ISBN/价格: | CNY20.00 (估\呈缴)学位论文 |
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作品语种: | chi |
出版国别: | CN 530000 |
题名责任者项: | 甘蔗条纹花叶病毒侵染性克隆的构建及其侵染性分析/.杨银芬著/.张树珍, 李富生指导 |
出版发行项: | 2023.5.24 |
载体形态项: | 74页:;+图表:;+30cm |
一般附注: | 农学与生物技术学院, 学号2021240164 |
提要文摘: | 甘蔗(Sacchrum officinarum)是一种重要的经济作物,是世界上最重要的糖料作物,也是生产生物燃料的原料。在甘蔗生产上,甘蔗条纹花叶病毒(Sugarcane streak mosaic virus,SCSMV)是引起来甘蔗花叶病的主要病原之一,在中国、印度、泰国、印度尼西亚等国家广泛发生,对甘蔗的正常生长和产量造成严重影响。构建SCSMV侵染性克隆是研究其致病机制及其防治策略的重要工具,目前,关于SCSMV致病机制的研究较少,关于SCSMV侵染性克隆的研究尚属空白。本研究在克隆获得SCSMV海南分离物(SCSMV-HN)全长cDNA的基础上,利用Gibson组装技术成功构建由花椰菜花叶病毒35S启动子驱动的SCSMV-inf侵染性克隆。主要研究结果如下: (1)利用RT-PCR技术和RACE技术将SCSMV-HN基因组cDNA分为3个大片段进行克隆和测定,经过序列拼接获得9781bp的全长基因组序列。将克隆获得的SCSMV-HN基因组序列与已报道的12份SCSMV基因组序列进行全基因组序列的一致性和遗传距离分析。结果显示:本研究获得的SCSMV-HN基因组序列与已报道的12份SCSMV基因组序列核苷酸一致性为81.5%-98.4%,与中国SCSMV-JP1分离物遗传距离最近,为0.014,与印度SCSMV-INDR-71分离物遗传距离最远,为0.214。将克隆获得的SCSMV-HN基因组序列与已报道的12份SCSMV基因组序列的P1、HC-Pro、Nla 3个蛋白编码区序列进行氨基酸序列一致性比对,结果显示:P1氨基酸序列一致性为81.9%-98.6%,HC-Pro氨基酸序列一致性为87.4%-100%,Nla氨基酸序列一致性为92.4%-99.5%。(2)本研究在克隆获得的SCSMV-HN全长基因组序列的基础上,将SCSMV-HN全长cDNA分为3个大片段克隆,利用Gibson组装技术将克隆获得的3个大片段与线性化的pGreenII-35S载体进行组装,成功构建了SCSMV-inf cDNA侵染性克隆。将SCSMV-inf cDNA侵染性克隆转化至农杆菌菌株形成重组菌株。 (3)SCSMV-inf cDNA侵染性克隆通过农杆菌摩擦接种法接种至甘蔗脱毒种苗,接种45天后,发现有30%的甘蔗植株感染了SCSMV。 (4)SCSMV-inf cDNA侵染性克隆通过农杆菌注射接种法接种健康蔗芽。接种45天后,发现有6%的甘蔗植株感染了SCSMV。 关键词:甘蔗条纹花叶病毒;基因组;侵染性克隆;接种;感染 |
并列题名: | Construction of infectious clone of sugarcane streak Mosaic virus and analysis of its infectivity eng |
题名主题: | 甘蔗条纹花叶病毒 基因组 侵染性克隆 接种 感染 学位论文 |
中图分类: | S435.661-533 |
个人名称等同: | 杨银芬 著 |
个人名称次要: | 张树珍 指导 |
个人名称次要: | 李富生 指导 |
团体名称等同: | 云南农业大学 授予 |
记录来源: | CN YNAUL 20240301 |