ISBN/价格: | CNY20.00 (估\呈缴)学位论文 |
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作品语种: | chi |
出版国别: | CN 530000 |
题名责任者项: | 铁皮石斛粗多糖对肠道固有层细胞免疫调节机理的研究/.李佳著/.白忠彬指导 |
出版发行项: | 2022.05.13 |
载体形态项: | 68页:;+图表:;+30cm |
一般附注: | 食品科学技术学院,学号2019210070 |
提要文摘: | 肠道固有层作为肠道黏膜免疫系统发生免疫应答的效应部位,对于研究整个肠道具有重要的意义。铁皮石斛富含多糖、黄酮类、生物碱等活性物质,是纯天然绿色养生食品。本研究以林下仿生铁皮石斛茎为原料,通过响应面优化铁皮石斛粗多糖(crude polysaccharide of Dendrobium officinale Kimura et Migo,DOP)的提取工艺并检测总糖含量及单糖组成。利用环磷酰胺(Cyclophosphamide,Cy)构建免疫抑制小鼠模型,采用HE染色观察空肠组织病理学变化;利用全自动血细胞计数仪分析小鼠血液中免疫细胞数量;酶联免疫法(Enzyme linked immunosorbent assay ,ELISA)检测小肠组织免疫相关细胞因子及免疫球蛋白的含量;实时荧光定量PCR检测肠道组织T细胞受体信号通路靶向基因的表达;流式细胞术结合免疫荧光标记观察肠道固有层免疫细胞群的变化,来探讨铁皮石斛粗多糖对肠道黏膜免疫系统的影响。研究结果如下: 1、铁皮石斛粗多糖提取的最佳工艺为:液料比60:1,提取时间2h,提取温度90℃,重复提取3次。在此条件下得到的粗多糖提取率约为32.10%,总糖含量为85.31%。 2、DOP是由0.18%的鼠李糖、0.18%的阿拉伯糖、0.48%的半乳糖、28.36%的葡萄糖、70.43%的甘露糖、0.37%葡萄糖醛酸等组成。其中占比最多的是甘露糖和葡萄糖,多糖纯度为64.11%,为中性糖。该石斛多糖的数均分子量(Mn)为56.04 KDa,该多糖的重均分子量(Mw)为103.52 KDa,多分散指数为1.848。 3、动物实验结果表明,DOP对免疫抑制小鼠肠道固有层淋巴细胞具有免疫调节作用。具体表现为: (1)DOP可以减缓免疫抑制小鼠体重下降并恢复小鼠的饮食,提高小鼠的脾脏和胸腺指数,使Cy处理后的小鼠外周血白细胞和淋巴细胞总量显著增加。模型组小鼠中性粒细胞和单核细胞的数量显著增加,提示环磷酰胺诱导小鼠发生炎症。DOP和LMS的介入,使中性粒细胞和单核细胞数量显著减少。 (2)DOP能改善环磷酰胺处理后的肠道黏膜损伤,使肠绒毛变长变厚,排列较之前更为规则,结构完整。通过统计分析,与模型组相比,DOP组和LMS组的肠道黏膜厚度和绒毛长度/隐窝深度显著增加。 (3)与对照组相比,模型组肠道组织中的细胞因子IL-2、TNF-α和IFN-γ和免疫球蛋白IgG和SIgA分泌水平显著降低,IL-4分泌水平虽有所下降,但无显著差异;当给予DOP后,肠道组织中的细胞因子和免疫球蛋白的分泌水平显著升高。 (4)与对照组相比,在肠道组织中模型组LAK,Zap70,Cam和Il-2基因mRNA在肠道组织中的的相对表达量显著降低,而DOP处理后可显著上调免疫抑制小鼠肠道T细胞受体信号通路靶向基因的表达。 (5)通过流式细胞术结合免疫荧光标记检测肠道固有层淋巴细胞,与对照组相比,模型组CD3+T细胞、CD4+T细胞和CD19+B细胞数量降低,而Treg细胞数量显著增加。DOP干预后,可增加肠道固有层及绒毛基底层上CD4+、CD8+和CD19+的细胞数量,并减少Treg细胞的数量,使其恢复至与正常对照组相当的水平。 综上所述,铁皮石斛粗多糖通过影响肠道固有层淋巴细胞发挥对肠道的免疫调节功能。动物试验结果表明,DOP可以增加小鼠的摄食量,减缓小鼠体重下降,提高小鼠脏器指数,增强免疫器官的免疫调节功能;恢复小鼠肠道中细胞因子的平衡,提高免疫球蛋白的分泌;通过增强肠道T细胞受体信号通路靶向基因mRNA的表达,增加肠道固有层T淋巴细胞以及B淋巴细胞的数量,从而改善免疫抑制小鼠肠道黏膜固有层的细胞及体液免疫,并通过减肠道固有层Treg细胞的数量来降低其免疫抑制作用,从而维持肠道固有层的免疫稳态。本研究为肠道黏膜免疫系统免疫调节提供了新的研究思路,也发掘了林下仿生铁皮石斛资源的新功效。 |
并列题名: | Immune regulation mechanism of crude polysaccharide from Dendrobium officinale Kimura et Migo on intestinal lamina propria cells eng |
题名主题: | 铁皮石斛粗多糖 提取工艺 免疫抑制 肠道固有层淋巴细胞 免疫调节 学位论文 |
中图分类: | TS201.4-533 |
个人名称等同: | 李佳 著 |
个人名称次要: | 白忠彬 指导 |
团体名称等同: | 云南农业大学 授予 |
记录来源: | CN YNAUL 20230323 |