ISBN/价格: | CNY20.00 (估\呈缴)学位论文 |
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作品语种: | chi |
出版国别: | CN 530000 |
题名责任者项: | 不同生物型牛病毒性腹泻病毒感染MDBK细胞的多组学研究/.赵倩著/.李小兵指导 |
出版发行项: | 2023.06.02 |
载体形态项: | 70页:;+图表:;+30cm |
一般附注: | 动物医学院, 学号2021240470 |
提要文摘: | 牛病毒性腹泻病毒(BVDV)是一种与牛胃肠道、呼吸道和生殖道系统疾病有关的重要病原体,可引起牛病毒性腹泻-粘膜病(BVDV-MD),给全球养牛业造成严重的经济损失。BVDV可分为致细胞病变型(CP)和非细胞病变型(NCP)两种生物型。不同生物型的BVDV感染产生的免疫反应存在本质差异。在胚胎发育早期,仅NCP型BVDV可以建立感染继而发展为持续性感染。此外,CP型BVDV感染会对宿主产生明显的损伤,NCP型则不会。NCP型BVDV感染会引起牛群免疫力下降,并继发其他病原微生物感染,其主要原因是NCP型感染不能很好的诱导细胞产生固有免疫应答。然而,关于不同生物型BVDV感染宿主细胞的免疫应答研究目前还十分局限。因此,本课题以CP型和NCP型BVDV为研究对象,利用转录组学和蛋白质组学测序技术,分别从基因和蛋白水平对不同生物型BVDV感染MDBK细胞的关键分子与信号通路进行分析,主要结果如下: (1)通过检测BVDV特异性蛋白E2的表达情况,确定CP型和NCP型BVDV均成功感染MDBK细胞。将两种生物型BVDV分别接种于MDBK细胞,观察细胞病变程度,发现CP型具有明显的细胞病变,而NCP型则无明显的细胞病变。然后,利用TUNEL染色法观察不同生物型BVDV感染引起细胞凋亡情况,结果显示,CP型和NCP型病毒感染均会引起明显的细胞凋亡,且CP型感染引起细胞凋亡率显著高于NCP型BVDV。以上结果表明,CP型与NCP型BVDV感染引起的宿主细胞免疫应答存在明显不同。 (2)接下来,确定了CP型和NCP型感染MDBK细胞的MOI值与感染时间,收集BVDV不同生物型感染MDBK细胞,并进行转录组学分析,研究结果表明,对照组与 CP 组共鉴定出161个差异表达基因(48个上调、113个下调);对照组与NCP 组共鉴定出339个差异表达基因(186个上调、153个下调);CP组与NCP组共鉴定出319个差异表达基因(158个上调、161个下调)。 (3)同时,对BVDV 不同生物型感染MDBK细胞进行蛋白组学研究,结果表明,对照组与CP组共鉴定出1106个差异表达蛋白(691个上调、415个下调),对照组与NCP型共鉴定出666个差异表达蛋白(上调440个、下调226个),CP组与 NCP组共鉴定出6个差异表达基因(3个上调,3个下调)。 (4)将BVDV不同生物型感染MDBK细胞的转录组学和蛋白组学结果进行联合分析,结果表明,基因水平和蛋白水平的表达变化一致,只有少部分不一致。对表达趋势相同基因和蛋白进行GO注释和KEGG通路分析。不同生物型感染MDBK细胞后参与了多条通路,上调蛋白主要参与吞噬作用,糖原生物合成作用。下调蛋白主要涉及泛素介导的蛋白降解通路和胆固醇代谢信号通路等信号通路。此外,将多组学结果中的差异表达基因进行qRT-PCR验证,发现qRT-PCR验证结果与多组学中测序结果一致,进一步表明本试验组学结果的可靠性。 综上所述,本课题通过研究不同生物型的BVDV毒株感染MDBK细胞,进行转录组学和蛋白质组学联合分析,筛选到差异表达基因和蛋白,这些基因和蛋白在Toll样受体信号通路、TNF信号通路、MAPK信号通路、内质网蛋白加工和凋亡信号通路中参与先天免疫、抗病毒和凋亡调控,表明不同生物型BVDV 感染引起的宿主免疫反应确实存在明显不同。我们的课题为进一步阐明BVDV不同生物型与宿主相互作用的机制提供了研究思路,并为开发抵抗不同生物型BVDV的药物靶点提供了理论依据。 |
并列题名: | Multi-omics Studies of MDBK Cells Infected with Different Biotypes of Bovine Viral Diarrhea Virus eng |
题名主题: | 牛病毒性腹泻病毒 细胞病变型 非细胞病变型 转录组学 蛋白质组学 学位论文 |
中图分类: | S855.3-533 |
个人名称等同: | 赵倩 著 |
个人名称次要: | 李小兵 指导 |
团体名称等同: | 云南农业大学 授予 |
记录来源: | CN YNAUL 20240301 |