ISBN/价格: | CNY20.00 (估)学位论文 |
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作品语种: | chi |
出版国别: | CN 530000 |
题名责任者项: | TSWV和HCRV侵染辣椒的胼胝质沉积及细胞病理学研究/.张美玲著/.刘雅婷指导 |
出版发行项: | 2021.06.11 |
载体形态项: | 53页:;+图表:;+30cm |
一般附注: | 植物保护学院, 学号2018210280 |
提要文摘: | 辣椒(Capsicum annuum L.)是我国重要的农业经济作物,近年来,云南、四川等地番茄斑萎病毒(Tomato spotted wilt orthotospovirus,TSWV)频发于辣椒上,且多伴随着同属病毒的复合侵染。研究发现朱顶红褪绿环斑病毒(Hippeastrum chlorotic ringspot orthotospovirus,HCRV)可以局部侵染辣椒,但不能实现系统侵染,当与TSWV混合后,可实现系统侵染。本试验以番茄斑萎病毒和朱顶红褪绿环斑病毒为主要研究对象,湘研十一号品种辣椒为试验材料,探究两种病毒单独和复合侵染后对辣椒胼胝质沉积和超微结构的观察。以及构建了HCRV血清学快速检测方法。研究结果如下: (1)通过苯胺蓝染色法检测接种后第1、3、7、14、21d辣椒叶片胼胝质沉积,通过Image J计算扫描叶片平均荧光强度,平均荧光强度越强,证明胼胝质含量越高。AAI-TSWV组和AAI-HCRV组从平均荧光强度的变化趋势来看,均呈“N”字型变化,两者平均荧光强度均在第1、3d急剧上升,第7d下降,第14、21d持续上升;AMI-TSWV+HCRV组平均荧光强度呈一个扁平的“N”字型,第1、3d持续上升,到第7天略微下降,第14、21持续增强,最强荧光强度于接种后第21d。五个时期,复合侵染平均荧光强度均强于单独侵染平均荧光强度。证明复合侵染会致使植物产生更加多的胼胝质来增加植物的物理屏障。 (2)通过透射电子显微镜对感染TSWV和HCRV的湘研十一号辣椒叶片进行超微细胞结构观察发现:AAI-TSWV组,TSWV病毒粒子出现在细胞的叶绿体和细胞质基质的内质网池内,在叶绿体内TSWV病毒粒子主要靠近叶绿体膜和淀粉粒分布,病毒粒子在叶绿体内存在的地方,基粒消失,基粒片层和基质片层被完全破坏,细胞内囊泡结构增加且大小不一,破坏严重时,细胞死亡,叶绿体呈渔网状失去活性;AAI-HCRV组,叶绿体片层消失,叶绿体膜部分溶解并呈短小致密的毛刺状,线粒体內嵴部分消失,逐渐空泡化,细胞核稍有变形,且染色质靠近核膜分布;AMI-TSWV+HCRV组,病毒粒子主要分布于叶绿体内,被病毒粒子侵占的叶绿体结构被破坏,片层消失,基粒减少,叶绿体外有明显较多的小囊泡产生。证明当病毒侵染辣椒后,会导致植物细胞器发生病变,导致其不能正常行使细胞器应该发挥的功能。 (3)设计特异性的引物扩增获得HCRV的运动蛋白基因(NSm 基因),对NSm 基因进行原核表达,并得到纯化蛋白,最终制备了HCRV的NSm的多克隆抗体。结果显示多克隆抗体的效价可达到1:1024000,为后续实验奠定了实验基础。 |
并列题名: | Callus Deposition and Cytopathology Study of TSWV and HCRV Infected Capsicum annuum L eng |
题名主题: | TSWV HCRV 胼胝质 透射电子显微镜 多克隆抗体 学位论文 |
中图分类: | S432-533 |
个人名称等同: | 张美玲 著 |
个人名称次要: | 刘雅婷 指导 |
团体名称等同: | 云南农业大学 授予 |
记录来源: | CN YNAUL 20220621 |