ISBN/价格: | CNY20.00 (估\呈缴)学位论文 |
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作品语种: | chi |
出版国别: | CN 530000 |
题名责任者项: | 针垫花组培快繁及开花结实特性研究/.冯光强著/.关文灵, 李世峰指导 |
出版发行项: | 2023.5.18 |
载体形态项: | 68页:;+图表:;+30cm |
一般附注: | 园林园艺学院, 学号2021240209 |
提要文摘: | 针垫花(Leucospermum cordifolium)为山龙眼科(Proteaceae)针垫花属(Leucospermum)植物,该属为南非特有,已经被列为濒危物种。针垫花的观赏及经济价值价很高,目前市场对优质针垫花种苗的需求急剧增加,但是传统的繁殖方法存在种子萌芽率低、成本高、苗木成长缓慢和扦插繁殖系数低、苗木不整齐等问题,导致市场供不应求。利用植物组织快速繁殖技术,能够在短时间内生产大量高质量的苗木,并且保持原有品种的优良遗传性状。针垫花结实率低,而国外进口种子昂贵,因此本文从开花结实特性角度探索结实率低的原因,为种子生产、杂交育种、花期调控、以及新品种的开发提供科学依据。研究结果如下: (1)探索不同消毒方案发现,以75%酒精、2%次氯酸钠、0.1%氯化汞(吐温80)搭配组合处理的消毒方法最好,茎段消毒最优组合为75%酒精处理60s、2%次氯酸钠处理4min、0.1%氯化汞(加4-5滴吐温80)处理8min;茎尖带菌较少,推荐使用最佳的消毒处理组合是75%酒精处理60s、0.1%氯化汞(加4-5滴吐温80)处理6min。此外,本研究发现采用灼烧灭菌可以降低污染率10%左右,可以做到更大程度消除灭菌死角,改善消毒效果。 (2)本文通过L9(34)正交试验筛选了适合茎段侧芽诱导的培养基、细胞分裂素6-BA和生长素NAA的浓度。结果显示,培养基和不同浓度的6-BA对茎段侧芽诱导有极显著影响,而生长素NAA对侧芽诱导不显著。在3个试验因子中,细胞分裂素6-BA对侧芽诱导的影响最大,其次为培养基,生长素NAA对诱导率的影响最小。筛选出了适合侧芽诱导的最优培养基:WPM+1.0mg/L 6-BA+0.05mg/L NAA。同时,试验中发现了茎段倒插能诱导其产生愈伤组织。 (3)探索了不同GA3浓度对茎段侧芽诱导的影响,发现添加GA3后,随着GA3浓度的升高,侧芽诱导率呈上升趋势。添加浓度1.5mg/L的GA3诱导率最高,为75.56%,最快14天就能诱导侧芽开始萌动。 (4)对无菌叶片进行愈伤组织诱导,结果表明细胞分裂素6-BA对愈伤组织诱导率最高,可达88.89%,同时其诱导速度也最快,在接种25d左右从叶片切口处开始产生,颜色为淡黄绿色,数量较多。对比了生长素2,4-D和NAA对愈伤组织的诱导的影响,2,4-D为愈伤组织诱导较适宜的生长素。最适宜诱导叶片愈伤组织的细胞分裂素6-BA与生长素2,4-D浓度梯度为1.0mg/L。 (5)通过对不同抗褐化处理的结果进行分析发现,在培养基中添加1.0g/L碳粉(AC)是最佳抗褐化处理方案,其次是用抗氧化剂1500mg/L柠檬酸和100mg/LVC混合溶液浸泡处理,在培养基中添加1.0g/L PVP也有一定抗褐化效果。 (6)研究结果表明,不同细胞分裂素对增殖具有不同程度的影响,其中浓度为1.5mg/L的6-BA的增殖效果最佳,而添加ZT、CPPU和TDZ的增殖效果较差。添加1.5mg/L GA3可以显著提高针垫花的增殖效果。 (7)MS基本培养基中,不同NH4NO3和KH2PO4浓度对增殖有巨大影响,NH4NO3的最适浓度为1/4MS(412.5 mg/L),KH2PO4最适宜的浓度为1/2MS(85 mg/L),高浓度的CaCl2能一定程度上提高增殖系数,但叶片会发生卷曲现象。 (8)进行持续一年的物候观察,针垫花一般在9月下旬花芽开始萌动,10月下旬进入花蕾期,12月中旬花序开始变得松散,12下旬进入始花期,盛花期集中在次年2-5月,可延续至次年7月,所以花期一般在冬末、早春至夏季。 (9)对花粉活力的研究发现,最适合测定花粉活力的染色法是MTT染色法。一天中,中午12:00的花粉活力最强,未开放的花粉活力为0,而在开放后的1~4天内花粉活力逐渐增强,最高为63.90%,第5天后活力逐渐降低直至为0。离体萌发法测定其花粉活力显示30g/L蔗糖+150mg/L硼酸+50mg/L氯化钙为花粉萌发最佳培养基,其花粉萌发率为67.47%。 (10)柱头可授性结果显示,开花第1~7d其柱头的气泡反应逐渐加强,且在开花第5~7d的反应最为强烈,表明该段时期的柱头可授性最佳,开花第11d可授性逐渐减弱,到开花第30d左右的时候,花序开始凋谢,柱头失去可授性。 (11)杂交指数估算结果表明针垫花部分自交亲和,异交,需要传粉者。 (12)通过对针垫花进行套袋授粉试验,发现针垫花在自然状态下结实率较低,但可以自发的完成授粉,不存在无融合生殖现象。通过人工授粉试验,我们发现异株异花授粉的结实率最高,为17.14%;而自花授粉的结实率最低,为4.94%。重复授粉并没有显著提高结实率,而柱头短截授粉则无法获得种子。通过对人工授粉后的雌蕊进行荧光观察,发现在花柱的整个通道中都存在着大量的胼胝质,其中子房部位的胼胝质最多,推测这是造成针垫花结实率低的重要内因。 |
并列题名: | Study on Tissue Culture, Rapid Propagation and Characteristics of Flowering and Fruiting of Leucospermum cordifolium eng |
题名主题: | 针垫花 组培快繁 花粉活力 开花结实特性 学位论文 |
中图分类: | Q949.739-533 |
个人名称等同: | 冯光强 著 |
个人名称次要: | 关文灵 指导 |
个人名称次要: | 李世峰 指导 |
团体名称等同: | 云南农业大学 授予 |
记录来源: | CN YNAUL 20240301 |