提要文摘: | 昆虫病原真菌在自然界中对害虫种群的控制发挥着重要作用,基于昆虫病原真菌的害虫生防制剂已成为害虫生物防治的重要措施之一。白僵菌寄主广泛,生态适应力强,已是广泛应用于害虫生物防治的昆虫病原真菌。为了解西双版纳自然保护区内白僵菌属虫生真菌资源,为害虫生防真菌资源及生防制剂开发提供依据。在2016年11月-2018年7月,对西双版纳自然保护区白僵菌属虫生真菌感染罹病虫体进行了系统调查、标本采集,采用形态学和分子生物学技术对白僵菌属虫生真菌进行分离和种类鉴定,分析种类、寄主及生境分布多样性和球孢白僵菌发生规律,研究其遗传多样性,结果如下: 1.西双版纳自然保护区白僵菌属虫生真菌的物种多样性。分离培养白僵菌369株,共有5个种,分别为球孢白僵菌(B. bassiana)、布氏白僵菌(B.brongniartii)、多形白僵菌(B.amorpha)、猫棒白僵菌(B.felina)和一种中国新记录种白僵B.loeiensis,其中球孢白僵菌为优势种,相对多度为93.5%。其次为布氏白僵菌,相对多度为4.1%。B.loeiensis相对多度为1.9%,多形白僵菌和猫棒白僵菌相对多度分别为0.3%。 2.白僵菌属虫生真菌的寄主多样性和生境分布特征。结果表明,白僵菌寄主种类丰富、多样性较高,达到10目59科353头,分别为鞘翅目16科117头、膜翅目5科113头、半翅目16科48头、鳞翅目7科34头、直翅目6科16头、双翅目4科13头、革翅目1科7头、蜚蠊目2科3头、螳螂目1科1头和脉翅目1科1头。不同生境类型中白僵菌属虫生真菌种类多样性不同,表现为Shannon?Wiener指数季风常绿阔叶林>石灰岩山季混交雨林>丛生竹林>热带季雨林>针叶林。 3.球孢白僵菌种群遗传结构和遗传多样性。结果表明:9个引物总扩增位点77个,平均每个引物扩增位点8.5个,多态位点比率(PPL)97.4%。在物种水平上的总体等位基因数Na为1.9740、有效等位基因数Ne为1.3120、基因多样性指数H为0.1847、信息多样性指数I为0.2921,球孢白僵菌具有较高的遗传多样性。群体按照寄主、生境和季节为居群(亚种群)将其进一步分析,发现生境亚种群遗传多样性水平(H=0.1897,I=0.3015)略高于季节亚种群多样性水平(H=0.1891,I=0.3008),寄主亚群(H=0.1874,I=0.2985)的遗传多样性较低。种群间遗传分化较弱甚至无遗传分化,种群间基因交流较强,使得球孢白僵菌的遗传多样性高。菌株个体聚类分析表明,各个菌株聚类复杂,西双版纳球孢白僵菌遗传多样性高,聚类关系与寄主和时间无明显关系。 4. 白僵菌属虫生真菌优势种球孢白僵菌的发生规律。结果表明,在西双版纳自然保护区在干燥的晚冬季节(1月)和春季(4月)是球孢白僵菌发生高峰期,在高温高湿的夏季发生较少。不同生境中球孢白僵菌感染罹病虫体的发生高峰期不同,南贡山和野象谷在高温干燥晚春季节(3月和4月)侵染罹病虫体数量最高,望天树在冬季(1月)最高,五十五的在晚秋(11月)和晚冬(1月最高),丫口寨的球孢白僵菌分类染罹病虫体数量最少,波动最小,相同的是不同生境中球孢白僵菌分布最少时期为夏季(6-7月)。 |