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： 三七中S-达玛烷型皂苷元通过抑制PCSK9改善AS及机制研究
书目信息 机读格式(MARC)
| ISBN/价格： | CNY40.00 (估\呈缴)学位论文 |
|---|---|
| 作品语种： | chi |
| 出版国别： | CN 530000 |
| 题名责任者项： | 三七中S-达玛烷型皂苷元通过抑制PCSK9改善AS及机制研究/.张蒙著/.王宣军指导 |
| 出版发行项： | 2022.6.1 |
| 载体形态项： | 101页:;+图表:;+30cm |
| 一般附注： | 食品科学技术学院,学号2019110009 |
| 提要文摘： | 动脉粥样硬化（AS）是引起冠心病、脑梗死、外周血管病等心脑血管疾病的主要原因，其发病机制尚不明确。血液中的低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）是AS和心脑血管疾病风险的重要指标，目前临床常用他汀类降脂药物，如阿托伐他汀调节LDL-C水平，延缓动脉粥样硬化，但药物起效慢，单一应用难以达到理想的效果，且会在不同程度上产生不良影响。因此，当前亟须开发副作用小且药效好的治疗方案。研究证实，前蛋白转化酶枯草杆菌素9型（PCSK9）是LDLR的关键调节因子，抑制PCSK9能够抑制LDLR降解，提升LDLR水平，能够有效降低血液中LDL-C浓度。中药资源在治疗降脂和防御疾病中发挥着至关重要的作用，多项研究表明三七总皂苷在抑制血栓形成，扩张外周血管，降低血压，治疗心脑血管疾病疗效显著，其中达玛烷型皂苷（原人参二醇型和原人参三醇型）是主要的活性成分。有报道证明：计量按照100 mg/kg/day给予ApoE-/-小鼠灌胃20(S)-原人参二醇型皂苷（Rb1和Rd）后，显著改善小鼠AS。 20(S)-原人参二醇和20(S)-原人参三醇（20(S)-PPD和20(S)-PPT）作为S-达玛烷型皂苷的次级代谢产物，假设20(S)-PPD和20(S)-PPT具有达玛烷型皂苷相同改善AS的作用，为了验证这一假设，本研究以20(S)-PPD和20(S)-PPT为研究对象，通过体外和体内实验，使用MTT、WB、RT-PCR、Dil-LDL摄取、ELISA、表面等离子共振技术、H&E染色、油红O染色、EVG染色、免疫荧光染色等研究方法，探究了其抗AS分子作用机制。得到以下主要研究结果： （1）体外实验表明：20(S)-PPD和20(S)-PPT（0-10μM）处理HepG2细胞24小时，均能显著增加LDLR蛋白水平的表达（P<0.05或P<0.01）；均能显著促进LDL的摄取（P<0.01或P<0.001）；均对LDLR mRNA表达没有变化；均能显著抑制PCSK9的分泌（P<0.05或P<0.01）；均能抑制PCSK9 mRNA水平表达（P<0.001）；均能显著增加FoXO3 蛋白和基因水平的表达（P<0.05 、P<0.01或 P<0.001）；阿利珠单抗（50nM）和20(S)-PPD（5μM）同时处理HepG2细胞24小时，20(S)-PPD不能使LDLR水平进一步增加，说明20(S)-PPD可能抑制了PCSK9与LDLR的结合；通过表面等离子共振技术结果表明，20(S)-PPD能与LDLR结合（KD=1.35×10-5 M），并且能够抑制PCSK9与LDLR结合。 （2）为了验证20(S)-PPD和20(S)-PPT在体内是否可以改善动脉粥样硬化，本研究用高胆固醇饮食诱导AopE-/-小鼠为动脉粥样硬化模型来模拟人类的动脉粥样硬化，体内实验表明： 20(S)-PPD按照灌胃的方式以60mg/kg体重每天的计量对AopE-/-小鼠干预10周，随后测定小鼠肝脏病变、主动脉树的斑块面积、主动脉根部相关指标以及血液指标。结果显示，20(S)-PPD显著抑制体内斑块的产生（P<0.05）；抑制主动脉根部脂质积累（P<0.01）；减少主动脉根部坏死区域的面积（P<0.05）；增加主动脉根部纤维含量（P<0.01）；主动脉根部炎症积累有下降趋势（P=0.209）；抑制血清中PCSK9的含量（P<0.05）；抑制血清中TG、TC、LDL-C、ALT、AST，增加HDL-C含量（P<0.05）；促进肝脏中LDLR蛋白表达（P<0.05），同时改善了肝脏病变和脂肪肝。结果表明，20(S)-PPD能显著抑制AopE-/-小鼠主动脉中的斑块产生，改善动脉粥样硬化病情。 20(S)-PPT按照腹腔注射方式以60mg/kg体重每天的剂量对AopE-/-小鼠干预12周，随后测定肝脏病变、主动脉树的斑块面积、主动脉根部相关指标以及血液中PCSK9的含量。结果显示，20(S)-PPT显著抑制小鼠体内斑块的产生（P<0.01）；抑制主动脉根部脂质积累（P<0.01）；减少主动脉根部坏死区域的面积（P<0.05）；增加主动脉根部平滑肌细胞含量（P<0.05）；抑制主动脉根部炎症产生（P<0.05）；血清中PCSK9的含量相对于高脂组有下降趋势（P=0.058）；同时改善了肝脏病变和脂肪肝。结果表明，20(S)-PPT能显著抑制AopE-/-小鼠主动脉中的斑块产生，改善动脉粥样硬化病情。 综上所述，本文证实了20(S)-PPD和20(S)-PPT能抑制PCSK9的分泌提升LDLR水平，从而抑制高胆固醇饮食诱导的动脉粥样硬小鼠斑块产生。20(S)-PPD抗动脉粥样硬化分子作用机制是其通过增加FoXO3表达抑制PCSK9的分泌，提升LDLR水平；20(S)-PPD能与LDLR结合并抑制PCSK9与LDLR的结合，进而促进LDLR水平。20(S)-PPT抗动脉粥样硬化分子作用机制是其通过增加FoXO3抑制PCSK9的分泌，从而促进LDLR水平。该研究为S-达玛烷型皂苷元治疗动脉粥样硬化相关疾病提供了理论基础。 |
| 并列题名： | The study mechanism of atherosclerosis amelioration through inhibiting PCSK9 by S-dammarane type sapogenin in Panax notoginseng eng |
| 题名主题： | S-达玛烷型皂苷元 动脉粥样硬化 PCSK9 LDLR 学位论文 |
| 中图分类： | R589-533 |
| 个人名称等同： | 张蒙 著 |
| 个人名称次要： | 王宣军 指导 |
| 团体名称等同： | 云南农业大学 授予 |
| 记录来源： | CN YNAUL 20230518 |