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： Cudratricusxanthone A对非小细胞肺癌三次突变EGFRL858R/T790M/L792H和EGFRL858R/T790M/G796R的抑制效应研
书目信息 机读格式(MARC)
| ISBN/价格： | CNY20.00 (估\呈缴)学位论文 |
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| 作品语种： | chi |
| 出版国别： | CN 530000 |
| 题名责任者项： | Cudratricusxanthone A对非小细胞肺癌三次突变EGFRL858R/T790M/L792H和EGFRL858R/T790M/G796R的抑制效应研究/.冼嘉敏著/.杨姝指导 |
| 出版发行项： | 2023.5.31 |
| 载体形态项： | 75页:;+图表:;+30cm |
| 一般附注： | 食品科学技术学院, 学号2020210068 |
| 提要文摘： | 表皮生长因子受体（Epidermal growth factor receptor，EGFR）参与调节细胞的多项生理过程，其突变激活与癌细胞的分化、增殖、转移和侵袭等过程密切相关。EGFR的过表达发现于多种癌症中。据统计非小细胞肺癌（Non small cell lung cancer，NSCLC）占据肺癌发病率的85%。目前，临床治疗晚期NSCLC的有效策略是分子靶向治疗。EGFR是NSCLC分子靶向治疗的重要靶点。EGFR酪氨酸激酶抑制剂（EGFR tyrosine kinase inhibitors，EGFR-TKIs）的治疗取得了良好的成效，尤其是对携带EGFR敏感突变的NSCLC患者，但是耐药性的产生限制了EGFR-TKIs的长期应用。 第一代EGFR-TKIs以吉非替尼（gefitinib）为代表，可有效抑制EGFR敏感突变，如EGFR L858R、EGFR Del19等。二次突变EGFR，如EGFR T790M突变，是患者接受第一代EGFR-TKIs治疗后所产生耐药的原因。第三代EGFR-TKI奥希替尼（osimertinib）的问世克服了EGFR T790M突变所带来的耐药问题。而三次突变EGFR，如EGFR C797S、EGFR L792H、EGFR G796R突变，是患者接受第三代EGFR-TKIs治疗所产生耐药的主要因素，抑制EGFR C797S突变已有多项研究报道，但是关于EGFR L792H或者EGFR G796R突变的研究却只有较少的报道。 天然产物具有抗癌、抗炎和抗氧化等多种生理活性，且来源广泛，毒副作用小，被广泛应用于药物的开发和研究。本课题旨在筛选出一种天然小分子化合物，能够抑制突变EGFR L792H和EGFR G796R的活化，并通过细胞活性检测实验、蛋白免疫印迹实验、细胞克隆形成实验、细胞迁移实验、细胞凋亡和细胞周期实验等探究其的作用机理。研究结果如下： （1）建立稳定表达三次突变EGFR的细胞株，分别是NIH/3T3-EGFR(L858R/T790M/G796R)、NIH/3T3-EGFR(L858R/T790M/L792H)、Ba/F3-EGFR(L858R/T790M/G796R)和Ba/F3-EGFR(L858R/T790M/L792H)细胞株，进行细胞活性检测实验和蛋白免疫印迹实验鉴定所建立细胞株对奥希替尼耐药，并对实验室所建化合物库中的化合物进行筛选，发现Cudratricusxanthone A（柘树口山酮A，CTXA）可以有效抑制三次突变EGFR细胞的活性，分子对接模拟实验分析结果表明CTXA可与EGFR激酶域结合。 （2）细胞活性检测实验结果表明CTXA以时间和浓度依赖性抑制三次突变EGFR细胞活性，IC50值分别为0.244 µM、0.827 µM、1.413 µM和2.485 µM。 （3）蛋白免疫印迹实验结果发现CTXA可显著抑制EGFR磷酸化的表达水平，下调p-ERK、p-AKT和p-STAT3的表达水平。在显微镜下观察CTXA处理组的细胞形态的变化，与空白对照组相比，CTXA处理组出现大量的死亡细胞，细胞皱缩干瘪、细胞颜色暗淡、透光性差。 （4）CTXA可显著抑制细胞克隆群落的形成且能够抑制细胞的迁移能力，呈现出时间和浓度依赖性。 （5）细胞周期分布检测结果显示CTXA处理组中G1期细胞比例显著增加。CTXA可以诱导细胞周期阻滞，影响细胞的分裂增殖。此外，CTXA可下调Cyclin D1和CDK2的表达水平；凋亡细胞比例数据分析结果显示，CTXA可显著性增加早期凋亡细胞和晚期凋亡细胞的比例，表明CTXA可以诱导细胞发生凋亡。 （6）CTXA与奥希替尼联用不能逆转三次突变EGFR细胞对奥希替尼的耐药性。 本研究发现CTXA对三次突变EGFR细胞的增殖、生长起重要的调节作用，可以降低p-EGFR的表达水平、及其下游信号因子p-ERK、p-AKT和p-STAT3的表达水平，并可以诱导细胞凋亡，使细胞周期发生阻滞，下调周期相关蛋白的表达水平。综上所述，本研究发现CTXA是一种潜在的三次突变EGFR的抑制剂，为三次突变EGFR药物的开发提供了研究基础。 |
| 并列题名： | Study on inhibitory effect of Cudratricusxanthone A on tertiary EGFRL858R/T790M/L792H and EGFRL858R/T790M/G796R mutation in non small cell lung cancer eng |
| 题名主题： | 非小细胞肺癌 表皮生长因子受体 EGFR-L858R/T790M/L792H EGFR-L858R/T790M/G796R CTXA 学位论文 |
| 中图分类： | R73-533 |
| 个人名称等同： | 冼嘉敏 著 |
| 个人名称次要： | 杨姝 指导 |
| 团体名称等同： | 云南农业大学 授予 |
| 记录来源： | CN YNAUL 20240513 |