ISBN/价格: | CNY20.00 (估\呈缴)学位论文 |
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作品语种: | chi |
出版国别: | CN 530000 |
题名责任者项: | 铁皮石斛AGL66和AGL104MADS-box基因克隆、表达及进化分析/.张鑫著/.赵银河,刘旭云指导 |
出版发行项: | 2022.5.31 |
载体形态项: | 54页:;+图表:;+30cm |
一般附注: | 农学与生物技术学院,学号2020240144 |
提要文摘: | 铁皮石斛是价值很高的石斛属兰科植物。由于其生长周期长、自然条件下种子萌发率低,再加上人为长期的过度采摘,使其种质资源得不到很好的发展,目前已经成为濒危植物。因此研究铁皮石斛种子发育对于其种业发展就显得尤为重要。MADS-box是调控花器官发育的关键转录因子,在花生长发育、花分生组织的决定、雄性和雌性配子体的发育等过程中发挥重要作用。由于其特殊的调控作用而被许多学者进行广泛研究。根据蛋白结构的不同,该家族转录因子被分成TypeⅠ型、TypeⅡ型两类。而TypeⅡ型又可进一步分为不同进化枝MIKCC和MIKC*,其中MIKCC型研究的相对较多,而MIKC*型研究的相对较少。因此本实验以铁皮石斛为材料克隆出两个MIKC*型MADS-box转录因子的同源基因AGAMOUS-LIKE 66和AGAMOUS-LIKE 104。研究其在授粉后铁皮石斛的花器官各个阶段的表达差异。 结果显示从铁皮石斛中克隆出的AGL66基因全长为1026bp,开放阅读框(ORF)为966bp,编码321个氨基酸;AGL104基因全长为1092bp,开放阅读框为948bp,编码315个氨基酸;两个序列具有典型的MADS、MADS-MEF2-like结构域。通过NCBI数据库序列比对指出克隆得到的AGL66和AGL104基因与石斛属AGL66和AGL104基因同源性较好达到了97.01%和95.48%。蛋白质同源性达到了78.98%、69.35%。蛋白质理化性质分析发现AGL66基因编码的蛋白质的相对分子质量为36486.59,理论等电点为(pI)5.43,AGL104基因基因编码的蛋白质的相对分子质量为36022.02,理论等电点为5.80。亲疏水性分析显示两个AGL蛋白均为亲水性。基因组结构分析显示AGL66和AGL104基因具有11个外显子,且这两个基因位于铁皮石斛的16号染色体上。通过构建系统发育树分析表明,克隆的AGL基因属于AGL66和AGL104的同源基因,与黄花石斛AGL基因的支持率达到了100,同属于MIKC*进化枝。进化压力计算两个AGL基因的进化压力为0.41839、0.13277,小于1,其在自然选择的条件下呈负选择压力。通过RT-PCR和荧光定量表达数据结果显示AGL66主要在授粉后的1天、3天大量表达,在授粉后的5-20天里表达量下降;AGL104主要在授粉后的3天、5天、7天中表达,在10天、20天表达降低。表明AGL66和AGL104对授粉后的铁皮石斛种子发育的过程相关。本文研究了MIKC*型AGL基因在授粉后的兰科花器官中的表达,推进了MIKC*型基因在兰科植物花和种子发育方面的研究进程,为兰科植物种业资源发展提供分子依据。 |
并列题名: | Clone and Evolutionary analysis of AGL66 and AGL104 MADS-box genes from Dendrobium Candidum |
题名主题: | 铁皮石斛 AGL 基因克隆/表达 进化分析 学位论文 |
中图分类: | S567.239-533 |
个人名称等同: | 张鑫 著 |
个人名称次要: | 赵银河 指导 |
团体名称等同: | 云南农业大学 授予 |
记录来源: | CN YNAUL 20230531 |