ISBN/价格: | CNY20.00(估)缴送 |
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作品语种: | chi |
出版国别: | CN 530000 |
题名责任者项: | 水稻金属硫蛋白基因(MT2bL)启动子的克隆与表达分析/.李伟著/.陈丽娟指导 |
出版发行项: | 2015.5 |
载体形态项: | 56页 :;+图表:;+30cm |
提要文摘: | 金属硫蛋白(metallothionein,MT)是一类富含半胱氨酸的蛋白,具有结合金属离子的能力,参与调控细胞内金属的代谢平衡和解毒。由于植物MT基因具有组织表达特异性、发育阶段特异性以及高效的可诱导性,所以MT基因及其功能的研究越来越受到人们的关注。本研究从水稻品种日本晴(Oryza sativa L.ssp. japonica C.V. Nipponbare)基因组中克隆得到了一个植物MT-2类基因Metallothionein2b-Like(OsMT2bL)的启动子序列,构建pMT2bL::GUS融合表达载体,对OsMT2bL基因启动子(pMT2bL)的时空表达特异性和表达效率进行鉴定。同时,我们利用植物启动子区域顺式作用元件数据库(PLACE)对克隆得到的OsMT2bL基因启动子序列进行顺式作用元件的预测和分析,为深入研究MT2bL基因启动子调控基因表达的机制提供理论依据。主要结果如下:(1)克隆得到了一个水稻MT-2类基因OsMT2bL启动子,序列全长2063bp,鉴定出去启动子核心序列位于1935~1984区间。利用植物启动子区域顺式作用元件数据库(PLACE)分析表明含有5个CURE (copper-response element)元件(GTAC)以及多个其它顺式作用元件。(2)成功构建了多个启动子融合表达载体(pCaMV35S::GUS、pMT2bL::GUS、pUbi1::GUS、pCYC::GUS、pACT1::GUS),并通过根癌农杆菌介导转化水稻愈伤组织获得了转基因植株。用特异扩增引物对转基因植株进行PCR检测,能扩增得到相应片段。(3)GUS组织染色分析表明,OsMT2bL基因启动子在水稻幼苗期的根、胚芽、叶中具有高水的GUS表达活性,特别是在胚根根尖和胚芽的GUS表达活性较高;减速分裂期的叶片和颍壳中GUS表达活性较高;在开花后10天的未成熟种子中GUS表达活性也较高;GUS蛋白荧光定量分析表明,OsMT2bL基因启动子驱动GUS基因的表达活性比CaMV35S基因启动子高出3倍以上 |
并列题名: | Cloning and Expression Analysis of MT2bL Gene Promoter in Rice (Oryza sativa L.) eng |
题名主题: | 水稻(Oryza sativa L.) OsMT2bL基因 启动子 GUS基因表达 学位论文 |
中图分类: | S511-533 |
个人名称等同: | 李伟 著 |
个人名称次要: | 陈丽娟 指导 |
团体名称等同: | 云南农业大学 授予 |