ISBN/价格: | CNY20.00 (估\呈缴)学位论文 |
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作品语种: | chi |
出版国别: | CN 530000 |
题名责任者项: | 某种鸡场鸡白痢沙门氏菌分子生物学特性及抗原制备/.武书杰著/.杨亮宇指导 |
出版发行项: | 2023.5.31 |
载体形态项: | 53页:;+图表:;+30cm |
一般附注: | 动物医学院, 学号2021240467 |
提要文摘: | 鸡白痢是由肠道沙门氏菌中的鸡白痢沙门氏菌引起的一种急性、全身性和感染性传染病,通常在2-3周龄的雏鸡中发生,临床症状包括精神沉郁、腹泻、排泄口的粪便粘连,该病具有较高的致死率;成年鸡感染后多呈隐性带病状态,但鸡场内鸡的受精率、产蛋率和孵化率可显著降低。鸡白痢沙门氏菌不仅可以通过食物、水源等途径横向传播,也可以通过鸡蛋(鸡胚)等垂直途径传播,使得鸡白痢的控制难度大大增强。尽管抗菌药物可以有效地降低雏鸡感染后的死亡率,但抗菌药的长期大量使用或滥用导致的细菌的多重耐药性问题也越来越突出。当前,鸡白痢净化是控制该病的有效措施。凝集试验因其简单、成本低、准确可靠等优点,在全球范围内被广泛用于检测鸡白痢沙门氏菌,然而在实践中商品化凝集抗原并非总是可靠的,其检测结果有相当高的漏检率和误检率;研究表明自制抗原在血清平板凝集试验中表现出敏感性和一致性显著提高,阳性反应出现更快且更强。YJ县某种鸡场鸡白痢时有发生,为了有效的控制该场鸡白痢沙门氏菌感染,本研究利用临床样品分离鉴定鸡白痢沙门氏菌,研究其生物学特性;使用临床分离株自制凝集抗原,并评价了其检测效果。 为了明确YJ县某种鸡场鸡白痢沙门氏菌的分子生物学特性,本研究收集了90份18-21日龄的未出壳死胚样品和100份下痢病鸡的泄殖腔棉拭子,利用沙门氏菌属诊断血清和PCR方法进行病原菌的分离鉴定。结果显示,在90份未出壳死胚样品中共分离到80株鸡白痢沙门氏菌(80/90 ,88.89%),而泄殖腔棉拭子样品中未分离到沙门氏菌;采用多位点序列分型技术(MLST)鉴定其基因序列型,结果发现80株鸡白痢沙门氏菌均为ST92(80/80, 100%);利用PCR方法检测分离菌株的13种常见毒力基因的携带情况,结果发现80株鸡白痢沙门氏菌均携带11种毒力基因(invA、hilA、sefA、sipA、sipC、sopB、sopE、spvC、ssaR、ssrA、stnP1),而pefA和rck毒力基因均未检出;采用Kirby-Bauer法对分离菌株进行14种抗生素的药敏试验,结果显示分离的鸡白痢沙门氏菌对红霉素的耐药率最高,为93.75%(75/80),而对氧氟沙星、庆大霉素、氟苯尼考、多粘菌素B、多西环素、加替沙星、氨苄西林、阿莫西林、头孢西丁、头孢他啶、链霉素、四环素和复方新诺明均敏感;进一步利用PCR技术检测分离菌株的六大类耐药基因(β-内酰胺类、喹诺酮类、四环素类、氨基糖苷类、磺胺类、氯霉素类)的携带情况,结果显示与耐药表型一致,其他耐药基因均未检出。 为了探明自制抗原的检测效果,本研究随机选取8株临床分离的鸡白痢沙门氏菌作为候选菌株制备凝集染色抗原,通过自凝集试验,PBS非特异性凝集试验、SPF鸡血清特异性凝集试验和鸡白痢沙门菌阴性鸡血清凝集试验,最终筛选出2株分离株(SPI-1和SPI-2)用于制备自制凝集染色抗原,并与青岛立见商品化抗原、ELISA抗体试剂盒的检测结果进行比较。随机抽取100份临床血清样本进行血清平板凝集试验,结果显示, ELISA抗体试剂盒的阳性率为61%,临床分离株自制抗原阳性率为50%,标准菌株CVCC1792自制抗原阳性率为43%,青岛立见商品化抗原的阳性率为15%;进一步分析,显示自制抗原Kappa一致性试验结果高度一致(0.78),标准菌株CVCC1792自制抗原Kappa一致性试验结果显著(0.615),青岛立见商品化抗原Kappa一致性试验结果不显著(0.203);自制抗原受试者工作特征曲线下面积值可达0.910,标准菌株CVCC1792自制抗原受试者工作特征曲线下面积值为0.852,青岛立见商品化抗原受试者工作特征曲线下面积值为0.623。 综上,本研究从种鸡场死亡鸡胚中可分离到鸡白痢沙门氏菌,检出率高达88.89%(80/90),且都为ST92型,说明鸡胚中的鸡白痢沙门氏菌来源单一;80株鸡白痢沙门氏菌均携带有11种毒力基因,提示毒力较强;除了红霉素外,对其他药物均敏感,提示该鸡场用药相对安全;自制抗原敏感性和一致性显著提高,阳性反应出现更快且更强。本研究补充了YJ县乌骨鸡鸡白痢沙门氏菌病的流行病学资料,为地方品种鸡沙门氏菌病的净化提供了有效的工具支持。 |
并列题名: | Molecular biological characteristics and agglutination antigen preparation of Salmonella pullorum in a chicken farm eng |
题名主题: | 鸡白痢沙门氏菌 毒力基因 耐药表型与基因 自制凝集抗原 学位论文 |
中图分类: | S831-533 |
个人名称等同: | 武书杰 著 |
个人名称次要: | 杨亮宇 指导 |
团体名称等同: | 云南农业大学 授予 |
记录来源: | CN YNAUL 20240603 |