书目详细信息
： 猪流行性腹泻病毒COE基因重组乳酸菌的构建及免疫原性分析
书目信息 机读格式(MARC)
| ISBN/价格： | CNY20.00(估)缴送 |
|---|---|
| 作品语种： | chi |
| 出版国别： | CN 530000 |
| 题名责任者项： | 猪流行性腹泻病毒COE基因重组乳酸菌的构建及免疫原性分析/.杨洁著/.张以芳指导 |
| 出版发行项： | 2015.5 |
| 载体形态项： | 46页 :;+图表:;+30cm |
| 提要文摘： | 本研究以乳酸乳球菌乳链菌肽表达系统为抗原递呈载体，以PEDV COE基因片段为靶基因，构建了表达PEDV COE基因的重组乳酸乳球菌，并对其免疫原性进行了初步评价。对云南某猪场采集的疑似患PED病猪肠病料进行RT-PCR扩增，获得778bp的PEDV部分保护性抗原基因，将其克隆至pMD19-T后测序，核苷酸序列同PEDV参考序列同源性为94.5%~99.6%。将COE基因与乳酸乳球菌表达载体pNZ8148进行连接，电转化乳酸乳球菌NZ9000，得到重组菌pNZ8148-COE/NZ9000。重组菌用Nisin诱导后，SDS-PAGE可检测到分子量约20kDa的蛋白；间接免疫荧光试验表明，重组菌表达蛋白位于菌体表面且具有反应原性。将构建的重组乳酸乳球菌pNZ8148-COE/NZ9000口服免疫初生仔猪，加强免疫后10d采集免疫动物的血液、粪便样品，处理后用MTS法和ELISA法检测T淋巴细胞转化情况、特异性抗体(IgG和sIgA)及细胞因子(IL-4和IFN-γ)，评价重组菌刺激产生的体液免疫和细胞免疫水平。同时，在免疫前后测定仔猪体重，评价其对仔猪生长发育的影响。试验结果经统计分析表明，各免疫组对仔猪体重增加没有负影响；含有PEDV COE基因的重组乳酸菌口服免疫仔猪后，淋巴细胞增殖试验刺激指数SI、血清抗体IgG、粪便中的sIgA、外周血淋巴细胞悬液中IL-4和IFN-γ含量均高于PBS对照组和空载体对照组，组间差异显著（P＜0.05）。由此说明，重组菌pNZ8148-COE/NZ9000具有良好的免疫原性 |
| 并列题名： | Construction and Immunogenicity Analysis of Recombinant Lactococcus lactis Expressing COE Protein of Porcine Epidemic Diarrhea Virus eng |
| 题名主题： | PEDV COE基因 乳酸乳球菌 NICE系统 口服疫苗 学位论文 |
| 中图分类： | S828-533 |
| 个人名称等同： | 杨洁 著 |
| 个人名称次要： | 张以芳 指导 |
| 团体名称等同： | 云南农业大学 授予 |
| 记录来源： | CN YNAU 20151216 |