书目详细信息
： 普洱茶和茶褐素干预大鼠肥胖的作用及其基于microRNA调节的机制研究
书目信息 机读格式(MARC)
| ISBN/价格： | CNY20.00 (估\呈缴)学位论文 |
|---|---|
| 作品语种： | chi |
| 出版国别： | CN 530000 |
| 题名责任者项： | 普洱茶和茶褐素干预大鼠肥胖的作用及其基于microRNA调节的机制研究/.山波著/.龚加顺指导 |
| 出版发行项： | 2023.6.16 |
| 载体形态项： | 121页:;+图表:;+30cm |
| 一般附注： | 食品科学技术学院, 学号2020210102 |
| 提要文摘： | 普洱茶富含多种活性成分，减肥降脂效果显著。茶褐素（theabrownin，TB）是普洱茶重要的活性成分，但其抗肥胖的潜在机制尚未完全阐明。miRNAs作为一种新型的营养调节生物功能的介质，在肥胖调控中发挥重要作用，探究miRNA介导茶褐素调节肥胖的潜在分子机制，可能有助于丰富茶褐素调节健康的新靶点。因此，本研究采用高脂饮食诱导建立肥胖大鼠模型，同时进行WE（pu-erh tea water extract，WE）和TB干预，采用16S rRNA测序和代谢组学研究HFD大鼠肠道菌群、内源代谢物的变化规律，结合miRNA测序方法和体外/体内实验，探究WE和TB在高脂饮食模式下调控糖脂代谢紊乱的作用机制与miRNA谱的关联性，寻找WE、TB可能调控的关键miRNA。研究结果如下： （1）基于居里点热裂解气质联用技术分析不同裂解温度下WE与TB的挥发性裂解产物。WE和TB在380 ℃或600 ℃热裂解温度下，2种样品裂解产物中相对含量最高的化合物均为咖啡因，其中WE裂解产物中的咖啡因含量高于TB。 （2）基于非靶向代谢组学方法揭示WE与TB之间的成分差异。WE和TB存在较大的代谢物差异，共检测到58种差异代谢物，主要包括12种脂肪酸、19种有机酸、3种生物碱、4种单体儿茶素衍生物、9种黄酮类，其中WE中生物碱、黄酮、单体儿茶素及其衍生物含量高于TB，TB含有更多的有机酸。 （3）明确了WE和TB对高脂饮食大鼠的肥胖预防作用。结果表明WE和TB能够阻止高脂饮食模式下体重的快速增长，降低大鼠血脂血糖水平和脂肪系数，并且WE和TB均可显著降低HOMA-IR（P < 0.05），且存在剂量效应。同时WE和TB能够改善高脂诱导的炎症反应，降低血清中TNF-α、IL-6和IL-1β水平，升高Nrf2含量。此外，WE和TB调节脂质代谢关键酶活性，增强ATGL、HSL酶活性，显著提高SOD、CAT、GSH-Px抗氧化酶活性（P < 0.05），降低MDA累积以及缓解肝脏脂肪变性，降低肝脏中TC和TG水平，升高FFA含量。综合来看WE及TB 在调节肥胖具有优异的效果。 （4）16S rRNA测序分析结果表明WE及TB能够逆转高脂饮食模式的大鼠肠道菌群结构，菌群结构恢复至正常水平，提高HFD大鼠的Bacteroidetes/Firmicutes比值，并且WE和TB干预降低潜在有害菌（Enterobacteriaceae，Helicobacter和Lachnoclostridium）相对丰度；提高潜在有益菌（Bacteroides、Lactobacillus和Bifidobacterium）的相对丰度。表明WE和TB能够靶向调节肠道微生物组成和核心微生物相对丰度预防肥胖。 （5）非靶向代谢组学技术分析大鼠盲肠内容物的代谢物，筛选WE和TB降脂作用相关差异代谢物。WE下调皮质酮、芥基醇、熊去氧胆酸等36种差异代谢物；上调氢化肉桂酸、(R)-3-羟基丁酸、L-苯丙氨酸等9种差异代谢物；与HFD组相比，TB上调甘露庚糖醇、甘油磷酸胆碱和L-组氨酸等13种差异代谢物产物，降低苜蓿酸、2-甲基吡咯、甘露醇等8种差异代谢产物。WE和TB预防肥胖与苯丙氨酸代谢、甘油磷脂代谢、类固醇激素生物合成、花生四烯酸代谢和咖啡碱代谢等多个途径密切相关。 （6）采用miRNA测序技术探究WE及TB在高脂饮食模式下大鼠肝脏miRNA表达的影响，筛选与WE及TB降脂作用相关的miRNA。与HFD组相比，WE、TB显著下调miR-125b-5p、miR-223-3p_R+2、miR-148b-3p和miR-1247-5p表达（P < 0.05），与正常组的表达水平无显著差异；差异miRNA靶基因在MAPK、P13K-AKT、AMPK、FOXO等信号通路显著富集，差异miRNA与肥胖相关指标显著相关（P < 0.05），并且WE及TB调控差异miRNA富集信号通路。推测差异miRNA可能是WE和TB调节HFD诱导肥胖发生的潜在调节因子。 （7）验证了WE、TB调控大鼠肥胖依赖于miRNA表达，WE及TB显著上调PI3K-AKT-FOXO信号通路中AKT、PGC-1a、G6Pase基因表达水平，显著下调FOXO、PGC-1a、G6Pase表达水平（P < 0.05）；miRNA过表达则抑制PI3K-AKT-FOXO信号传导，说明WE及TB通过抑制异常表达的miRNA激活PI3K-AKT-FOXO信号通路调节糖脂代谢。 （8）揭示了差异miRNA调节糖脂代谢的具体分子机制，明确了miRNA的作用靶点。筛选出P13K-AKT-FOXO信号通路信号分子，包括Grb2、Pik3r3、Pik3ca和Gng10基因作为候选靶基因。WE与TB显著上调miRNA靶基因表达水平，miRNA过表达则显著降低靶基因表达水平（P < 0.05）；此外，靶基因野生型报告载体与miRNA共转染导致荧光素酶活性显著降低，研究结果确定了miRNA的作用位点。 本研究表明，WE、TB具有有效调控糖脂代谢，改善非酒精性脂肪肝，增加胰岛素敏感性以及抑制氧化应激和炎症反应的作用。WE和TB对于上述表型的改善主要通过调控肠道菌群、代谢物组成的变化和miRNA-PI3K-AKT-FOXO途径来实现。 |
| 并列题名： | Effect of Pu-erh Tea and Theabrownin in the Intervention of Obesity in Rats and its Mechanism Based on MicroRNA Regulation |
| 题名主题： | 普洱茶 茶褐素 高脂饮食 肥胖 肠道微生物 miRNA 学位论文 |
| 中图分类： | S571.1-533 |
| 个人名称等同： | 山波 著 |
| 个人名称次要： | 龚加顺 指导 |
| 团体名称等同： | 云南农业大学 授予 |
| 记录来源： | CN YNAUL 20240301 |