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： 生姜中姜黄素的提取纯化及姜黄素对HePG2细胞氧化损伤的保护作用
书目信息 机读格式(MARC)
| ISBN/价格： | CNY20.00 (估\呈缴)学位论文 |
|---|---|
| 作品语种： | chi |
| 出版国别： | CN 530000 |
| 题名责任者项： | 生姜中姜黄素的提取纯化及姜黄素对HePG2细胞氧化损伤的保护作用/.黄蓉著/.马啸指导 |
| 出版发行项： | 2023.6.20 |
| 载体形态项： | 64页:;+图表:;+30cm |
| 一般附注： | 食品科学技术学院, 学号2021240135 |
| 提要文摘： | 生姜中生物活性成分较丰富，已知的化学成分高达200余种,生姜中的活性成分不仅有姜酚、还有酮类、精油等；属于姜科类多年生根茎类植物，主要作为香辛料和调味品使用，在食品化工应用方面也扮演着重要作用；研究发现，姜黄素对心肌缺血再灌注损伤、心肌梗死、高血压、糖尿病心肌病等具有保护作用。姜黄素是生姜中的主要活性成分，是天然化合物的酚类物质，具有抗氧化、抗炎、抗肿瘤等多种生物活性。姜黄素通过调节炎症相关转录因子和细胞因子可以起到免疫调节和抗炎作用。越来越多的研究发现它对抗氧化、抗炎、抗糖尿病、消除氧自由基、抗肿瘤等具有重要药理作用。由于中药活性成分在原药材中含量通常较低，传统的煎煮法提取效率低下且无法将有效成分分离，如何更高效地提取分离中药有效成分也成为近年来研究热点；因副作用小、价格低廉并且获取渠道简单，它在食品营养和药物领域中的重要性日益突出，而抗氧化作用也是近些年来的研究热点。在中医学上，生姜的作用主要是散寒解表、温中止吐、回阳通脉，还可以起到去痰、消燥的作用。近年来，在临床、体内和体外实验中，发现了姜对老年痴呆、神经性疾病和 NAFLD的防治作用；疾病的防治，如肥胖，肿瘤，中风等；可以在临床上起到一定的药理效果，这为进一步挖掘生姜的营养和保健价值，提供了一定的理论支撑和发展方向。采用萃取与分离技术，对云南罗平姜中的姜黄成分进行了优选，得到了最佳的提取条件。并研究姜黄素抗氧化活性；希望通过本研究能够为生姜活性物质的抗氧化功效提供基础，为食源性活性物质在氧化损伤的预防和干预方面提供依据；具体研究结果如下： 1、生姜中乙醇提取姜黄素的最佳条件为:提取时间12h、乙醇浓度70%、料液比1:20，以此为提取方法，生姜中姜黄素提取率可到6.08%； 2、对以下五种大孔树脂：AB-8、NKA-9、D301、D101、HP-20的筛选中，以吸附率和解吸率为考察指标，NKA-9吸附率和解吸率分别为：39.13%、25.81%，与HP-20在静态吸附和解吸的比较中最先达到平衡状态，因此，NKA-9最适于用在生姜中所提取的姜黄素的纯化； 3、最佳大孔树脂动态吸附条件优化中，选择吸附时间7小时，选择浓度为4mg/mL为上样浓度，上样pH为4，乙醇洗脱剂浓度为90%时，洗脱下来的姜黄素含量为55.26%，在所使用的6个不同浓度的洗脱剂中含量最高；使用该浓度进行洗脱，90%乙醇洗脱剂体积为755.4mL时，经浓缩测量的洗脱液中姜黄素含量为78.85%。据以上实验结果得出，最佳大孔树脂为NKA-9，纯化生姜中提取的姜黄素的最佳条件为：吸附时间7h、上样浓度4mg/mL，上样pH为4，乙醇洗脱剂浓度为90%，洗脱液体积为755.4mL。 4、姜黄素对HepG2细胞氧化损伤保护作用。培养HepG2细胞，建立氧化损伤模型，探究姜黄素的细胞毒性及细胞氧化损伤保护作用。研究明确了诱导HepG2细胞氧化损伤的最佳条件为：在H2O2浓度为800 μmoL/L条件下作用4 h，模型存活率为55.81%。用不同浓度姜黄素（5、10、15、20、25、30、35、40、50 μmoL/L）分别处理细胞12、24 h后，检测细胞存活率、细胞内GSH、CAT、MDA、SOD、ROS、T-AOC、LDH含量。12h药物处理组，当浓度为5-15μmoL/L，细胞存活率在99.17%--91.66%之间，对细胞没有明显的毒性作用；经过24H处理后，细胞存活率显著性降低，在低浓度范围出现抑制，综合俩个时间段和不同浓度，最终筛选12h为药物处理时间；5、10、15μmoL/L为处理浓度进行下一步实验。损伤组细胞内GSH含量12.94 U/mg pro、CAT含量为19.24 U/mg pro、MDA含量 0.28U/mg pro、LDH含量为20.07 U/mg prot、T-AOC含量为2.17µmol/mg prot 、SOD含量 2.22U/mgprot ;与损失组相比，药物组（5、10、15μmoL/L）显著提高细胞内GSH（20.39、14.98、16.05 U/mg Pro）、SOD(3.56、13.48、5.03 U/mg prot )和CAT（34.71、34.51、31.54 U/mg pro）活性；药物组也能够有效的降低细胞内的MDA含量（ 0.25、0.23、0.25 nmol/mg pro），LDH含量(19.53、16.73、18.60U/mg prot)、T-AOC含量(3.01 、2.71 、2.28 µmol/mg prot)；并且能够能减少由H2O2引起的细胞内ROS水平的升高。 5、姜黄素对H2O2损伤的HepG2细胞氧化损伤相关蛋白表达的影响，通过免疫印迹分析得出，不同浓度的姜黄素药物处理组增加了H2O2诱导HePG2细胞中HO-1的表达；显著性提高了细胞内NQO-1蛋白的表达；显著增加了H2O2诱导损伤的HePG2细胞内Nrf2蛋白的表达；著性降低了细胞内Keap1 蛋白表达量，姜黄素通过激活 Nrf2 信号通路，增加Nrf2 蛋白的表达量，对Keap1 蛋白的表达有抑制作用；显著增加了细胞内SOD、BCL-2的表达，降低Caspase-9的表达，增强P-AKT/AKT的表达，对H2O2诱导氧化应激损伤的HepG2细胞形成保护作用，从而降低细胞氧化损伤，姜黄素可有效缓解H2O2诱导的HepG2细胞氧化应激损伤，提高细胞存活率。 姜黄素对H2O2诱导损伤的HepG2细胞具有保护作用，通过增强细胞内源性抗氧化酶活力、提高非酶类抗氧化物水平和抑制细胞凋亡明显缓解H2O2诱导的HepG2细胞氧化应激损伤。基于HepG2细胞氧化损伤模型，表明了姜黄素对于细胞氧化损伤具有一定的保护作用，可为抗氧化食品及护肤品的开发提供一定的理论基础。 |
| 并列题名： | Extraction and purification of curcumin from ginger and the protective effect of curcumin on oxidative damage of HePG2 cells eng |
| 题名主题： | 姜黄素 提取纯化 抗氧化活性 HepG2细胞 学位论文 |
| 中图分类： | O629.9-533 |
| 个人名称等同： | 黄蓉 著 |
| 个人名称次要： | 马啸 指导 |
| 团体名称等同： | 云南农业大学 授予 |
| 记录来源： | CN YNAUL 20240603 |