书目详细信息
： 核桃胰脂肪酶抑制肽的分离纯化鉴定及体外降脂活性研究
书目信息 机读格式(MARC)
| ISBN/价格： | CNY20.00 (估\呈缴)学位论文 |
|---|---|
| 作品语种： | chi |
| 出版国别： | CN 530000 |
| 题名责任者项： | 核桃胰脂肪酶抑制肽的分离纯化鉴定及体外降脂活性研究/.李婷婷著/.解静指导 |
| 出版发行项： | 2023.6.20 |
| 载体形态项： | 52页:;+图表:;+30cm |
| 一般附注： | 食品科学技术学院, 学号2021240106 |
| 提要文摘： | 肥胖及其相关代谢性疾病引起了世界各地的广泛关注，如何有效预防和控制肥胖已成为人类亟待解决的问题。胰脂肪酶作为机体脂解的关键酶，可通过水解膳食脂肪在小肠进行重吸收、储能和完成全身循环。大量研究表明，生物活性肽可作为胰脂肪酶抑制剂对肥胖机体进行靶向治疗。核桃粕作为优质蛋白质资源一直被开发利用，而且核桃多肽受不同水解酶切割后呈现出不同生物活性，但核桃多肽的胰脂肪酶抑制活性及其降脂作用机制尚不明确。 因此，本研究首先从核桃碱性蛋白酶解物中筛选出胰脂肪酶抑制活性最强的分子量段，通过LC-MS/MS确定该分子量段的多肽序列，并对多肽序列进行分子对接及相关生物信息学特性筛选，初步确定具有胰脂肪酶抑制活性的核桃肽序列；其次，通过体外胰脂肪酶抑制活性检测和抑制动力学分析，明确核桃胰脂肪酶抑制活性肽序列及其酶抑制类型；采用荧光光谱、圆二色谱、傅里叶红外光谱分析核桃胰脂肪酶抑制活性肽与胰脂肪酶的相互作用机制，并对核桃胰脂肪酶抑制肽进行食品加工稳定性评估；最后，采用3T3-L1脂肪细胞模型，明确核桃胰脂肪酶抑制肽的脂质积累抑制作用。 实验结果显示，核桃碱性蛋白酶解物中＜1kDa分子量段组分具有最强的胰脂肪酶抑制活性，经多肽序列鉴定和分子对接筛选出五条潜在的核桃胰脂肪酶抑制肽，其多肽序列分别为VIAFP、LVAFP、IAFP、LTYP、LFDP，其胰脂肪酶抑制IC50值分别为13.08 mM、14.06 mM、13.45 mM、12.39 mM 和6.931 mM，LFDP作为最具潜力的核桃胰脂肪酶抑制肽，其胰脂肪酶的抑制类型是可逆的竞争型抑制剂。多光谱分析结果显示LFDP与胰脂肪酶的相互作用引起了荧光猝灭现象，并导致其酶二级结构中α-螺旋下降、β-折叠保持不变和无规则卷曲结构的增加及相互作用化合键的伸缩振动。在高温、强酸强碱、金属离子和胃肠消化条件下，LFDP短时间内可保持较强的胰脂肪酶抑制活性。LFDP可显著抑制3T3-L1脂肪细胞中脂滴形成，显著降低细胞中总胆固醇、甘油三酯、低密度脂蛋白水平和增加高密度脂蛋白水平的作用。综上所述，核桃碱性蛋白酶解物多肽LFDP是可逆的竞争性胰脂肪酶抑制肽，通过影响胰脂肪酶二、三级结构抑制酶活力，在极端环境下保持着稳定的生物活性，并具有一定的体外降脂作用，是潜在的胰脂肪酶抑制剂。 |
| 并列题名： | Isolation, Purification, Identification and in Vitro Hypolipidemic Activity of Pancreatic Lipase Inhibitory Peptide from Walnuts eng |
| 题名主题： | 核桃多肽 胰脂肪酶抑制剂 活性筛选 3T3-L1脂肪细胞 学位论文 |
| 中图分类： | TS201.21-533 |
| 个人名称等同： | 李婷婷 著 |
| 个人名称次要： | 解静 指导 |
| 团体名称等同： | 云南农业大学 授予 |
| 记录来源： | CN YNAUL 20240524 |