书目详细信息
： 辣木籽抗菌肽MOp2对金黄色葡萄球菌的分子作用机制研究
书目信息 机读格式(MARC)
| ISBN/价格： | CNY20.00 (估\呈缴)学位论文 |
|---|---|
| 作品语种： | chi |
| 出版国别： | CN 530000 |
| 题名责任者项： | 辣木籽抗菌肽MOp2对金黄色葡萄球菌的分子作用机制研究/.黄志远著/.董文明，王雪峰指导 |
| 出版发行项： | 2023.6.13 |
| 载体形态项： | 91页:;+图表:;+30cm |
| 一般附注： | 食品科学技术学院, 学号2020210106 |
| 提要文摘： | 金黄色葡萄球菌（Staphylococcus aureus, S. aureus）是一种常见的食源性致病菌，严重威胁人类健康，已成为全球公共卫生问题的关注焦点。近年来，一些小分子肽类物质被发现具有抑菌活性并成为研究的热点。课题组前期从辣木籽蛋白水解物中鉴定得到一种新型抗菌肽MOp2，它对S. aureus具有良好的抑制效果，但其具体的抑菌机制仍不明确。 本文以S. aureus为目标菌株，从转录组水平、蛋白组水平以及生物膜水平三个层面，采用实时荧光定量PCR、酶活性测定、流式细胞术、荧光显微镜和分子对接等多种技术手段，深入探究MOp2对S. aureus的潜在分子作用机制。主要研究结果如下： （1）MOp2处理后，S. aureus共有579个基因表达上调，564个基因表达下调，这些差异表达基因（DEGs）与细胞膜通透性、细胞内pH稳态、能量代谢、膜转运、细胞壁合成和蛋白质折叠过程密切相关。进一步通过乳酸脱氢酶、琥珀酸脱氢酶和ATP酶的活性测定进行确认，并通过实时荧光定量技术验证了6个DEGs，最终发现MOp2可通过改变S. aureus细胞膜通透性、酸化细胞内环境、抑制糖酵解、TCA循环和呼吸链过程，以及阻碍细胞壁合成来抑制S. aureus。 （2）MOp2处理后，S. aureus共有256个蛋白表达上调，285个蛋白表达下调，这些DEPs主要与膜损伤、泛酸和辅酶A（CoA）生物合成、细胞壁合成、能量代谢、蛋白质合成以及氧化应激有关。分子对接结果表明MOp2可与8个DEPs相互作用，包括ProC、QoxB、SOD2、DnaK、GroEL、RplY、AcpS和FabG。进一步研究发现，MOp2可以通过抑制脂质-Ⅱ合成和肽聚糖生物合成，抑制内源性抗氧化剂活性，抑制CoA生物合成，抑制分子伴侣蛋白和核糖体亚基来抑制蛋白质合成，从而对细胞壁造成损伤，导致活性氧在细胞内积累，并引发氧化损伤、DNA断裂、细胞核形态改变和磷脂酰丝氨酸外化等。此外，MOp2还阻碍了碳水化合物代谢和磷酸化糖生成、精氨酸合成和谷氨酸转运，并影响S. aureus的能量及营养供应，抑制细胞蛋白质合成，减少S. aureus对MOp2产生耐药性。 （3）MOp2的最小抑制生物膜浓度（MBIC）和最小清除生物膜浓度（MBEC）分别为4 mg/mL和8 mg/mL。在1×MBIC浓度下，MOp2对S. aureus生物膜的清除率为63.28%。荧光显微镜观察到，MOp2处理后的生物膜黏附减少，细菌数量减少，且在1×MBIC浓度下，细菌初期黏附率降低了44.19%。同时，MOp2处理后的生物膜表面疏水性降低。酶解实验表明S. aureus生物膜胞外聚合物（EPS）中含量最多的成分为胞外蛋白（占49.01%），其次为胞外多糖和胞外DNA。MOp2可以抑制EPS中这三种成分的合成。分子对接结果表明，MOp2可以与生物膜形成的关键蛋白AgrA、CshA、LuxS和SarA相结合，这可能对S. aureus的群体感应系统造成影响，从而抑制生物膜的形成，减少S. aureus的传染性和毒性。 |
| 并列题名： | Molecular Mechanisms of the Antimicrobial Peptide MOp2 from Moringa Oleifera Seeds Against Staphylococcus aureus |
| 题名主题： | 辣木籽抗菌肽 金黄色葡萄球菌 转录组学 蛋白质组学 生物膜 抑菌机制 学位论文 |
| 中图分类： | TS201.3-533 |
| 个人名称等同： | 黄志远 著 |
| 个人名称次要： | 董文明 指导 |
| 个人名称次要： | 王雪峰 指导 |
| 团体名称等同： | 云南农业大学 授予 |
| 记录来源： | CN YNAUL 20240301 |