提要文摘: | 健康的肠道有助于肠道功能的正常发挥,可以提高肉鸡生长性能,为养殖场带来可观的经济效益。复方中药在畜禽的生产实践中体现出了增强免疫、促生长的优势,但是对肠道免疫的影响和具体的作用机理尚不清楚。本研究以1日龄AA肉鸡为研究对象,设置3个试验组,即0.3%复方中药组(CML)、0.5%复方中药组(CMM)、0.8%复方中药组(CMH),以饲喂基础日粮的肉鸡作为对照组(NC),每个组设置3个重复,每个重复10只鸡,共120只试验鸡饲养至42日龄进行屠宰,测定不同组试验鸡体重、免疫器官指数和肠道形态学指标,选择效果最佳的复方中药组十二指肠组织进行转录组测序分析,筛选出与复方中药在肠道内的分解、代谢和免疫作用相关的基因为候选基因,进行Real-Time PCR验证,以此探究复方中药对肉鸡肠道免疫的影响,试验结果如下:
- CMM组肉鸡体重显著高于NC组(P<0.05),其余各组虽高于NC组,但是差异不显著(P<0.05)。
- 各组中脾脏指数无显著性(P>0.05);与NC组相比,CMM组显著提升肉鸡胸腺指数和法氏囊指数(P<0.05), 其余各组差异不显著(P>0.05)。
- 小肠长度:CMM组肉鸡十二指肠、空肠长度显著高于NC组(P<0.05),回肠长度无显著性但呈升高趋势(P>0.05)。VH:CMM组十二指肠VH极显著高于各组(P<0.01);CML组空肠VH极显著高于CMM组(P<0.01),且显著高于NC组和CMH组(P<0.05);各个试验组的回肠VH均极显著高于NC组(P<0.01),CML组回肠VH显著高于CMH组(P<0.05)。CD:CMM组十二指肠CD显著低于CML组(P<0.05),其余各组差异不显著(P>0.05);CMM组空肠CD低于各组,但差异不显著(P>0.05);CMM组回肠CD极显著低于CMH组(P<0.01),且低于其它各组,但无显著性(P>0.05);NC、CML组回肠CD显著低于CMH组(P<0.05)。VH/CD比值:CMM十二指肠VH/CD比值极显著高于CML组(P<0.01),且显著高于CMH组(P<0.05),高于NC组但差异不显著(P>0.05);CMM组空肠VH/CD比值高于其他各组,但无显著性(P>0.05);CMM组回肠VH/CD比值极显著高于CMH组(P<0.01),且高于其他各组但无显著性(P>0.05)。
- 通过各个试验组体重、免疫器官指数、肠道组织形态学等数据分析,发现0.5%复方中药为最适宜的添加剂量,且对CMM组十二指肠效果较好,因此选择NC组和CMM组十二指肠进行转录组测序分析,共获得166个差异表达基因,其中多个基因在代谢途径(metabolic pathways)、细胞色素P450对异种生物的代谢作用(Metabolism of xenobiotics by cytochrome P450)、精氨酸生物合成(Arginine biosynthesis)、视黄醇的新陈代谢(Retinol metabolism)以及类固醇激素生物合成(Steroid hormone biosynthesis)5条KEGG通路中显著富集,结合差异表达基因PPI分析结果,筛选出CYP1A1、CYP1A2、CYP3A4、SLC15A1、GLUL、MGAM、APOA4共7个候选基因进行Real-Time PCR功能验证,试验结果与转录组分析结果一致。
综上所述,试验采用的复方中药对肉鸡体重、免疫器官发育、肠道组织形态学有一定程度的积极影响,其中,复方中药添加水平为0.5%的CMM组对十二指肠的促进作用最显著,结合十二指肠转录组测序分析结果可知,复方中药通过与肠道内的药物代谢酶、淀粉水解酶、肽转运蛋白、谷氨酰胺合成酶、脂蛋白等基因相互作用,积极参与对肠道健康有益的多种生物活性物质的合成过程和分解代谢过程,为提升肠道免疫水平提供必要的营养物质,促进肠道健康。 |