书目详细信息
： 葡萄根结线虫新种鉴定及生物学特性和候选致病基因研究
书目信息 机读格式(MARC)
| ISBN/价格： | CNY40.00 (估)学位论文 |
|---|---|
| 作品语种： | chi |
| 出版国别： | CN 530000 |
| 题名责任者项： | 葡萄根结线虫新种鉴定及生物学特性和候选致病基因研究/.杨艳梅著/.胡先奇指导 |
| 出版发行项： | 2021.06.10 |
| 载体形态项： | 147页:;+图表:;+30cm |
| 一般附注： | 植物保护学院, 学号2017110017 |
| 提要文摘： | 在云南省曲靖市陆良县一葡萄园中发现严重的葡萄根结线虫病，该病的发生可能对我国葡萄产业构成风险，为了对该病进行有效的检疫、预防和控制，本文对葡萄根结线虫病的病原线虫种类进行了系统鉴定，研究了病原线虫的快速PCR检测技术、相关生物学特性及候选寄生致病基因的筛选和功能，取得了如下主要研究结果： 1、为害葡萄的根结线虫为一新种，命名为葡萄根结线虫（Meloidogyne vitis sp. nov.）。新种的鉴别特征：雌虫会阴花纹具有2个大而明显的侧尾腺开口，雌虫、雄虫及2龄幼虫（J2）唇盘与中唇融合为哑铃形结构，雄虫和J2侧区有4条侧线；新种具有罕见的苹果酸脱氢酶（malate dehydrogenase）表型（N3d）和酯酶（esterases）表型（VF1）；基于rDNA的ITS1-5.8S-ITS2和D2D3区，mtDNA的coxI和coxII区的系统发育分析证实Meloidogyne vitis sp. nov.的新种地位。 2、构建了葡萄根结线虫快速检测技术体系。设计了一对葡萄根结线虫特异性检测引物Mv-F（5，-CTGGTTCAGGGTCATTTATAAAC-3，）、Mv-R（5，-TATACGCTTGTGTGGATGAC -3，），利用该引物能够从葡萄根结线虫中扩增出174 bp的特异性片段。该引物特异性强、灵敏度高，可用于葡萄根结线虫单头J2及混合种群中葡萄根结线虫的快速检测。 3、测试了葡萄根结线虫对10种常见作物的致病性，津研四号黄瓜、超甜白沙蜜甜瓜、白果强丰番茄是葡萄根结线虫的寄主作物，大叶空心菜、丘北辣、本生烟、四季春秋大叶菠菜、春不老白梗厚皮菜、毛叶小白菜、四季白杆芹菜为非寄主作物。 4、初步观察了葡萄根结线虫的发育过程，单胞卵发育为2龄侵染幼虫约需11.5-14.5 d；J2从侵染黄瓜根系发育到雌虫产卵期约需36 d，其中J2发育至三龄幼虫（J3）约需12 d，J3发育至四龄幼虫（J4）约需3 d，J4发育至早期雌虫约需12 d，早期雌虫再经9 d进入产卵期；由此推测葡萄根结线虫完成一代的生活周期约为47.5-50.5 d。经石蜡切片观察，黄瓜根组织受线虫损害明显，有大量巨型细胞形成，在接种30 d时观察到巨型细胞空洞化现象，葡萄根结线虫的发育过程与寄生阶段酸性品红染色观察结果一致。 5、20份葡萄品种对葡萄根结线虫的抗感性水平分为3类：金手指、藤稔、黄金玫瑰、红宝石、美人指、美丽无核、女巫指、康能、玫瑰香、希姆劳特、夏黑为低抗材料；龙眼、紫甜无核、克伦生、奇妙、巨峰、维多利亚为感病材料；沙巴珍珠、黑比诺、红地球为高感材料。 6、以葡萄根结线虫侵染前J2为样本，经高通量转录组测序，得到了60297650个clean reads，63096个contigs，29718个Unigene，Unigene平均长度858.03 bp，共有61816个编码区序列获得注释信息。经生物信息学工具预测，具有信号肽的基因共1293个，具有信号肽且为食道腺分泌的基因共8个，具有信号肽、无跨膜结构域的基因共666个，具有信号肽、无跨膜结构域且为食道腺分泌的基因共5个，同时满足具有信号肽、无跨膜结构域、具有核定位信号、与根结属其他线虫（南方根结线虫Meloidogyne incognita、爪哇根结线虫Meloidogyne javanica、花生根结线虫Meloidogyne arenaria、北方根结线虫Meloidogyne hapla及象耳豆根结线虫Meloidogyne enterolobii）具有同源性的基因共13个。 7、克隆了5个具有信号肽、无跨膜结构域的候选效应蛋白DN1934_c0_g1、DN4778_c0_g2、DN5501_c2_g5、DN6140_c2_g9和DN8185_c0_g1，采用烟草瞬时表达系统，在本生烟叶片上对这5个效应蛋白进行初步功能分析，发现5个效应蛋白兼有能抑制植物PTI免疫反应激发子BAX、NPK1和植物ETI免疫反应激发子R3a/Avr3a激发的烟草叶片坏死反应，初步说明5个效应蛋白兼有抑制植物PTI和ETI反应的功能。亚细胞定位结果显示，候选效应蛋白DN1934_c0_g1、DN5501_c2_g5、DN6140_c2_g9和DN8185_c0_g1主要定位于烟草细胞核和细胞膜上，推测其产物可能具有参与寄主细胞核调控及后期蛋白修饰的功能，候选效应蛋白DN4778_c0_g2主要定位于烟草细胞膜上，推测其产物可能具有参与后期蛋白修饰的功能。 以上研究结果为葡萄根结线虫的快速检测提供技术支撑，为深入研究效应蛋白的功能奠定了基础，为解析葡萄根结线虫的致病机制提供思路，为葡萄根结线虫病防治提供研究基础资料。 |
| 并列题名： | Studies on the identification, biological characteristics and candidate pathogenic genes of Meloidogyne vitis sp. nov. eng |
| 题名主题： | 葡萄根结线虫 种类鉴定 生物学特性 转录组 候选致病基因 学位论文 |
| 中图分类： | S436.631.12-533 |
| 个人名称等同： | 杨艳梅 著 |
| 个人名称次要： | 胡先奇 指导 |
| 团体名称等同： | 云南农业大学 授予 |
| 记录来源： | CN YNAUL 20220621 |