书目详细信息
： 普洱茶多糖的结构特征及体外免疫调节活性研究
书目信息 机读格式(MARC)
| ISBN/价格： | CNY20.00 (估\呈缴)学位论文 |
|---|---|
| 作品语种： | chi |
| 出版国别： | CN 530000 |
| 题名责任者项： | 普洱茶多糖的结构特征及体外免疫调节活性研究/.吴以龙著/.字成庭指导 |
| 出版发行项： | 2023.6.5 |
| 载体形态项： | 93页:;+图表:;+30cm |
| 一般附注： | 食品科学技术学院, 学号2020210071 |
| 提要文摘： | 普洱茶是一种以云南大叶种晒青茶为原料，采用特定加工工艺制成的具有不同于其他茶叶醇厚滋味和浓郁香气的茶叶，按其加工工艺及品质特征，分为普洱生茶和普洱熟茶。普洱茶内含物质丰富、功能活性多样，其中普洱茶多糖（Pu-erh tea polysaccharides，PTPs）是重要的活性成分之一。目前，对PTPs的研究主要集中于粗茶多糖的提取分离和理化性质分析，而对PTPs的纯化、结构鉴定、分子结构、构效关系及作用机理研究尚少，尤其对PTPs的精确化学结构尚未见报道。因此，本研究主要对普洱茶鲜叶、普洱生茶、普洱熟茶三种不同制作工艺阶段的PTPs进行了分离纯化、理化性质、初级结构特征、高级结构特征、表观结构特征和体外免疫调节活性进行研究，目的在于明晰不同加工工艺PTPs的结构特征，探索PTPs的体外免疫调节功效，为PTPs的构效关系及分子机制研究提供理论参考。研究结果如下： 1.采用水提醇沉法分别从普洱茶鲜叶、普洱生茶和普洱熟茶中提取粗多糖，并运用大孔吸附树脂脱色、离子交换、凝胶色谱分离纯化等分离技术得到三个PTPs均一组分（PTPs Ⅰ-Ⅲ）。 2.采用一系列分析方法对PTPs Ⅰ-Ⅲ的分子量、总糖含量、蛋白含量、糖醛酸含量、甲酯化程度和单糖组成等理化性质进行了分析。结果表明PTPs Ⅰ-Ⅲ分子量分别为31, 241、32, 764和5, 261 kDa；总糖含量分别为98.23%、96.98%和93.41%；蛋白含量分别为0.25%、0.10%和0.62%；PTPs Ⅰ和PTPs Ⅱ分别含有69.91%和28.74%的糖醛酸，PTPs Ⅲ不含糖醛酸；PTPs Ⅰ和PTPs Ⅱ的甲酯化程度分别为32.08%和41.60%，PTPs Ⅲ未发生甲酯化。PTPs Ⅰ由Rha（1.55%）、GlcA（2.47%）、GalA（35.06%）、Gal（25.63%）和Ara（35.28%）5种单糖组成；PTPs Ⅱ由Rha（7.21%）、GlcA（5.54%）、GalA（19.23%）、Glc（4.54%）、Gal（28.93%）和Ara（34.54%）6种单糖组成；PTPs Ⅲ由Rha（15.42%）和Ara（84.58%）2种单糖组成。 3.运用紫外光谱、红外光谱、核磁共振、甲基化、刚果红和I2/IK分析PTPs Ⅰ-Ⅲ的初级结构和高级结构。结果表明：PTPs Ⅰ的初级结构是以→1)-α-D-GalpA-(4→与→1)-β-D-Galp-(6→线性相连作为主链，并含有β-D-GlcpA-(1→、α-L-Araf-(1→和α-D-Rhap-(1→3)-α-L-Araf-(1→5)-α-L-Araf-(1→三个支链片段分别连接在Gal残基的3号位和4号位；PTPs Ⅱ的初级结构是以→1)-α-D-GalpA-(4→与→1)-β-D-Galp-(3→线性相连作为主链，并含有β-D-Glcp-(1→、β-D-GlcpA-(1→、α-L-Araf-(1→和α-D-Rhap-(1→3) -α-L-Araf-(1→5)-α-L-Araf-(1→四个支链片段分别连接在Gal残基的4号位和6号位；PTPs Ⅲ的初级结构中含有α-D-Rhap-(3→1)-α-D-Rhap-(4→...线性片段；PTPs Ⅰ-Ⅲ均属于具有三螺旋构象的支链多糖。 4.利用动态光散射、相位光散射、扫描电子显微镜、冷冻扫描电子显微镜和透射电子显微镜技术分析了PTPs Ⅰ-Ⅲ的表观结构特征。结果表明PTPs Ⅰ-Ⅲ的颗粒大小分别为159.30 nm、229.57 nm和242.96 nm，Zeta电位分别为-29.39 mV、-18.28 mV和-8.45 mV；SEM显示PTPs Ⅰ-Ⅲ分别为无序的纤维丝状结构、片状结构和无规则柱结构；Cryo-SEM显示PTPs Ⅰ-Ⅲ分别具有网-珠结构、层-链结构和网-链结构；TEM显示PTPs Ⅰ为无规则的海绵状团聚物，PTPs Ⅱ为圆球形的小颗粒，PTPs Ⅲ为分散均匀的梭形颗粒。 5.采用体外细胞模型评价PTPs Ⅰ-Ⅲ的免疫调节活性。研究表明PTPs Ⅰ-Ⅲ在12.5~50 μg/mL浓度范围内对RAW264.7细胞的增殖活力均有促进作用且PTPs Ⅲ的促增殖活性最好；PTPs Ⅰ对RAW264.7细胞吞噬能力的促进作用不显著，PTPs Ⅲ对RAW264.7细胞吞噬能力的促进作用最强；PTPs Ⅰ-Ⅲ均能温和地激活RAW264.7细胞，并通过提升NO、TNF-α、IL-6和IL-1β的分泌水平来发挥免疫调节作用。 综上，本研究对三种不同制作工艺阶段的普洱茶（普洱茶鲜叶、普洱生茶和普洱熟茶）多糖进行了结构特征分析及体外免疫调节活性研究，不同制作工艺阶段的PTPs具有不同的结构特征，普洱熟茶中分离得到的PTPs Ⅲ比PTPs Ⅰ和PTPs Ⅱ具有更好的免疫调节活性。本研究为PTPs分子结构、作用机理及构效关系的研究提供基础，同时也为不同加工工艺对普洱茶品质特征及其功能活性的影响提供了科学依据和理论支持。 |
| 并列题名： | Study on structural characteristics and immunomodulatory activity of polysaccharide from Pu-erh Tea in vitro eng |
| 题名主题： | 普洱茶 普洱茶多糖 结构特征 结构鉴定 免疫调节活性 学位论文 |
| 中图分类： | TS201.23-533 |
| 个人名称等同： | 吴以龙 著 |
| 个人名称次要： | 字成庭 指导 |
| 团体名称等同： | 云南农业大学 授予 |
| 记录来源： | CN YNAUL 20240510 |