书目详细信息
： 胞外ATP（eATP）活化Notch1信号通路诱发炎症的分子机制研究
书目信息 机读格式(MARC)
| ISBN/价格： | CNY20.00 (估\呈缴)学位论文 |
|---|---|
| 作品语种： | chi |
| 出版国别： | CN 530000 |
| 题名责任者项： | 胞外ATP（eATP）活化Notch1信号通路诱发炎症的分子机制研究/.陈珂著/.张冬英指导 |
| 出版发行项： | 2023.5.31 |
| 载体形态项： | 73页:;+图表:;+30cm |
| 一般附注： | 食品科学技术学院, 学号2020210081 |
| 提要文摘： | 三磷酸腺苷（ATP）是一种主要的促炎分子，能够调节多种细胞活动。在细胞坏死、组织应激或损伤等条件下，细胞破裂释放胞内高浓度ATP到细胞外，短时间使胞外环境中的ATP浓度提升到较高水平，激活NLRP3炎症小体，对周围细胞产生不良影响。Notch1信号通路作为炎症的基本通路之一，参与了巨噬细胞免疫应答过程，调节巨噬细胞炎症响应及巨噬细胞表型变化，并与NLRP3炎症小体、NF-κB信号通路之间存在紧密联系。本文深入研究胞外ATP（eATP）活化Notch1信号通路诱发炎症的分子机制，为未来以Notch1通路作为抗炎靶点的药物开发与利用提供科学依据。 为了探讨eATP诱导巨噬细胞产生的炎症影响，本文以未加入eATP细胞组为对照组，以加入eATP诱导细胞不同时间为处理组（5 min、10 min、15 min、30 min、45 min、60min），检测了巨噬细胞炎症因子（IL-1β、TNF-α、IL-6）含量及其mRNA的转录水平以及巨噬细胞NLRP3炎症小体蛋白表达水平。结果表明：与对照组相比，在诱导巨噬细胞15min时IL-1β含量极显著（P<0.001），在诱导巨噬细胞10min时TNF-α、IL-6含量极显著（P<0.001），在诱导巨噬细胞45min时IL-1β、TNF-α、IL-6的mRNA转录水平极显著（P<0.005），在10min时巨噬细胞NLRP3炎症小体蛋白表达水平显著增加，差异极显著（P<0.001）。总之，eATP短时间处理巨噬细胞，能够显著增加巨噬细胞炎症因子IL-1β、TNF-α、IL-6的分泌及其mRNA的表达，激活NLRP3炎症小体，诱导细胞急性炎症发生。 为了进一步探讨eATP诱导巨噬细胞炎症响应的机制，本文检测了P2X7受体蛋白表达情况。结果表明：ATP诱导巨噬细胞60min内P2X7表达无变化，差异不显著，表明ATP促进巨噬细胞急性炎症可能存在其他潜在的炎症受体。基于此，我们探讨了eATP对Notch1通路的影响，结果表明：ATP诱导巨噬细胞60min内，增加了巨噬细胞内Cleaved-Notch1、HES-1以及NF-κB p-P65蛋白表达，差异极显著（P<0.005），表明短时间内ATP诱导激活了巨噬细胞内Notch1信号及其下游通路。 为了探究ATP激活巨噬细胞Notch1信号的分子机制，本研究观察ATP与Notch NRR1区域的结合情况以及对二硫键的影响，结果表明：ATP与Notch NRR1区域有结合，同时能够影响二硫键并具有浓度梯度性。进一步以DTNB作为二硫键抑制剂，预处理巨噬细胞后，观察Notch1信号的活化状况。结果表明：Cleaved-Notch1、HES-1蛋白的表达均显著减少（P<0.005），eATP可能通过与Notch1蛋白NRR1区域二硫键作用，从而激活了Notch1信号通路。 最后，本文探究食品功能性成分EGCG、α-倒捻子素（α-MG）对eATP诱导的巨噬细胞急性炎症的响应。结果表明：EGCG处理能够有效降低ATP诱导产生的TNF-α的分泌（P<0.01）、α-MG处理能够显著降低NLRP3蛋白的表达（P<0.001）；确证了EGCG、α-MG均可以显著下调Cleaved-Notch1、HES-1蛋白的表达（P<0.001），抑制ATP诱导的巨噬细胞Notch1信号的激活。 结论：本文首次阐明了eATP与巨噬细胞Notch信号NRR1区域二硫键相互作用，激活Notch1信号通路，从而诱导巨噬细胞炎症因子的释放，上调了NLRP3炎症小体，诱导急性炎症的发生。 |
| 并列题名： | Study on the molecular mechanism of extracellular ATP (eATP) promoting inflammation through activating the Notch1 signaling pathway |
| 题名主题： | 胞外ATP 炎症 Notch1 二硫键 EGCG 学位论文 |
| 中图分类： | Q5-533 |
| 个人名称等同： | 陈珂 著 |
| 个人名称次要： | 张冬英 指导 |
| 团体名称等同： | 云南农业大学 授予 |
| 记录来源： | CN YNAUL 20240301 |