书目详细信息
： 基于转录组学对无乳链球菌致小鼠乳腺上皮细胞焦亡的研究
书目信息 机读格式(MARC)
| ISBN/价格： | CNY20.00 (估\呈缴)学位论文 |
|---|---|
| 作品语种： | chi |
| 出版国别： | CN 530000 |
| 题名责任者项： | 基于转录组学对无乳链球菌致小鼠乳腺上皮细胞焦亡的研究/.邓健明著/.曲伟杰指导 |
| 出版发行项： | 2023.5.30 |
| 载体形态项： | 65页:;+图表:;+30cm |
| 一般附注： | 动物医学院, 学号2020210416 |
| 提要文摘： | 奶牛乳房炎是由乳腺组织损伤或病原微生物感染导致奶牛乳腺组织出现代 谢以及生理状态异常的炎症反应，是导致养殖业产生重大经济损失的一种疾病。 无乳链球菌作为一种重要的传染致病菌，能够引起奶牛乳房炎，且多为慢性或 不表现明显临床症状，给奶牛乳腺组织造成持续感染。细胞焦亡（ pyroptosis） 作为一种新发现的炎性细胞程序性死亡方式，可由多种刺激触发，但其主要由 胞内菌诱导发生。但无乳链球菌是否可以诱导乳腺上皮细胞发生细胞焦亡尚未 见报道。本研究目的是深入了解我国 20 个省、市、自治区 201 个大型牧场无乳 链球菌的分子分型并探究无乳链球菌是否可以诱导乳腺细胞发生焦亡，为进一 步探究宿主细胞抵御无乳链球菌感染的分子机制提供前期理论基础，进而对奶 牛乳房炎的预防和治疗提供科学依据。 采集样品进行细菌分离培养，通过革兰氏染色分离出疑似链球菌株，将疑 似链球菌株涂布于含 5%绵羊血平板上进行培养。提取疑似菌株的 DNA 并通过 16SrRNA 基因序列测序对比鉴定，通过多序列位点分型研究分离株的分子分型。 选取菌株进行后续实验，通过使用不同的感染复数（MOI=50:1、40:1、30:1、 20:1、10:1）感染小鼠乳腺上皮细胞（HC11），并观察不同感染时间（ 3h、6h、 9h）下的细胞活力和 LDH 的释放。选取合适的 MOI 感染小鼠乳腺上皮细胞， 通过转录组学技术分析是否有与细胞焦亡相关的信号通路富集，通过 Western blot、ELISA 验证转录组学分析结果，并探究无乳链球菌是否诱导小鼠乳腺上皮 细胞发生焦亡。本研究从 4341 份样品中共分离到 140 株无乳链球菌且山东省为 无乳链球菌高发区，MLST 分析显示在这些群体中只有两个主要的克隆复合体 (CC)，即 CC103 和 CC67，其中 ST103 为优势 ST，占 140 株分离株的 35.7%。 此外，还发现了 13 种新型 STs。选取 ST1421 菌株进行构建小鼠乳腺上皮细胞 感染模型和转录测序，在无乳链球菌感染细胞后,实验组与对照组的差异基因表 达明显，实验组之间的差异基因表达不明显。差异 GO 基因富集分析结果显示， 生物学过程所占比例最大。差异表达基因 KEGG 富集分析结果显示，NF-κB 和 Nod 样受体等信号通路的差异基因表达明显。分析实验组的 NOD 样受体信号通 路，发现在整个信号通路中炎症小体（NLRP3）的基因上调明显。对转录组学 的结果进行验证后发现无乳链球菌感染小鼠乳腺上皮细胞后可以通过 NF-κB-基于转录组学对无乳链球菌致小鼠乳腺上皮细胞焦亡的研究 NLRP3 信号通路激活 Caspase-1 介导的细胞焦亡,并呈明显的时间依赖性。 |
| 并列题名： | Pyroptosis of Mouse Mammary Epithelial Cells Induced by Streptococcus agalactiae Based on Transcriptomics eng |
| 题名主题： | 奶牛乳房炎 无乳链球菌 多序列位点分型 细胞焦亡 NF-ΚB 学位论文 |
| 中图分类： | S858.23-533 |
| 个人名称等同： | 邓健明 著 |
| 个人名称次要： | 曲伟杰 指导 |
| 团体名称等同： | 云南农业大学 授予 |
| 记录来源： | CN YNAUL 20240603 |