提要文摘: | 对SD大鼠进行甲基睾酮(17-methyltestosterone,MT)短期饲喂、繁殖试验和亚慢性毒性试验,测定生长指标,血液学指标和性激素水平并通过基因芯片技术筛选与生殖相关的差异表达基因,探讨甲基睾酮对大鼠生殖性能的影响,来揭示甲基睾酮的生殖毒性作用,保障动物源性食品安全。结果如下:生长试验选择出生60d,体重相近的断乳SD大鼠60只,雌雄各半,随机分为1/5LD50组(将1/5LD50的甲基睾酮添加到2ml花生油中,对SD大鼠进行灌胃)、1/50LD50组(将1/50LD50的甲基睾酮添加到2ml花生油中,对SD大鼠进行灌胃)和空白对照组(对SD大鼠进行灌胃不添加MT的花生油2ml)。每周称重一次,饲养45d,期间每天观察SD大鼠的行为、精神、毛色和健康状况等。记录采食量,增重量,计算各组平均增重及平均饲料利用率。结果表明,一定剂量的甲基睾酮对SD大鼠的生长具有促进作用,剂量过高时反而抑制SD大鼠生长;甲基睾酮可以增加饲料转化率。血常规测定分别在甲基睾酮灌胃45d和停止灌胃满45d时,进行SD大鼠血液学指标测定。结果表明,甲基睾酮会升高SD大鼠中性粒细胞百分比,降低淋巴细胞百分比,影响SD大鼠免疫力。性激素水平测定分别在甲基睾酮灌胃45d和停止灌胃满45d时,对各组SD大鼠体内雌二醇、睾酮、孕酮含量进行测定。结果表明,(1)灌胃甲基睾酮45d后,雌性SD大鼠,雌二醇含量1/5LD50 组升高;睾酮含量均显著升高;孕酮含量1/5LD50显著降低。雄性SD大鼠,睾酮含量1/5LD50组极显著降低,1/50LD50组显著升高;孕酮含量显著降低。(2)停止灌胃MT 45d后,雄性SD大鼠,雌二醇、睾酮含量均升高;孕酮含量显著降低。雌性SD大鼠,雌二醇含量1/5LD50组显著升高;睾酮含量显著降低;孕酮含量显著升高。因此,甲基睾酮的摄入会影响雌二醇、睾酮和孕酮代谢。繁殖试验各试验组大鼠分别在甲基睾酮灌胃45d和停止灌胃满45d时,每组随机选取10只大鼠,雌雄各半,于同饲料组内挑选雌雄大鼠一对一合笼,并设阴性对照组,进行SD大鼠繁殖试验。结果表明,对照组,雌性SD大鼠受孕率、断奶存活率、产仔数、断奶个数、断奶均重均高于试验组。灌胃甲基睾酮45d、停喂甲基睾酮45d后,均会影响SD大鼠的生育力和仔鼠的发育。5.基因表达谱分析采用基因芯片技术对甲基睾酮灌胃后SD大鼠卵巢基因表达的改变进行研究。结果表明,检测出明显上调基因2768个,下调基因2087个(Fold change≧10)。表达显著上调的基因Tnp2、Crisp2、Fabp9、Tssk2;显著下调基因Akr1c3、Cyp11a1、Prlr。这些基因与精子发生、激素代谢、性腺发育、胚胎发育、生殖系统等有关。因此,甲基睾酮对SD大鼠与繁殖相关基因的表达有影响。 |