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： 21岁高龄猪体细胞克隆效率的研究
书目信息 机读格式(MARC)
| ISBN/价格： | CNY20.00 (估\呈缴)学位论文 |
|---|---|
| 作品语种： | chi |
| 出版国别： | CN 530000 |
| 题名责任者项： | 21岁高龄猪体细胞克隆效率的研究/.陈曦著/.李莲军,魏红江指导 |
| 出版发行项： | 2023.6.25 |
| 载体形态项： | 45页:;+图表:;+30cm |
| 一般附注： | 动物医学院, 学号2020210401 |
| 提要文摘： | 从多莉羊诞生至今体细胞核移植（Somatic Cell Nuclear Transfer）技术已走过27年的历史，因其能将体细胞重编程为全能状态而备受关注。濒死老年动物成纤维细胞和新生动物成纤维细胞有何不同？两类细胞重编程效率如何？使用极度衰老的动物成纤维细胞能否成功克隆出后代？因此，本研究将探索随着个体年龄的增长，个体衰老与细胞表型、细胞增殖、细胞衰老、细胞凋亡、胚胎发育等有无必然联系，并为体细胞核移植技术在濒危动物遗传资源保护及“复活”中的应用奠定理论依据。 本研究使用21岁高龄公猪为主要研究对象，3日龄、2岁龄的滇南小耳猪为对照。通过观察细胞表型、绘制生长曲线、检测细胞衰老和凋亡，并进行核移植胚胎体外培养和胚胎移植体内实验，多方面评估衰老个体细胞与新生个体细胞的差异。三种细胞的生长曲线呈典型的S型，21岁高龄猪耳成纤维细胞生长最快、数量最多、活性最好，与2岁龄、3日龄猪耳成纤维细胞数量相比差异显著，3日龄猪成纤维细胞增殖最慢且与2岁龄猪耳成纤维细胞相比差异显著。3日龄猪耳成纤维细胞衰老率（24.1％±11.8％）显著高于21岁高龄猪耳成纤维细胞衰老率（15.5％±8.1％，p＜0.05），并高于2岁龄猪（17.8％±10.3％）但二者间无显著性差异（p＞0.05）。21岁高龄猪耳成纤维细胞凋亡率（5.3％±0.4％）显著低于3日龄猪（6.2％±0.7％）和2岁龄猪（7.4％±2.5％，p＜0.05）。凋亡水平最高发生在2岁龄猪耳成纤维细胞。 3日龄猪耳成纤维细胞构建的1027个克隆胚胎卵裂率为74.6％±11.3％，囊胚率为22.4％±7.8％。21岁高龄猪耳成纤维细胞构建克隆胚胎999个，卵裂率为70.2％±15.2％，囊胚率为21.1％±9.3％，两组细胞卵裂率和囊胚率均无显著性差异（p＞0.05）。21岁高龄猪耳成纤维细胞克隆胚胎囊胚细胞数（42.1±21.0）显著高于3日龄猪（32.8±11.6，p＜0.05），表明21岁高龄猪耳成纤维细胞克隆囊胚质量好于3日龄新生猪。两组克隆胚胎随机均等分配合并移植进入7头代孕母猪体内，其中3头妊娠、获得克隆仔猪12头。经过DNA微卫星分析鉴定，3日龄猪耳成纤维细胞克隆猪4头，21岁高龄猪耳成纤维细胞克隆猪8头。21岁高龄、3日龄猪及其各自克隆后代耳成纤维细胞端粒酶活性水平无显著性差异。 本研究通过建立21岁高龄猪和3日龄、2岁龄猪耳成纤维细胞系，对比三种细胞生长状况、衰老和凋亡，并进行核移植研究。发现21岁高龄猪细胞在生长状况、衰老、凋亡等并不比新生3日龄猪细胞差。在核移植胚胎体外发育方面也没有显著性差异，但通过胚胎移植成功获得了更多的21岁高龄猪耳成纤维细胞克隆后代，表明使用21岁高龄猪成纤维细胞可以通过体细胞核移植技术将其再度“复活”，为体细胞核移植技术在濒危动物遗传资源保护中的应用奠定基础。 关键词：21岁高龄猪；成纤维细胞；细胞生物学特性；体细胞核移植 |
| 并列题名： | Cloning Efficiency of 21-Year-Old Pig’s Somatic Cells |
| 题名主题： | 21岁高龄猪 成纤维细胞 细胞生物学特性 体细胞核移植 学位论文 |
| 中图分类： | S852.1-533 |
| 个人名称等同： | 陈曦 著 |
| 个人名称次要： | 李莲军 指导 |
| 个人名称次要： | 魏红江 指导 |
| 团体名称等同： | 云南农业大学 授予 |
| 记录来源： | CN YNAUL 20240301 |