书目详细信息
： 致病疫霉Sso1基因调控生长发育和致病性的功能分析
书目信息 机读格式(MARC)
| ISBN/价格： | CNY20.00 (估\呈缴)学位论文 |
|---|---|
| 作品语种： | chi |
| 出版国别： | CN 530000 |
| 题名责任者项： | 致病疫霉Sso1基因调控生长发育和致病性的功能分析/.杨明王著/.吴德喜，赵志坚指导 |
| 出版发行项： | 2023.5.18 |
| 载体形态项： | 61页:;+图表:;+30cm |
| 一般附注： | 植物保护学院, 学号2020210290 |
| 提要文摘： | 植物病原真菌和卵菌的效应蛋白在与寄主作用之前必须被分泌出去，可溶性N -乙基马来酰亚胺敏感因子附着蛋白受体蛋白（SNAREs）家族作为细胞内囊泡运输及膜融合的关键组分在蛋白转运中有核心调控作用。为了解SNARE 蛋白在致病疫霉生长发育和致病过程中的功能，本研究对致病疫霉全基因组中SNAREs蛋白基因进行了生物信息学分析，并对其中一个Qa-SNARE基因PiSso1的功能进行了初步研究。主要结果如下： （1）通过生物信息学分析确定了致病疫霉基因组中编码SNARE蛋白基因37个，可分为Qa（10个）、Qb（9个）、Qc（9个）和R（9个）4个SNAREs蛋白亚家族。保守结构域及跨膜结构域分析表明，除了一个Qa-SNARE（PITG_08364）基因，其余36个基因均含有典型的SNARE结构域，有9个SNARE蛋白不具有跨膜结构域。 （2）PiSso1蛋白与其它代表性真核生物的同源蛋白序列多重比对分析发现t-SNARE 核心模体和跨膜结构有较高的保守性，系统发育分析显示与6个卵菌亲缘性最高，和真菌的最低。转录表达分析发现PiSso1基因在游动孢子、休止孢及及侵染早期高度上调表达。PiSso1融合绿色荧光蛋白（GFP）激光共聚焦显微观察初步将PiSso1基因定位到致病疫霉胞质的细胞器或区室上。 （3）采用CRISPR-Cas和RNAi方法对PiSso1进行基因编辑和沉默，筛选到196个基因编辑候选转化子，测序分析未检测到PiSso1基因敲除突变体，可能与PiSso1敲除后生长非常缓慢或致死有关，也可能因为CRISPR-Cas系统对PiSso1基因编辑效率太低，筛选的候选转化子数量有限，没有获得基因编辑突变体。通过发夹结构的基因沉默的方法，成功从256个转化子中筛选到3个沉默效率在90%以上的沉默突变体，供后续表型和功能研究。 （4）对PiSso1沉默突变体参与致病疫霉致病及调控生长发育表型进行了分析，结果显示，与野生型相比，沉默突变体对马铃薯叶片的致病性显著减弱，表明PiSso1参与了致病疫霉的致病过程；PiSso1基因的沉默，影响了致病疫霉菌丝的极性生长、液泡大小、内吞作用、有性生殖以及对H2O2及温度等非生物胁迫的敏感性；进一步电子显微镜扫描和透射的超微结构分析表明PiSso1可能影响了致病疫霉细胞膜张力和囊泡的外泌。 综上所述，本研究系统鉴定了致病疫霉 SNAREs蛋白家族基因的组成和分类，并进一步对该家族成员PiSso1基因的功能进行了初步研究，为深入解析致病疫霉效应蛋白的分泌及致病机制提供了重要的线索。 |
| 并列题名： | Functional analysis of Sso1 gene of Phytophthora infestans involved in growth, development and pathogenicity |
| 题名主题： | 致病疫霉 SNARE蛋白 Sso1基因 致病性 学位论文 |
| 中图分类： | S432.1-533 |
| 个人名称等同： | 杨明王 著 |
| 个人名称次要： | 吴德喜 指导 |
| 个人名称次要： | 赵志坚 指导 |
| 团体名称等同： | 云南农业大学 授予 |
| 记录来源： | CN YNAUL 20240301 |