ISBN/价格: | CNY20.00(估)缴送 |
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作品语种: | chi |
出版国别: | CN 530000 |
题名责任者项: | 抗稻瘟病新基因Pi-zy3(t)的精细定位及候选基因鉴定/.卓晓轩著/.罗琼指导 |
出版发行项: | 2019.6.10 |
载体形态项: | 77页:;+图表:;+30cm |
提要文摘: | 稻瘟病严重影响水稻的产量和质量。抗病基因(R)鉴定和利用是进行作物抗性遗传改良,防治稻瘟病发生最经济和最环保的方法。粳稻的稻瘟病抗性普遍较籼稻弱,抗性资源缺乏,目前克隆的抗稻瘟病基因大多来自籼稻资源,对抗病机制的研究也主要局限于籼稻。 云南高原粳稻地方品种子预44在30多年的种植过程中均表现为广谱持久的稻瘟病抗性,为粳稻抗病机制的研究带来了契机。本研究围绕水稻子预44广谱持久抗瘟机制,利用分离自云南省罗平县的稻瘟病菌株LP33、子预44与江南香糯构建的F1和F2遗传群体,开展了子预44的抗性遗传分析、主效抗稻瘟病基因的定位及抗病候选基因的鉴定,获得了以下主要研究结果: (1) 子预44对稻瘟病菌株LP33和LP29-3的抗性,表现为单基因控制的显性遗传; (2) 利用稻瘟病菌株LP33接种子预44与江南香糯杂交获得的1692株F2群体,鉴定了163株感病明显的单株。利用亲本间有多态性的SSR分子标记及我们设计的PCR标记对这163株感病单株进行性状连锁分析,将子预44中抗稻瘟病菌株LP33的基因定位在水稻第6号染色体上分子标记C6-10.008与C6-11.043之间1035Kb的范围内,并将基因暂定名为Pi-zy3(t); (3) 在定位区间内预测了抗病相关基因152个,其中包括6个NBS-LRR家族基因和已克隆的抗稻瘟病基因Piz-t; (4) 为了明确子预44中Pi-zy3(t)与Piz-t的关系,我们采用CRISPR/Cas9技术对子预44中已知抗稻瘟病基因Pid2、Pid3、Piz-t进行了敲除实验,获得了Pid3单敲株系1个,Pid2/Pid3双敲株系21个,Pid2/Pid3/Piz-t三敲株系24个。用稻瘟病菌株LP33对Pid2/Pid3/Piz-t三敲株系的抗性进行接种鉴定的结果显示,Pid2/Pid3/Piz-t三敲株系表现出与野生型子预44相似的抗病表型,明确了Pi-zy3(t)是一个新的抗稻瘟病基因; (5) 进一步用来自不同地方的其它稻瘟病菌株LP29-3、ZB13、TC61、YZ121和H53对Pid2/Pid3/Piz-t三敲株系的抗性进行接种鉴定,Pid2/Pid3/Piz-t三敲株系仍表现出与野生型子预44相似的抗病表型。表明Pi-zy3(t)不仅是一个新的抗稻瘟病基因,而且是一个广谱抗瘟基因; (6) 结合定位区间基因预测和基因组重测序的分析结果,我们对其中一个编码丝苏氨酸激酶的候选基因LOC_Os06g18820,通过构建过表达载体(pCAMBIA1300)和农杆菌介导的遗传转化方法转化感病水稻TP309,LP33接种后,转基因植株与对照TP309表现出相似的表型,表明LOC_Os06g18820不是Pi-zy3(t)。但该结果为我们进一步鉴定候选基因缩小了范围; (7) 结合定位区间基因预测和基因组重测序的分析结果,我们还发现Pi-zy3(t)不属于目前报道的水稻抗病基因类型, Pi-zy3(t)基因的克隆和功能研究也许会带来水稻防卫反应机制的新发现。~ |
并列题名: | Fine Mapping and Identification of Candidate Genes of a New Rice Blast Resistance Gene Pi-zy3(t) |
题名主题: | 水稻 稻瘟病 基因定位 Pi-zy3(t) 学位论文 |
中图分类: | S435.111-533 |
个人名称等同: | 卓晓轩 著 |
个人名称次要: | 罗琼 指导 |
团体名称等同: | 云南农业大学 授予 |
记录来源: | CN YNAUL 20200312 |