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： 草地贪夜蛾莱氏绿僵菌SZCY200812生物学特性及可湿性粉剂制备研究
书目信息 机读格式(MARC)
| ISBN/价格： | CNY20.00 (估\呈缴)学位论文 |
|---|---|
| 作品语种： | chi |
| 出版国别： | CN 530000 |
| 题名责任者项： | 草地贪夜蛾莱氏绿僵菌SZCY200812生物学特性及可湿性粉剂制备研究/.薛锐著/.陈斌指导 |
| 出版发行项： | 2023.5.17 |
| 载体形态项： | 80页:;+图表:;+30cm |
| 一般附注： | 植物保护学院, 学号2020210326 |
| 提要文摘： | 莱氏绿僵菌（Metarhizium rileyi）是一种重要的昆虫病原真菌，具有良好的生物防治潜力，但当前还未有莱氏绿僵菌生防制剂或产品。如何高效制备昆虫病原真菌制剂气生分生孢子作为生物农药制剂原料成为亟待解决的问题。本研究对从玉米田罹病草地贪夜蛾上分离纯化的莱氏绿僵菌SZCY200812菌株生物学特性、基于Plackett-Burman及响应面法设计的液相发酵及固相发酵条件进行了筛选优化，为莱氏绿僵菌生防制剂的生产提供指导。主要结果如下： 1、莱氏绿僵菌SZCY200812生物学特性。室内条件下，对分离自玉米田罹病草地贪夜蛾幼虫的一株莱氏绿僵菌SZCY200812进行毒力、生物学特性测定及环境抗逆性研究。发现该菌株适宜在SMAY培养基上于25℃、24 L:0 D条件下生长，所产分生孢子温度耐受能力及紫外线耐受能力均为最强，表现出良好的环境抗逆性。 2、外源营养物质对莱氏绿僵菌SZCY200812菌株生长的影响。外源不同碳源及氮源对菌株生长及产孢存在的明显影响。其中添加油酸或明胶后可明显促进莱氏绿僵菌SZCY200812菌株生长及产孢，其中添加明胶促进菌株生长，增长速率可提升12.3%；油酸可促进菌株产孢，产孢量可提升27.4%。各种营养成分可强化该菌的不同阶段生长，但利于营养生长的有用物质并不一定有利于生殖生长。 3、继代培养对莱氏绿僵菌SZCY200812菌株生物学特性的影响。通过不同培养基继代培养的方式测定菌株的菌落直径、单位面积产孢量、单位时间萌发率、对草地贪夜蛾毒力以及几丁质酶活性。结果表明，在添加草地贪夜蛾蛹壳的SAMY培养基中F1、F3、F5代，莱氏绿僵菌SZCY200812菌株的基础生物学参数、对3龄草地贪夜蛾幼虫毒力以及几丁质酶活性均显著高于基础SMAY培养基以及添加油酸的SMAY培养基，并呈现出逐代上升的趋势。在添加草地贪夜蛾蛹壳的SAMY培养基中培养菌株至第F5代时，相较F1代菌落直径增加了5.1%、产孢量增加33.3%、孢子萌发速率提升了6.8%、几丁质酶活提升了17%，LT50由F1代的4.99 d降至F5代的4.58 d，草地贪夜蛾3龄幼虫第7 d累计校正死亡率也由F1的86.04%上升到89.63%。综合以上结果，添加草地贪夜蛾蛹壳可提升莱氏绿僵菌产孢量、提升菌株毒力、增强菌株的几丁质酶活性。 4、基于响应面法优化莱氏绿僵菌SZCY200812的液相发酵条件。利用单因素及Box-Behnken试验设计结合的方法对该菌液相发酵过程中培养液种类、装液量、pH、摇床转速及培养温度等条件进行优化。结果表明：通过单因素试验初步确定利用SDY培养液、装液量100 /250 mL、pH 7、摇床转速180 r/min及温度25 ℃，第120 h每10 mL液相发酵生物产量为0.8433 g。通过响应面法建立了莱氏绿僵菌SZCY200812液体发酵培养菌丝生物量与自变量回归模型，根据模型所得结果得出装液量为100.82/250 mL，摇床转速178.85 r/min，温度24.80 ℃，pH 6.73条件下为理论最佳液相发酵培养条件。 5、响应面设计优化莱氏绿僵菌SZCY200812固体发酵培养条件。通过优化莱氏绿僵菌SZCY200812固相发酵培养条件，测定所产分生孢子对草地贪夜蛾幼虫的毒力，为提高该菌分生孢子规模化生产奠定基础。研究发现，大米为莱氏绿僵菌SZCY200812菌株固相产孢理想载体。培养温度、光周期及酵母浸粉含量是影响莱氏绿僵菌SZCY200812固相发酵产孢量的主要因素。莱氏绿僵菌SZCY200812固相发酵最佳工艺参数为温度22.83℃，光周期18.68L：5.32D，酵母浸粉4.98 g/100 g，在此条件下，莱氏绿僵菌在去颖稻谷固相培养基上的产孢量为5.65×1010 孢子/g，用其制备浓度为107 CFU/mL的孢子悬浮液对草地贪夜蛾3龄幼虫的LT50为3.88 d。 6、莱氏绿僵菌SZCY200812可湿性粉剂制备。莱氏绿僵菌SZCY200812菌株分生孢子为材料，采用控制变量法分别测定莱氏绿僵菌SZCY200812菌株分生孢子与载体、分散剂、湿润剂的相容性并计算各处理生物指数，通过浸渍法测定该可湿性粉剂对草地贪夜蛾的毒力。莱氏绿僵菌SZCY200812可湿性粉剂的适宜成分组成及比例为分生孢子粉20%、湿润剂苯磺酸钠1%、分散剂NNO 3%，高岭土补足至100%。该可湿粉剂的活菌含量为5.12×108 孢子/g，湿润时间为76 s，悬浮率为72.31%，pH=6.62，细度为99%。当粉剂浓度为1.0×107 CFU/mL时，对草地贪夜蛾3龄幼虫的LT50为5.37 d。此条件下莱氏绿僵菌SZCY200812可湿性粉剂，各项指标均符合国家标准，且107 孢子/g的浓度为107 CFU/mL的可湿性粉剂孢悬液致死中时为5.37 d。 |
| 并列题名： | Study on the biological characteristics and wettable powder preparation of Metarhizium rileyi SZCY200812 isolated from eng |
| 题名主题： | 莱氏绿僵菌 草地贪夜蛾 生物学特性 液相发酵 固相发酵 可湿性粉剂 学位论文 |
| 中图分类： | S435-533 |
| 个人名称等同： | 薛锐 著 |
| 个人名称次要： | 陈斌 指导 |
| 团体名称等同： | 云南农业大学 授予 |
| 记录来源： | CN YNAUL 20240603 |