ISBN/价格: | CNY20.00 (估\呈缴)学位论文 |
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作品语种: | chi |
出版国别: | CN 530000 |
题名责任者项: | 核桃分心木多酚改善小鼠溃疡性结肠炎作用机制研究/.陈锦莲著/.解静, 赵一鹤指导 |
出版发行项: | 2023.6.19 |
载体形态项: | 65页:;+图表:;+30cm |
一般附注: | 食品科学技术学院, 学号2021240131 |
提要文摘: | 溃疡性结肠炎(UC)是结肠和直肠的一种慢性非特异性炎症性疾病,在世界范围内发病率正逐年上升,传统药物治疗会出现严重不良反应,因此从天然产物中挖掘对UC有改善或缓解作用的功能营养因子具有重要意义。核桃(Juglans regia)系胡桃科(Juglandaceae)核桃属(Juglans)植物,分心木是核桃隔膜,其作为一种传统中药具有多种药用活性,但存在开发利用率低和潜在价值尚未发挥等问题。核桃分心木富含多酚、黄酮等活性成分,且已知多酚具有较好的抗炎活性,但是目前核桃分心木多酚的抗结肠炎作用及机制仍未见报道。 因此,本研究以核桃分心木为原料,提取分心木多酚,采用正交试验对分心木多酚提取工艺进行优化,通过AB Sciex QTOFs 高分辨质谱,对核桃分心木粗多酚成分进行鉴定,同时采用D101大孔树脂对分心木多酚进行纯化。采用纯化后的分心木多酚开展动物试验,并从基础指标、肠道屏障、炎症反应、肠道微生物等方面探究分心木多酚对小鼠溃疡性结肠炎的改善作用及机制。动物实验如下:36只6周龄的雄性C57BL/6J小鼠随机分为3组,即空白对照组(Control组)、模型组(DSS组)和多酚处理组(WDP),采用3.0%DSS溶液饲喂小鼠,同时用100 mg/kg的分心木多酚溶液干预小鼠12天,期间每天监测小鼠体重,并进行DAI评分。12天后,测量小鼠的结肠长度和脾脏重量;利用H&E染色观察小鼠结肠组织病理损伤情况;采用免疫组化观察小鼠炎性细胞浸润情况及肠道屏障蛋白表达水平;采用阿利新蓝染色法检测结肠杯状细胞数量;采用ELISA标准试剂盒检测小鼠血清炎性因子含量;采用RT-qPCR检测结肠组织炎症、肠道屏障相关基因的表达水平;通过16SrRNA测序技术检测小鼠肠道微生物结构及多样性。 结果显示,核桃分心木多酚的最佳提取条件为料液比1:90 g/mL 、超声时间40 min、超声温度45℃、乙醇浓度30%,在此提取条件下分心木多酚的含量为121.2±1.36 mg/g;使用液质联用技术,确定核桃分心木多酚中含量较高的6种酚类化合物分别为:脱甲氧姜黄、原儿茶醛、原儿茶酸、香兰素、苯乙醇、鞣花酸。核桃分心木多酚采用D101纯化后,纯度达到80.5%。动物实验结果表明,核桃分心木多酚具有改善结肠炎小鼠体重下降、DAI评分升高、结肠缩短、小鼠脾脏肿大的作用;同时能改善结肠炎小鼠组织病理损伤,减轻小鼠结肠炎性细胞浸润,恢复肠道屏障蛋白的表达,维持结肠组织分泌粘液的功能,降低MPO活性、血清炎症因子含量和结肠组织炎症因子mRNA水平;并且分心木多酚逆转了结肠炎小鼠肠道紧密连接相关基因mRNA表达水平;此外,核桃分心木多酚增加了有益菌Firmicutes、Desulfobacterota、Patescibacteria、Deferribacterota、Lachnospiraceae、Oscillospiraceae、Lachnospiraceae_NK4A136_group、Lactobacillus的相对丰度,降低了有害菌Enterobacteriaceae、Bacteroides、Escherichia-shigella、Faecalibaculum的相关丰度。相关性分析结果表明有害菌与结肠组织中炎症基因(TNF-a、IL-1β、IL-6、IFN-γ)和血清中的炎性因子(TNF-a、IL-1β)正相关,有益菌与肠道紧密连接相关基因(ZO-1、Occludin 、Claudin-1、Muc-2)正相关。结果表明核桃分心木多酚通过改善DSS诱导的肠道菌群失调,增加有益菌丰度,降低有害菌丰度,提高结肠炎小鼠肠道屏障,减轻炎性细胞因子浸润,降低结肠炎小鼠炎症水平,进而发挥改善小鼠溃疡性结肠炎的作用。研究结果可为核桃分心木多酚开发缓解溃疡性结肠炎的功能性食品奠定实验基础,也为多酚改善结肠炎作用机制的研究提供新思路。 |
并列题名: | Study on the Mechanism of Polyphenols from Juglans regia in Improving Ulcerative Colitis in Mice eng |
题名主题: | 核桃分心木多酚 溃疡性结肠炎 肠道微生物 作用机制 学位论文 |
中图分类: | R151.2-533 |
个人名称等同: | 陈锦莲 著 |
个人名称次要: | 解静 指导 |
个人名称次要: | 赵一鹤 指导 |
团体名称等同: | 云南农业大学 授予 |
记录来源: | CN YNAUL 20240301 |