书目详细信息
： ‘西伯利亚’百合LobHLH35基因休眠功能研究
书目信息 机读格式(MARC)
| ISBN/价格： | CNY20.00 (估\呈缴)学位论文 |
|---|---|
| 作品语种： | chi |
| 出版国别： | CN 530000 |
| 题名责任者项： | ‘西伯利亚’百合LobHLH35基因休眠功能研究/.张济民著/.王有国，贾文杰指导 |
| 出版发行项： | 2023.5.23 |
| 载体形态项： | 58页:;+图表:;+30cm |
| 一般附注： | 园林园艺学院, 学号2020210196 |
| 提要文摘： | 百合是在我国以及世界范围内都是重要的鲜切花种类之一，在观赏、食用、药用、室内盆栽以及园林景观绿化等方面被广泛应用，在花卉产业中处于重要地位。但是生产上受限于打破百合鳞茎休眠的手段和技术导致的百合鳞茎种球发芽率低、出芽不整齐、鲜切花质量差等现象，百合产业的发展受到极大的限制。因此探索一种适用于不同产地、不同品种的百合在生产中维持鳞茎休眠或解除鳞茎休眠的新方法，对于推进我国百合生产发展具有重要的实际意义。而植物 bHLH 转录因子作为植物中最大的转录因子家族之一，参与调控植物从生长发育过程中的复杂的生物反应过程，但学界对该家族基因在休眠解除中的作用研究较少。因此本研究以项目组前期获得的西伯利亚百合休眠解除过程中差异上调表达 LobHLH35基因的CDS 序列为基础，以西伯利亚百合为试验材料，采用RT-PCR技术扩增 LobHLH35 基因全长，并对其进行生物信息学分析，预测与其相互作用的下游蛋白质，构建植物亚细胞定位、转录激活验证、过表达载体，利用成熟的农杆菌介导拟南芥（Arabidopsis thaliana）花序浸润技术，获得并验证转基因拟南芥植株，测定有关数据，探究LobHLH35 基因与西伯利亚百合休眠解除的关系，为百合休眠解除机制的研究奠定一定的研究基础。主要研究成果如下： 1、本试验克隆得到一个与百合鳞茎休眠相关的基因LobHLH35，其编码的转录因子CDS全长 750 bp，共编码 249个氨基酸，经过生物信息学预测分析LobHLH35蛋白为不稳定、亲水、无跨膜结构的非分泌蛋白。LobHLH35氨基酸残基序列具有 1个典型的bHLH保守结合域，归属于 bHLH转录因子家族。LobHLH35 氨基酸残基序列与非洲油棕氨基酸序列同源性最高。 2、将含有目的基因LobHLH35片段的 pBWA(V)HS-LobHLH35 -GLos-GFP 表达载体，通过根癌农杆菌介导的瞬时转化体系，将重组质粒转化入本氏烟草（Nicotiana benthamiana）叶片中，亚细胞定位结果显示LobHLH35蛋白定位在细胞核上，与亚细胞定位预测结果一致。 3、将含有目的基因的 pGBKT7- LobHLH35融合载体，利用酵母感受态细胞的响应报告系统转化入酵母感受态 Y2H Gold菌株，经过培养，自激活验证结果显示LobHLH35 在酵母细胞中不具有转录自激活活性，可用于后续试验。 4、经过抗性筛选，本试验共收获T1代转基因拟南芥10株；转基因拟南芥相比于野生型植株，在外源ABA处理下，萌发率显著高于野生型，打破种子的休眠状态。LobHLH35在转基因拟南芥中表达量较高，显著高于WT植株。 5、利用染色体步移技术获得的潜在受LobHLH35调控基因LoXTH23基因的启动子，该基因启动子含有一个bHLH基因结合位点E-box 序列-CATGTG-，启动子核心元件 TATA-box 和 CAAT-box，以及脱落酸响应元件、光响应元件、茉莉酸甲酯响应元件、对厌氧诱导必不可少的顺式调节元件以及环境胁迫响应元件。 综上所述，西伯利亚百合LobHLH35转录因子可能通过调控植物体内ABA的含量和细胞壁的活性来促使植物种子打破休眠状态，可能是百合鳞茎休眠解除的调控因子之一。 |
| 并列题名： | Study on the dormancy function of LobHLH35 gene in ’Siberian’ lily |
| 题名主题： | 西伯利亚百合 bHLH转录因子 遗传转化 基因功能研究 学位论文 |
| 中图分类： | S682.29-533 |
| 个人名称等同： | 张济民 著 |
| 个人名称次要： | 王有国 指导 |
| 个人名称次要： | 贾文杰 指导 |
| 团体名称等同： | 云南农业大学 授予 |
| 记录来源： | CN YNAUL 20240301 |