ISBN/价格: | CNY20.00(估)缴送 |
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作品语种: | chi |
出版国别: | CN 530000 |
题名责任者项: | 奶牛乳房炎性无乳链球菌分离鉴定及大鼠感染模型的建立/.路璐著/.曲伟杰指导 |
出版发行项: | 2019.6.3 |
载体形态项: | 54页:;+图表 :;+30cm |
提要文摘: | 无乳链球菌是奶牛乳房炎最主要的致病菌之一,由于该菌引起的乳房炎多呈隐性感染,且具有高度传染性,对奶牛养殖场的危害更大。所以本实验对该分离菌建立乳房炎模型,通过观察分析其病理变化和炎症因子表达量及相关性来研究该病的发病机理和作用机制,为奶牛乳房炎的防治提供新的策略。 本研究采集昆明几个不同奶牛养殖场隐性乳房炎患牛乳样131份,通过细菌的形态观察、生化鉴定和PCR鉴定等方法对无乳链球菌进行分离鉴定。将分离到的无乳链球菌采用PFGE分型技术进行分型,确定该菌的亚型分布情况。之后用无乳链球菌分离株感染哺乳期SD大鼠建立动物乳房炎模型,并对受感染的大鼠乳腺组织进行临床症状观察、病理组织学观察和超微结构观察等。同时,采用qRT-PCR技术,通过2﹣ΔΔCT计算方法计算大鼠乳腺组织受到侵袭后的血管生成素样蛋白2(ANGPTL2)和肿瘤坏死因子(TNF-α)的mRNA的转录水平,并采用采用皮尔森相关分析方法对两个因子之间的相互关系进行分析。 该实验结果显示,从采集的乳样中分离鉴定出无乳链球菌23株,由此可见,本地区因无乳链球菌引起的奶牛乳房炎十分严重,且多为隐性感染,这将给当地养殖场带来更大的安全隐患;对23株无乳链球菌进行PFGE分型,观察到13株菌条带分布均匀且具有相同的带型,则说明该地区无乳链球菌分离株没有出现爆发带型或代表带型,分离株的同源性极强,菌株可能来自一个地方;用无乳链球菌分离株成功建立大鼠乳房炎动物模型,结果显示,攻菌组大鼠均没有出现死亡,且各组均表现出不同的临床症状和病理变化,其中E组(1×107 CFU/50 μL)炎性表现更为明显,根据其组织切片观察和电镜观察其病变发现该浓度为最佳建模浓度,这也为乳房炎的后期研究提供了有力的参考;qRT-PCR结果分析显示,实验组E组(1×107 CFU/50 μL)的ANGPTL2和TNF-α mRNA表达水平与对照组相比,差异极显著(P<0.01),皮尔森相关分析方法得出ANGTL2 mRNA的表达水平与TNF-α mRNA的表达水平呈显著正相关性(r=0.859,p<0.01),该结果表明由无乳链球菌致大鼠乳腺组织ANGPTL2的mRNA的上调与乳房炎炎症有关。 通过一系列生化鉴定和PCR技术扩增种属特异性基因cfb鉴定无乳链球菌,并采用PFGE分型技术对本地区亚型分布进行调查,为该地区无乳链球菌的进一步研究提供依据;通过建立无乳链球菌大鼠乳房炎模型,并对其相应病理变化和相关炎症因子表达量变化进行分析,初步研究无乳链球菌对奶牛隐性乳房炎造成的影响,为奶牛隐性乳房炎的致病机制及其防治提供有利的参考。 |
并列题名: | Isolation and identification of Streptococcus agalactis in cow udder and establishment of rat infection model |
题名主题: | 奶牛乳房炎 无乳链球菌 动物模型 病理变化 炎症因子 学位论文 |
中图分类: | S823.91-533 |
个人名称等同: | 路璐 著 |
个人名称次要: | 曲伟杰 指导 |
团体名称等同: | 云南农业大学 授予 |
记录来源: | CN YNAUL 20200312 |