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： 蚜虫生防细菌的分离筛选与应用探究
书目信息 机读格式(MARC)
| ISBN/价格： | CNY20.00 (估\呈缴)学位论文 |
|---|---|
| 作品语种： | chi |
| 出版国别： | CN 530000 |
| 题名责任者项： | 蚜虫生防细菌的分离筛选与应用探究/.钱世雄著/.吴毅歆, 何月秋, 杨绍聪指导 |
| 出版发行项： | 2023.5.12 |
| 载体形态项： | 79页:;+图表:;+30cm |
| 一般附注： | 农学与生物技术学院, 学号2021240152 |
| 提要文摘： | 蚜虫种类众多，分布广泛，是危害农、林、牧业等多种植物的世界性重要杂食害虫，已成为生产过程中最具破坏性的害虫之一，传统化学药剂对其防治效果越来越差，防治越来越困难。生物防治被认为是最具发展潜力的防治方法之一，在作物病虫害的防治中具有非常广阔的应用前景。目前，我国关于蚜虫等害虫生物防治方面的研究相对较少，本研究通过分离筛选对蚜虫等多种害虫有良好防效的有益内生菌资源并探究其防虫抗虫机制，进行推广使用，获得如下研究结果： （1）在云南省部分地区共收集到15份蚜虫样品，经形态学及分子鉴定为甘蓝蚜 ?Brevicoryne brassicae、菊绵蚜Pemphigus betae、棉蚜Aphis gossypii、桃蚜Myzus persicae、台湾韭蚜Neotoxoptera formosana、禾谷缢管蚜Rhopalosiphum padi、苹果绵蚜Erisomal?laniger、苹果黄蚜Aphis?citricolavander、麦二叉蚜Toxoptera graminum、高粱蚜Melanaphis sacchari等10种蚜虫。 （2）本试验在蚜虫、金龟子等死虫体内共分离到55株细菌，筛选出2株死亡率大于80.00%的病原菌，结合形态学、生理生化和分子鉴定后，将其病原菌分别鉴定并命名为解淀粉芽孢杆菌Bacillus amyloliquefaciens AK-12和枯草芽孢杆菌Bacillus subtilis MB-1。筛选出死亡率大于50.00%的病原菌，鉴定为枯草芽孢菌Bacillus subtilis、短小芽孢杆菌Bacillus pumilus、蜡样芽孢杆菌Bacillus cereus、巨大芽孢杆菌Bacillus megeterium、贝莱斯芽孢杆菌Bacillus velezensis、解淀粉芽孢杆菌Bacillus amyloliquefaciens和蒙氏假单孢菌Pseudomonas Monteilii等7种细菌。以甘蓝蚜为试验对象，确定AK-12和MB-1对甘蓝蚜的最佳适用浓度为1×109 cfu/mL。 （3）AK-12和MB-1菌株能产生表面活性素，经HPLC检测后表明AK-12产量为1.63 mg/mL，MB-1产量为0.15 mg/mL。通过诱导转化成功构建AK-12-comK ?SrfAA::kanR突变体菌株，其对蚜虫的杀虫活性下降36.16～46.71%，表明AK-12产生的表面活性素具有杀虫活性。 （4）成功构建AK-12-GFP菌株，其稳定性和生长曲线较野生型无较大差异，并表明AK-12菌株能够良好的定殖于油菜、玉米体内。AK-12菌株具有构建油菜绿色屏障防控蚜虫的作用，同时AK-12菌株具有溶P、解K、固N能力，培养24 h的AK-12菌液IAA测定产量达到2.61 μg/mL。同时AK-12对油菜和玉米具有显著的促生作用。 （5）经过AK-12菌株发酵液处理之后，油菜过氧化物酶（POD），苯丙氨酸解氨酶（PAL），多酚氧化酶（PPO) ，过氧化氢酶活性（CAT）等4种酶活防御酶活性性均得到大幅到提高。其中PAL活性在处理后一直保持升高趋势于36 h达到最大值86.84 U/g，48h时仍然达到71.33 U/g。CAT活性在36 h达到最大值660.45 U/g，48 hCAT酶活性为110.17 U/g。POD和PPO活性均在12 h后达到最大值，分别为1050 U/g和69.5 U/g。AK-12菌株显著提高防御酶活性，显著提高油菜抗病相关基因病程相关基因非表达子?NPR1、植物防御素基因 PDF1.2、病程相关蛋白几丁质酶 Chit 基因以及防御反应相关酶苯丙氨酸解氨酶基因?PAL、过氧化物酶基因 POD?及多酚氧化酶基因 PPO?的表达量，提高的油菜的抗病虫害能力和广谱抗性。 （6）通过响应面设计方法对发酵原料进行优化，得到公式：AK-12菌量（109?/cfu/mL)=8.25+0.74A+0.18B+0.24C-0.23AB+0.25AC+0.32BC-1.4A2-0.3B2-0.53C2。确定菌剂最佳生产条件为可溶性淀粉11.27 g/L，鱼蛋白22.09 g/L，氯化钠10 g/L，MgSO41.21 g/L。 （7）AK-12菌剂使用浓度为1×109 cfu/mL时，对菊绵蚜、甘蓝蚜和棉蚜防治效果在处理10 d后分别达到85.33%，76.89%，75.49%。AK-12菌剂和MB-1菌剂对福寿螺Pomacea canaliculata，耕葵粉蚧Trionymus agrestis，茄缘蝽Acanthocorisscaber，仿污白灯蛾Spilarctia lubricipeda，女贞叶蜂Maerophya?sp，白粉虱Trialeurodes vaporariorum，玉米一点缀螟Ostrinia nubilalis，红蜘蛛Tetranychus urticae，菜青虫Pierisrapae，同型巴蜗牛Bradybaena similaris，瘿蚊iarthronomyia chrysanthemi Ahlberg，红火蚁Solenopsis invicta，暗翅足距小蠹Diarthronomyia chrysanthemi ，黄曲条跳甲Phyllotreta striolata等15种害虫具有杀虫能力，MB-1菌剂对二斑叶螨的室内防治效果在10 d后达到86.83%，对黄曲条跳甲的防治效果在11?d后达到44.47%。AK-12菌剂和MB-1菌剂具有良好的应用前景。 |
| 并列题名： | Isolation, Screening and Application of Aphid Biocontrol Bacteria eng |
| 题名主题： | 蚜虫 生物防治 定殖 诱导抗性 防治效果 学位论文 |
| 中图分类： | S476.1-533 |
| 个人名称等同： | 钱世雄 著 |
| 个人名称次要： | 吴毅歆 指导 |
| 个人名称次要： | 何月秋 指导 |
| 个人名称次要： | 杨绍聪 指导 |
| 团体名称等同： | 云南农业大学 授予 |
| 记录来源： | CN YNAUL 20240523 |