 |
| 个人名称次要： | 李凌飞 指导 |
| 团体名称等同： | 云南农业大学 授予 |
| 记录来源： | CN YNAUL 20240528 |