ISBN/价格: | CNY20.00 (估\呈缴)学位论文 |
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作品语种: | chi |
出版国别: | CN 530000 |
题名责任者项: | 月季对霜霉病菌侵染的响应与转录组分析/.李学著/.贺水莲,吴红芝指导 |
出版发行项: | 2023.5.16 |
载体形态项: | 79页:;+图表:;+30cm |
一般附注: | 园林园艺学院, 学号2020210200 |
提要文摘: | 月季(Rosa chinensis Jacq.)是世界四大切花之一,在全世界广泛种植,深受世界人们的喜爱,几乎占据了切花市场的半壁江山。然而,在设施生产栽培中,月季霜霉病常易发生,给月季切花产业造成严重经济损失。评价月季品种对霜霉病的抗性,找到霜霉病抗病性基因是月季分子育种的基础。本研究采用形态学及分子手段鉴定了月季霜霉病的病原,采用“棚内小环境培养法”培养月季霜霉病原物,通过田间自然接种法对10个切花月季品种进行霜霉病的抗性比较并分析气孔相关指标与抗病性的关系,对高感品种‘弗洛伊德’进行了相关组织学观察和生理指标的测定,并通过转录测序分析不同侵染时期月季对霜霉病病菌侵染的抗性响应机制,筛选月季霜霉病抗性相关基因。主要研究结果如下: (1)通过形态学及分子手段鉴定病原物,以带有典型月季霜霉病的月季切花品种‘梦魅’为材料进行分离培养,结果表明培养得到的霜霉病病原菌(DM)确系为霜霉属的月季霜霉(Peronospora sparsa),与霜霉属的同源性达到99.84%,构建霜霉属NJ系统发育树,病原物与Peronospora sparsa聚为一枝。 (2)分别采用“完整叶法”、“水琼脂培养法”及“棚内小环境培养法”对DM进行培养,发现“棚内小环境培养法”培养效果最佳,在棚内湿度达到70%左右时容易产生孢子。 (3)分别采用室内人工接种法及自然接种法对月季品种“紫霞仙子”、“探险家”、“橙色风暴”及“暗夜魅影”进行接种,接种结果表明室内人工接种法接种效果差,无法出现病症,自然接种法能够有效接种上DM,且四个品种间出现了抗病性的差异:‘紫霞仙子’>‘探险家’>‘橙色风暴’>‘暗夜魅影’(抗病性由大到小)。 (4)采用自然接种法对10个切花品种月季进行抗病性评价,统计21d平均病情指数,结果表明‘弗洛伊德’和‘蜜桃雪山’为高感霜霉病品种,病情指数(DI)分别为63.04和63.57;并对10个品种的月季新老叶片进行气孔面积,密度与DI的相关性分析,发现月季霜霉病的DI和新叶的气孔密度表现出极显著的负相关,相关系数为-0.684,与老叶的气孔面积表现出极显著的负相关,相关系数为-0.581;且新叶的气孔密度普遍高于老叶气孔密度。 (5)以高感月季品种‘弗洛伊德’为材料。采集接种DM出现症状后的1d、3d、6d、9d、12d的叶片,进行拍照观察并使用台盼蓝对菌丝进行显微染色观察,发现叶中部的病菌数量和病原菌萌发程度总是高于叶片其它部位,更易受到DM的侵染;取接种DM后0d、4d、8d、12d、16d的月季新鲜叶片进行组织化学染色观察及生理指标的测定:台盼蓝、DAB、NBT 染色试验发现DM侵染速度较慢,到12d才开始有明显的染色;对接种植株叶片的抗氧化物酶(POD、SOD、CAT)的活性及抗病相关物质的含量(可溶性糖、脯氨酸、叶绿素、MDA)进行测定发现,它们几乎都是呈现出先上升后下降的倒“V”字型变化。 (6)以接种0d为对照,将接种DM后4d、8d、12d、16d四个时间点进行转录组分析,新老叶都在DM侵染后12d得到最多的差异表达基因,侵染后12d是DM侵染的一个重要时间点。差异基因主要富集在催化活性、结合、及代谢过程等GO条目;主要富集到的代谢通路为光合作用、植物激素信号转导和卟啉代谢等代谢通路,且大多数的差异基因表现为下调模式。在植物-病原菌互作通路关于真菌与植物互作代谢途径中,Ca2+信号通路中相关差异表达基因表达上调,相关病程蛋白被诱导。对四个时间点所有差异表达基因进行分析,新叶中获得 13个转录因子,老叶中获得10个转录因子,二者含有最多差异表达基因的转录因子家族都为MYB,其次是WRKY家族,其差异表达基因的表达模式几乎都为上调。 |
并列题名: | Response of Rose to Downy Mildew Infection and Transcriptome Analysis |
题名主题: | 月季 霜霉病 抗性鉴定 转录组测序 差异表达基因 学位论文 |
中图分类: | S685.12-533 |
个人名称等同: | 李学 著 |
个人名称次要: | 贺水莲 指导 |
个人名称次要: | 吴红芝 指导 |
团体名称等同: | 云南农业大学 授予 |
记录来源: | CN YNAUL 20240301 |