ISBN/价格: | CNY20.00 (估\呈缴)学位论文 |
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作品语种: | chi |
出版国别: | CN 530000 |
题名责任者项: | 番茄绒毡层发育调控基因AMS互作蛋白筛选及绒毡层调控通路预测/.唐榕梓著/.杨正安指导 |
出版发行项: | 2023.5.12 |
载体形态项: | 78页:;+图表:;+30cm |
一般附注: | 园林园艺学院, 学号2020210188 |
提要文摘: | 番茄杂交种优势明显,长期以来一直作为商业化生产的首选材料,但目前番茄杂交制种仍以人工去雄为主,费时费力、制种成本高且杂交种纯度低,随着模式植物花发育分子机制研究越来越深入,转基因、基因编辑技术的成熟,研究者们已利用了一些番茄花发育基因来创制雄性不育系,但实际应用仍不稳定,仍需要加强对番茄花发育分子机制的了解,完善番茄花发育基因网络调控通路。 前期项目组开展了番茄绒毡层发育调控关键基因AMS的研究工作,通过RACE技术成功克隆了AMS基因,构建了超表达及基因编辑载体并通过农杆菌转化法,获得了番茄花粉败育率达60%的AMS超表达和78%基因编辑突变体植株,并对突变体植株的四分体时期与成熟花粉时期的花药进行转录组测序,结果表明AMS参与番茄花药发育调控与绒毡层PCD过程,并影响脂类代谢基因表达,从而导致花粉壁合成受阻小孢子败育。本研究对番茄AMS互作相关蛋白进行筛选研究,主要研究结果如下: (1)通过String数据库预测与番茄AMS蛋白互作基因,结合转录组数据及相关文章筛选出7个可能与番茄AMS蛋白互作基因,对基因进行克隆并测序后开展生物信息学分析。 (2)通过酵母双杂技术进行基因间的互作鉴定,结果表明AMS与MS1035、bHLH091、P450 704B1、GIS蛋白互作。与AMS互作的4个基因再次进行酵母双杂互作鉴定,结果表明bHLH091与MS1035、GIS互作,并对AMS、MS1035、bHLH091、P450 704B1、GIS基因与蛋白结构进行分析,并构建蛋白进化树。 (3)通过qRT-PCR表达分析发现MS1035、bHLH091、AMS、P450 704B1在花中高度表达基因,并且在番茄花不同发育阶段中呈现MS1035—bHLH091—AMS/P450 704B1顺序或协同表达。 (4)对AMS、MS1035、bHLH091、P450 704B1、GIS启动子区域进行分析发现5个基因的启动子区域均含有bHLH家族特定结合元件,E-box与G-box元件,AMS可能通过结合E-box,G-box元件从而影响P450 704B1、GIS、bHLH091、MS1035基因的表达。 (5)结合以上结果与已发表相关论文预测番茄绒毡层调控通路:番茄绒毡层存在MS1035-bHLH091-AMS保守调控通路,MS1035位于绒毡层发育通路最上游,bHLH091、AMS受MS1035的调控,GIS与P450 704B1作用于bHLH091、AMS的下游,bHLH091与AMS存在更复杂的协同模式,GIS作为全新的调控因子参与番茄绒毡层发育,P450 704B1参与花粉脂类合成。 本实验已完成了AMS基因互作相关蛋白筛选工作,预测并构建番茄绒毡层调控通路,为创制稳定高效的雄性不育系奠定理论和材料。 |
并列题名: | Screening of AMS interacting proteins in tomato tapetum development regulatory genes and prediction of tapetum regulatory pathways |
题名主题: | AMS基因 番茄绒毡层 酵母双杂 雄性不育 学位论文 |
中图分类: | S641.2-533 |
个人名称等同: | 唐榕梓 著 |
个人名称次要: | 杨正安 指导 |
团体名称等同: | 云南农业大学 授予 |
记录来源: | CN YNAUL 20240301 |