书目详细信息
： 异柯里拉京对PRRSV、PRV的抗病毒作用及其抗炎机制初步研究
书目信息 机读格式(MARC)
| ISBN/价格： | CNY20.00 (估\呈缴)学位论文 |
|---|---|
| 作品语种： | chi |
| 出版国别： | CN 530000 |
| 题名责任者项： | 异柯里拉京对PRRSV、PRV的抗病毒作用及其抗炎机制初步研究/.朱茂银著/.常华指导 |
| 出版发行项： | 2023.5.31 |
| 载体形态项： | 96页:;+图表:;+30cm |
| 一般附注： | 动物医学院, 学号2020210406 |
| 提要文摘： | 异柯里拉京是紫地榆、叶下珠等中药材的提取物，是多种植物的主要活性成分之一，具有抗炎、抗病毒等功效。猪繁殖与呼吸综合征（Porcine Reproductive and Respiratory Syndrome，PRRS）和伪狂犬病（Pseudorabies virus，PR）分别是由猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）和伪狂犬病毒（PRV）引起的传染病，目前对于这两种猪病均无特效药。本实验研究异柯里拉京对PRRSV和PRV的体外抑制作用，初步探究其抗炎机制，为抗PRRSV和PRV的药物研发提供新的理论依据。 1. UPLC与prep-HPLC联用提取紫地榆中异柯里拉京的方法验证及定量 采取分析型超高效液相色谱（UPLC）和制备型高效液相色谱（prep-HPLC）联用从紫地榆中提取异柯里拉京单体；并对提取方法的线性关系、精密度、重复性、稳定性、加样回收率进行验证。结果显示在0.0032-1 mg/mL范围内呈良好的线性关系，R2=0.9999；精密度、重复性、稳定性的RSD分别为1.8%、0.4%、1.8%；加样平均回收率为96.42%，RSD为1.68%。以上结果表明该方法灵敏度高、重现性好，可用于异柯里拉京提取的质量控制。从2 g萃取浸膏中可提取出48.8 mg异柯里拉京，得率为2.44%。 2．测定异柯里拉京对Marc-145、PK-15细胞毒性及PRRSV、PRV的TCID50 用CTG法测定异柯里拉京对Marc-145、PK-15细胞的TC0和TC50（最大无毒浓度和半数有毒浓度），结果显示异柯里拉京对Marc-145细胞的TC0和TC50分别是260 μg/mL和770.43 μg/mL；对PK-15细胞的TC0和TC50分别是100 μg/mL和312.31 μg/mL。用CPE观察法和Reed-Muench两式法计算PRRSV、PRV的TCID50（组织半数感染量），结果分别为10-5.32和10-5.89。 3. 异柯里拉京对PRRSV和PRV体外抑制作用研究 以TC0为初浓度梯度稀释5个浓度，通过3种不同给药方式研究异柯里拉京对PRRSV和PRV的杀灭、阻断和抑制作用，用SPSS软件分析药物对病毒的EC50（半最大效应浓度），计算SI值（选择指数），评价其安全性。结果显示异柯里拉京对PRRSV有较好的杀灭、阻断和抑制作用，260 μg/mL浓度下对PRRSV的杀灭率和阻断率最高，分别为101.58%和86.13%；130 μg/mL浓度下对PRRSV的抑制率最高，为95.01%。杀灭作用的EC50为56.81 μg/mL，SI>13.56；阻断作用的EC50为54.77 μg/mL，SI>9.99；抑制作用的EC50为23.51 μg/mL，SI>32.76。最佳给药方式为混合给药（病毒+异柯里拉京），最佳药物作用浓度为260 μg/mL。异柯里拉京3种不同给药方式对PRV的抑制作用均不明显。 4. 异柯里拉京对PRRSV和PRV的抗炎机制初步研究 采取混合给药方式，运用RT-qPCR检测病毒感染细胞及异柯里拉京作用病毒56 h、64 h、72 h、80 h、88 h、96 h、108 h、120 h后PRRSV N、PRV gD、NF-κB通路的关键基因TNF-α、IκBα、P65、IL-6、IL-8的相对表达量。结果表明：PRRSV感染Marc-145细胞后，显著上调PRRSV N、TNF-α、IκBα、P65、IL-6、IL-8 mRNA的表达，异柯里拉京作用PRRSV后显著下调以上基因的表达，有效降低PRRSV感染引起的细胞炎症反应。经Graphpad分析，88 h异柯里拉京组的TNF-α、IκBα、IL-6、IL-8极显著低于PRRSV组（P<0.0001），利巴韦林组极显著低于PRRSV组（P<0.01）；64 h异柯里拉京组的P65极显著低于PRRSV组（P<0.01），利巴韦林组显著低于PRRSV组（P<0.05）。 PRV感染 PK-15细胞后显著上调PRV gD、TNF-α、IκBα、P65、IL-6、IL-8 mRNA的表达，异柯里拉京作用PRV后对以上基因的表达无明显下调作用。经Graphpad分析，60 h异柯里拉京组的TNF-α、P65显著高于PRV组（P<0.05），IκBα、IL-6、IL-8与PRV组差异不显著（P>0.05）；阿昔洛韦组的TNF-α、IκBα、IL-6、IL-8极显著低于PRV组（P<0.01），P65显著低于PRV组（P<0.05）。 本实验证实用UPLC和prep-HPLC联用可很好地提取异柯里拉京，且方法灵敏度高、重现性好，可用于异柯里拉京提取的质量控制。异柯里拉京可显著下调PRRSV N基因，抑制NF-κB活化，下调炎性细胞因子的相对表达量，有效降低PRRSV感染引起的细胞炎症反应；异柯里拉京对PRV无明显抑制作用。 |
| 并列题名： | Antiviral effect of isocorilagin on PRRSV and PRV and preliminary study its anti-inflammatory mechanism eng |
| 题名主题： | 异柯里拉京 PRRSV PRV 体外抗病毒 抗炎 学位论文 |
| 中图分类： | S858.28-533 |
| 个人名称等同： | 朱茂银 著 |
| 个人名称次要： | 常华 指导 |
| 团体名称等同： | 云南农业大学 授予 |
| 记录来源： | CN YNAUL 20240520 |