书目详细信息
： TFAP2α基因调控家鸡乌质性状的细胞分子机理研究
书目信息 机读格式(MARC)
| ISBN/价格： | CNY20.00 (估\呈缴)学位论文 |
|---|---|
| 作品语种： | chi |
| 出版国别： | CN 530000 |
| 题名责任者项： | TFAP2α基因调控家鸡乌质性状的细胞分子机理研究/.胡梅著/.贾俊静指导 |
| 出版发行项： | 2023.6.8 |
| 载体形态项： | 73页:;+图表:;+30cm |
| 一般附注： | 动物科学技术学院, 学号2020210370 |
| 提要文摘： | 黑色素含量是影响乌骨鸡肉质的重要指标。研究表明TFAP2α基因是参与神经嵴细胞生长发育与分化的重要转录调控因子，而黑色素细胞的前体细胞—成黑素细胞是由胚胎神经嵴细胞分化来的，因此TFAP2α基因可能与动物黑色素形成紧密相关，但其在黑色素细胞中的作用机制尚不清楚。本研究通过对无量山乌骨鸡的黑色素细胞进行腺病毒载体过表达TFAP2α基因，通过对过表达该基因的黑色素细胞以及没有过表达该基因但进行相同病毒处理的黑色素细胞进行转录组测序分析，挖掘与黑色素合成相关的差异表达基因，并对这些基因进行筛选及通路分析，最后在无量山乌骨鸡和白洛克肉鸡的胸肌、腿肌、皮肤、肝脏中进行差异基因验证，分析由TFAP2α基因过表达调控的差异基因是否在白鸡和黑鸡相关组织中也存在相同的差异表达，验证TFAP2α基因是否对家鸡乌质性状有调控作用。主要实验结果如下： （1）无量山乌骨鸡血清中真黑色素、褐黑色素、碱溶性黑色素、总黑色素含量显著高于白洛克肉鸡（P<0.05）；且随着日龄的增加，两个鸡种血清的黑色素含量均逐渐减少。 （2）乌骨鸡黑色素细胞的分离、培养及鉴定：显微镜下观察可见，刚分离的黑色素细胞呈黑色圆球状或透明球状；铺板24h后，可见细胞完全贴壁，但未完全伸展，细胞生长出伪足，细胞呈梭形或圆形；36h后，细胞完全伸展，呈三角形、多角形、梭形及树突状。黑色素细胞刚接种后1~2天增殖缓慢，从第5天后呈指数式增长，然后细胞增殖能力慢慢下降；与多巴发生反应呈现阳性，细胞核呈圆形或椭圆形，细胞呈典型树突状，细胞边界模糊，树突明显，细胞质内含有黑色或者棕黑色颗粒物，胞浆含有大量黑色物质。 （3）过表达TFAP2α基因对无量山乌骨鸡黑色素细胞的影响：用MOI值为300的腺病毒转染处于对数生长的黑色素细胞，荧光显微镜下观察发现随着培养时间增长，荧光百分比逐渐增多；然后用CCK-8法检测过表达TFAP2α基因对黑色素细胞活力的影响，结果表明细胞存活率为91.89%，抑制率为8.11%，细胞活力较好，且病毒感染能力较强，感染效果好。 （4）转录组测序分析过表达TFAP2α基因的黑色素细胞：共鉴定出449个差异基因，其中与对照组相比实验组上调基因254个，下调基因195个。KEGG分析结果显示，差异基因主要富集在“黑色素生成”、“酪氨酸代谢”、“ECM-受体互作”、“WNT信号通路”、“细胞因子-细胞因子受体相互作用”、“粘着斑”等黑色素生成相关通路（P<0.05）。筛选差异表达基因TYRP1、Rac1、DBH、Wnt3、Wnt11、Wnt10a、Wnt1在黑色素细胞以及1、42日龄的无量山乌骨鸡和白洛克肉鸡胸肌、腿肌、肝脏、皮肤中进行PCR验证。发现这些基因的表达量在过表达TFAP2α的黑色素细胞中显著上调，且乌鸡显著高于白鸡（P<0.05）。 综上所述，推测TFAP2α基因可能通过调节黑色素合成相关通路中的相关基因来调控黑色素细胞增殖、发育、迁移及黑色素沉积能力，进而影响家鸡乌质性状。 |
| 并列题名： | Study on Cellular and Molecular Mechanism of TFAP2α Gene inRegulating Black Mass Traits in Chickens eng |
| 题名主题： | TFAP2α基因 黑色素细胞 腺病毒载体 转录组测序 学位论文 |
| 中图分类： | S813.2-533 |
| 个人名称等同： | 胡梅 著 |
| 个人名称次要： | 贾俊静 指导 |
| 团体名称等同： | 云南农业大学 授予 |
| 记录来源： | CN YNAUL 20240516 |