ISBN/价格: | CNY20.00(估)缴送 |
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作品语种: | chi |
出版国别: | CN 530000 |
题名责任者项: | 松茸提取物对人二倍体成纤维细胞抗氧化、抗衰老效果比较研究/.佟慧玲著/.葛长荣,贾俊静指导 |
出版发行项: | 2019.6.5 |
载体形态项: | 85页:;+图表:;+30cm |
提要文摘: | 目的:本研究以不同方法制备松茸提取物,分别为松茸超纯水提取物(TUE)、乙醇提取物(TEE)、酸性离子水提取物(TAE)。比较不同提取物中抗氧化活性物质(多糖、多酚)的含量及其体外抗氧化能力,筛选各提取物抗氧化效果最佳的提取方法。通过对人二倍体成纤维细胞(HDFs)进行培养,比较各提取物对HDFs 增殖的作用效果;建立HDFs 过氧化氢(H2O2)氧化损伤模型比较各提取物抗氧化损伤的作用效果;建立HDFs 衰老模型比较各提取物抗衰老效果;进一步探明松茸提取物对HDF 细胞产生抗氧化、抗衰老效果的作用机理。 方法:1、对各提取物中含有的多糖和多酚进行定量检测,比较各提取物DPPH清除能力。2、采用MTT 法测定HDFs 存活率绘制其生长曲线;将不同浓度的各提取物加入到HDFs 中孵育48h,比较各提取物对HDFs 的增殖作用及毒性范围。3、采用MTT 法建立H2O2 氧化损伤模型并测定各提取物对HDFs 损伤后存活率的影响。4、采用DCFH-DA 法测定胞内活性氧自由基(ROS)的含量。5、采用实时荧光定量PCR法测定细胞氧化损伤前后CAT、GPx、SOD1 及SOD2 四种抗氧化酶基因的相对表达量。6、采用衰老相关-β-半乳糖苷酶(SA-β-Gal)染色法和MTT 法建立HDFs 衰老模型。7、采用实时荧光定量PCR 法测定细胞衰老损伤前后D310 和DLOOP 线粒体基因的相对表达量。 结果:1、综合多糖、多酚含量及DPPH 清除能力的测定结果,选择各提取物抗氧化效果最佳的提取温度组,分别是:TUE-1(50℃)、TUE-2(90℃)、TAE(50℃)和TEE(50℃)。2、四种提取物不能显著提升HDFs 的增殖活性,但是能显著增加氧化损伤后HDFs 的存活率。3、400 μmol/mL H2O2 损伤2h 会显著降低HDFs 存活率,显著提高胞内ROS 生成量,显著提高CAT 和SOD2 的基因表达量。4、四种提取物能显著降低氧化损伤后胞内ROS 生成量,显著提高CAT、GPx、SOD1 及SOD2 四种氧化酶的基因表达量。5、8 μg/mL D-Gal 损伤72 h 会显著提高HDF 细胞SA-β-Gal染色阳性率,显著降低HDFs 的增殖活性。6、四种提取物能显著降低衰老损伤后细胞SA-β-Gal 染色阳性率,显著提高D310 及D-loop 两种线粒体基因的相对表达量。 结论:三种提取方式均能有效提取出松茸中的活性成分,其提取物均具有良好的体外抗氧化活性;四种提取物均能提高氧化损伤后细胞的存活率、降低损伤后细胞内ROS 水平和提高细胞内CAT 和SOD2 活性,增强HDFs 的抗氧化系统功能,从多个环节减轻过量ROS 造成的损伤。四种松茸提取物均能有效抑制D-Gal 所致的衰老损伤。综合比较实验结果,所有松茸提取物试验组中TUE-2 组具有较高的活性,具有表现为该试验组对的HDFs 细胞的抗氧化和抗衰老损伤效果最好。 |
并列题名: | Comparative study on antioxidant and anti-aging effects ofTricholoma matsutake extract on human diploid fibroblasts |
题名主题: | 松茸提取物 人二倍体成纤维细胞 抗氧化 抗衰老 学位论文 |
中图分类: | TS219-533 |
个人名称等同: | 佟慧玲 著 |
个人名称次要: | 葛长荣 指导 |
个人名称次要: | 贾俊静 指导 |
团体名称等同: | 云南农业大学 授予 |
记录来源: | CN YNAUL 20200312 |