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： 荜茇抗植物病原真菌活性成分的分离鉴定及抑菌机理研究
书目信息 机读格式(MARC)
| ISBN/价格： | CNY40.00 (估\呈缴)学位论文 |
|---|---|
| 作品语种： | chi |
| 出版国别： | CN 530000 |
| 题名责任者项： | 荜茇抗植物病原真菌活性成分的分离鉴定及抑菌机理研究/.普特著/.叶敏指导 |
| 出版发行项： | 2023.5.26 |
| 载体形态项： | 94页:;+图表:;+30cm |
| 一般附注： | 植物保护学院, 学号2018110032 |
| 提要文摘： | 化学合成农药是现代农业生产的重要组成部分，合理地施用可保障粮食的产收，但在使用不当的情况下很容易导致环境的污染和人员的伤害。我国是农业大国，农业种植面积广阔，农药用量也相对较大，因此我国面临的农药生态环境问题愈发严峻。开发研究安全高效的绿色农药是目前国内外的主要发展方向之一。我国拥有庞大的用于人体抗菌、抗病毒的中草药库。这些中草药中的一些有效成分很可能对防治农业病害同样具有防治效果，是筛选绿色农药的重要来源。 本研究选取了37种中国传统中草药为研究材料，4种重要植物病原菌（灰葡萄孢菌Botrytis cinerea、立枯丝核菌Rhizoctonia solanum、链格孢菌Alternaria alternata和尖孢镰刀菌Fusarium oxysporum）为活性测试对象，对中药的粗提物进行了植物病原菌抑菌活性初步筛选。初筛试验中，荜茇粗提物表现出的抑菌活性最好，采用生物活性追踪法对荜茇提取物进行了色谱分离并获得活性单体成分。结合UPLC、HRMS、1H-NMR和13C-NMR检测分析，确定活性单体成分的化学结构。对活性单体成分进行室内毒力测定、活体抑菌研究及初步抑菌机理研究。研究结果如下： (1) 采用菌丝生长速率法对37种中草药乙醇提取物的抑菌活性进行了初步筛选。在500 μg/mL浓度下，筛选出荜茇乙醇提取物抑菌活性最强。 (2) 进一步对荜茇乙醇提取物进行室内毒力测定，实验结果显示，荜茇乙醇提取物对立枯丝核菌、灰葡萄孢、链格孢菌和尖孢镰刀菌的EC50 分别为156.56 μg/mL、262.74 μg/mL、293.89 μg/mL和320.71 μg/mL。 (3)采用水蒸馏提取法提取了荜茇的挥发油。经GC-MS分析，荜茇挥发油的主要成分为石竹烯 (Caryophyllene, 9.83 %)、葎草烯 (Humulene, 7.22 %)、大根香叶烯D (Germacrene D, 9.92 %)、萘 (Naphthalene, 2.31 %)、1-4-(1,5-二甲基-1,4-己二烯基) 环己烯 (4-(1,5-dimethyl-1,4-hexadienyl)-1-methyl- cyclohexene, 1.79 %)、β-没药烯 (β-bisabolene, 5.42 %)、马榄烯 (Maaliene, 1.75 %)、氧化石竹烯 (Caryophyllene oxide, 1.23 %)。以链格孢菌为指示菌株，测定了荜茇挥发油对其抑菌活性。实验结果显示，荜茇挥发油没有显著的抑菌活性。说明荜茇的活性成分存在于乙醇提取物当中。 (4) 采用柱层析色谱分离技术和生物活性追踪技术，以链格孢菌为指示菌株，对荜茇乙醇提取物进行生物活性追踪分离。获得了一个高抑菌活性单体成分。采用高分辩质谱（HRMS）、核磁共振氢谱（1H-NMR）和核磁共振碳谱（13C-NMR），解析了该活性单体成分的化学结构，确定该抑菌活性成分为(E,E)-1-[5-(1,3-苯并二氧戊环-5-甲基)-1-氧代-2,4-戊二烯基]-哌啶，又称胡椒碱。采用菌丝生长速率法对胡椒碱的抑菌毒力进行测定。实验结果显示，胡椒碱对灰葡萄孢菌、立枯丝核菌、链格孢菌和尖孢镰刀菌的EC50值分别为38.54 μg/mL、41.50 μg/mL、33.54 μg/mL和95.17 μg/mL。同时，发现胡椒碱对灰葡萄孢菌的孢子萌发具有明显的抑制作用，其EC50达到0.45 μg/mL。 (5) 通过测定胡椒碱对供试菌株的活体抑菌活性发现，经胡椒碱处理过的植物体表面，能有效阻止对应病菌对植物体的进一步侵染。其抗侵染效果优于阳性对照组。 (6) 通过测定胡椒碱对供试菌株的各项生理指标的影响发现，胡椒碱的抑菌机理是通过抑制供试菌株的CAT、SOD、SDH和MDH活性；降低供试菌株的可溶性蛋白含量；增加供试菌株的细胞膜通透性；增加供试菌株MDA含量；使供试菌株的菌丝形态产生皱缩且表面变得粗糙，从而抑制病原菌的正常生长。 研究结果表明，胡椒碱作为荜茇的主要成分,对供试菌株具有较好的室内抑菌活性及活体抑菌活性，在农作物预防病害侵染或是果蔬保鲜方面，具有一定的开发潜力。 |
| 并列题名： | Chemical compostion, antifungal activity and mechanism of active component from Piper longum L. against phytopathogen eng |
| 题名主题： | 中药提取物 荜茇 胡椒碱 抑菌活性 抑菌机理 学位论文 |
| 中图分类： | S48-533 |
| 个人名称等同： | 普特 著 |
| 个人名称次要： | 叶敏 指导 |
| 团体名称等同： | 云南农业大学 授予 |
| 记录来源： | CN YNAUL 20240301 |