ISBN/价格: | CNY20.00(估)缴送 |
---|---|
作品语种: | chi |
出版国别: | CN 530000 |
题名责任者项: | 放线菌菌株1331发酵工艺优化及发酵混合液对根结线虫的控制效果/.胡梦君著/.胡先奇指导 |
出版发行项: | 2018.06.04 |
载体形态项: | 75页:;+图表:;+30cm |
提要文摘: | 植物根结线虫病的防治一直是植物病害研究的热点,放线菌是具潜力和优质杀线虫效果的一类微生物,在植物根结线虫病防治中有较为广阔的应用前景。本研究对前期筛选获得的对根结线虫(Meloidogyne sp.)具有抑杀活性的放线菌菌株1331,用单因素筛选和正交试验,对影响其发酵的培养基和培养条件进行筛选和优化;并使用菌株1331的发酵混合液进行温室盆栽实验,测定发酵混合液对番茄南方根结线虫病的防治效果,以期为该菌株工业发酵生产和蔬菜根结线虫病有效防治提供依据。主要研究结果如下: 1. 确定最佳发酵培养基。用单因素筛选实验,确定了菌株1331最佳发酵培养基为发酵培养基Ⅱ,配方为(g/L):可溶性淀粉20 g,黄豆粉10 g,葡萄糖5 g,酵母粉5 g,蛋白胨 5g,牛肉膏5 g,CaCO3 3 g,CoCl2 0.002 g,pH7.5。在此培养基下发酵7 d,10%菌株1331发酵液对南方根结线虫(M. incognita)2龄幼虫处理48 h后的校正死亡率达79.54%,与另两种培养基相比分别提高了44.59%和20.24%,证明发酵培养基Ⅱ是菌株1331发酵所用最佳发酵培养基。 2. 确定最优摇瓶发酵条件。结合单因素筛选试验和正交试验方法,优化摇瓶发酵条件,最优发酵条件为:装液量80 mL(500 mL摇瓶),接种量为5%(V/V),培养温度25℃,初始pH7.0,150 r/min发酵培养7 d。在此条件下发酵,与初始发酵培养条件相比,10%菌株1331发酵液对南方根结线虫2龄幼虫处理48 h后的校正死亡率从优化前的79.54%提高到88.97%,表明其为最优发酵条件。 3. 室内生物活性测定。用直接触杀法,测定菌株1331发酵混合液对南方根结线虫卵孵化和2龄幼虫抑杀活性的影响:5%发酵混合液处理南方根结线虫卵3 d、6 d和9 d,卵孵化率与对照相比分别降低了87.40%、77.39%和70.59%;菌株1331发酵混合液浓度为5%、10%和20%,处理南方根结线虫2龄幼虫24 h后的校正死亡率与对照相比差异显著,处理48 h后的校正死亡率分别为76.01%、88.97%和100%。表明菌株1331发酵混合液对南方根结线虫卵和2龄幼虫有较好的抑杀活性。 4. 稳定性实验。测定了菌株1331对高温及酸碱的稳定性:与常温(22℃)条件下的菌株1331产孢量(1.66×109 CFU/mL)相比,在40℃和50℃的环境中时,菌株1331的存活率分别为8.9×108 CFU/mL和5.57×107 CFU/mL,温度持续升高时存活率迅速降低,达到60℃时的存活率降为6×104 CFU/mL。表明菌株1331对于高温具有一定的耐受性,但温度高于60℃不利于菌株存活。不同pH环境中的菌株1331活性也不同:当发酵初始pH为7时,菌株1331的产孢量为1.52×109 CFU/mL,与之相比,pH6和pH8时,菌株1331的存活率存在一定差异,分别为6.1×108 CFU/mL和3.57×108 CFU/mL。结果表明菌株1331对于酸碱具有一定的耐受性,pH低于6或高于8都会影响菌株活性。 5. 温室促生实验。通过温室盆栽试验,对番茄的农艺性状及叶绿素指标进行测定:综合分析30 d、45 d和60 d的形态学指标数据可以看出,与空白对照T5相比,实验组T1(菌株1331发酵原液)、T2(菌株1331发酵液10倍稀释液)和T3(菌株1331发酵液100倍稀释液)的番茄株高、茎粗、植株鲜重、干重及叶绿素含量等都有明显的提高。当盆栽施入50 mL发酵混合液时,实验组T1的促生效果最佳,药后60d,番茄植株的株高、茎粗、地上部鲜重、根系鲜重和叶绿素含量的相对增长率分别为35.19%、81.25%、359.79%、196.9%和51.75%,实验组T2的效果次之;当盆栽施入80 mL发酵混合液时,实验组T2的效果最好,药后60d,番茄植株的株高、茎粗、地上部鲜重、根系鲜重和叶绿素含量的相对增长率分别为30.12%、81.25%、254.26%、364.42%和73.60%。盆栽试验表现为菌株1331发酵混合液处理的植株粗壮高大,根系发达,叶片深厚浓绿,表明菌株1331发酵混合液对番茄的生长发育具有显著的促进作用。 6. 温室防病实验。通过温室盆栽试验,研究了菌株1331发酵混合液对番茄南方根结线虫的防治效果:随着发酵混合液施加浓度的增加,菌株1331发酵混合液的防效呈递增趋势。综合分析30 d、45 d和60 d的数据发现,无论当盆栽施入50 mL还是80 mL发酵混合液,实验组T1(菌株1331发酵原液)的防效均是最佳,明显优于其他两组实验组T2(菌株1331发酵液10倍稀释液)和T3(菌株1331发酵液100倍稀释液),且与空白对照组T5相比差异显著。当盆栽施入50 mL发酵混合液时,实验组T1在药后30 d、45 d和60 d的防效分别为68.75%、56.73%和22.75%,低于标准对照组T4(1%阿维菌素颗粒剂);当盆栽施入80 mL发酵混合液时,实验组T1在药后30 d、45 d和60 d的防效分别为86.45%、71.8%和39.09%,除在30 d时略低于标准对照组T4(1%阿维菌素颗粒剂),45 d和60 d时与其效果相当,差异不显著。结果表明,菌株1331发酵混合液对番茄南方根结线虫病有良好的防治效果,在根结线虫生物防治中有广阔的应用前景。 |
并列题名: | Optimization of Fermentation Techniques and Control Effects of Actinomycete Strain 1331 on Root-knot Nematode eng |
题名主题: | 放线菌 菌株1331 发酵工艺优化 根结线虫病 生物防治 学位论文 |
中图分类: | S432.45-533 |
个人名称等同: | 胡梦君 著 |
个人名称次要: | 胡先奇 指导 |
团体名称等同: | 云南农业大学 授予 |
记录来源: | CN YNAUL 20190325 |