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： 辣木叶多糖的制备及其降血糖活性研究
书目信息 机读格式(MARC)
| ISBN/价格： | CNY20.00 (估\呈缴)学位论文 |
|---|---|
| 作品语种： | chi |
| 出版国别： | CN 530000 |
| 题名责任者项： | 辣木叶多糖的制备及其降血糖活性研究/.顾凡著/.田洋指导 |
| 出版发行项： | 2023.6.19 |
| 载体形态项： | 83页:;+图表:;+30cm |
| 一般附注： | 食品科学技术学院, 学号2020210098 |
| 提要文摘： | 糖尿病患病率逐年升高且趋年轻化态势，基于天然资源中寻求能够改善糖尿病症状的活性组分，研发高安全性、低成本的辅助降血糖的膳食补充剂具有一定意义。辣木叶作为新食品原料，含有丰富的蛋白质、多糖、维他命与多种矿物质，且具有多种生物活性组分，其水提物展现出较好的降血糖作用。辣木叶多糖是辣木叶水提物的主要活性成分，具有潜在降血糖活性。不同的提取方式得到的多糖结构活性均不同，已有研究显示酶解-超声波辅助热水制备多糖具有更高的得率和对α葡糖糖苷酶的抑制活性。因此本研究采用超声波辅助-纤维素酶酶解提取辣木叶多糖，对其初步结构表征，并通过理化实验、细胞实验、动物实验，探究降血糖活性及潜在作用机制，旨在为辣木叶多糖改善二型糖尿病及相关功能食品、膳食补充剂的开发提供一定的理论数据。主要研究内容和结果如下。 1. 基于超声波辅助纤维素酶酶解提取辣木叶多糖。采用Plackett-Burman实验筛选高显著影响因素，并进一步利用响应面法优化辣木叶多糖提取工艺。分析辣木叶多糖对α-葡萄糖苷酶的抑制活性和自由基的清除活性。结果表明，在纤维素酶加酶量为0.80%，酶解温度60 ℃，酶解时间120 min，pH为6.0，超声功率490 W，超声温度60 ℃，超声时间为30 min，料液比为1:30的条件下，MOLP提取率最高，可达17.03±1.03 %。经过脱色脱蛋白处理，得到的辣木叶粗多糖（MOLP）是由岩藻糖、鼠李糖、阿拉伯糖、半乳糖、葡萄糖、木糖、甘露糖、半乳糖醛酸、葡萄糖醛酸组成的平均分子量（Mw）为279.45 kDa的粗多糖。MOLP对α-葡萄糖苷酶的IC50值为8.02 mg/mL，对ABTS、DPPH、羟基自由基、超氧阴离子等自由基具有清除活性，IC50值分别为0.21 mg/mL、0.31 mg/mL、0.97 mg/mL、0.49 mg/mL。 2. MOLP体外降血糖作用研究。采用MTT法测定细胞活率，胰岛素辅助高糖建立胰岛素抵抗HepG2细胞模型，通过试剂盒测定MOLP对胰岛素抵抗细胞葡萄糖消耗，糖原合成及抗氧化酶活的影响，评价MOLP缓解胰岛素抵抗的活性及减轻氧化应激的能力。结果表明，MOLP能显著增强高糖诱导胰岛素抵抗HepG2细胞的葡萄糖消耗，糖原合成，CAT、SOD，GSH-Px活性，降低MDA，ROS含量。 3. MOLP体内降血糖作用研究。通过链脲佐菌素（STZ）辅助高糖高脂饮食建立二型糖尿病（T2DM）小鼠模型，以二甲双胍（100 mg/kg）为对照组，MOLP低（100 mg/kg）中（200 mg/kg）高（400 mg/kg）剂量干预T2MD小鼠，测定小鼠生长指标、血液学指标、肝脏抗氧化指标等，并对肝脏胰腺形态学观察，评价辣木叶多糖体内降血糖的效果。结果表明，辣木叶多糖可以稳定血糖，增强口服葡萄糖耐量，降低糖化血红蛋白含量、肝脏脏器指数，血清甘油三酯、血清葡萄糖的含量、对血清总胆固醇、低密度脂蛋白、高密度脂蛋白、胰腺脏器指数没有显著影响。同时，辣木叶多糖显著降低T2DM小鼠肝脏谷丙转氨酶、谷草转氨酶、丙二醛的含量，增加抗氧化酶SOD、GSH-PX、CAT的酶活。从肝脏形态学观察发现，T2DM小鼠肝脏可见少量的肝细胞脂肪变性，多量炎性细胞，肝实质内肝细胞轻度变性，胞质疏松淡染、细胞核消失，正常组和辣木叶多糖干预组鲜有以上特征。 4. 基于转录组学的辣木叶粗多糖降血糖机制研究。分析本次动物实验结果，发现辣木叶多糖降血糖作用的证据大多集中于肝脏，因此通过对小鼠肝脏转录组分析，研究辣木叶多糖调节T2DM小鼠的机制。结果表明，辣木叶多糖通过调节P53信号通路减轻T2DM小鼠肝脏氧化应激，增强小鼠肝脏调节血糖的能力，同时对FOXO信号通路进行调节，缓解小鼠高血糖。使用qPCR技术对信号通路上基因进行验证，与转录组分析中差异基因上调下调结果一致，证明转录组结果准确，P53信号通路和FOXO信号通路极大可能是辣木叶多糖调节T2DM血糖的潜在机制。 综上研究表明，通过超声波辅助纤维素酶提取的辣木叶多糖能有效降低二型糖尿病小鼠血糖，起到降血糖的作用。其可能的机制是通过缓解调节血糖靶器官肝脏氧化应激，增强肝脏调节血糖的能力和作用于FOXO信号通路起到降血糖作用。辣木叶多糖是一种天然的植物降血糖成分，可作为降血糖产品开发。 |
| 并列题名： | Preparation of polysaccharide from Moringa oleifera leaves and its hypoglycemic activity eng |
| 题名主题： | 辣木叶多糖 胰岛素抵抗 氧化应激 转录组 P53信号通路 FOXO信号通路 qPCR 学位论文 |
| 中图分类： | TS201.1-533 |
| 个人名称等同： | 顾凡 著 |
| 个人名称次要： | 田洋 指导 |
| 团体名称等同： | 云南农业大学 授予 |
| 记录来源： | CN YNAUL 20240517 |