ISBN/价格: | CNY20.00 (估\呈缴)学位论文 |
---|---|
作品语种: | chi |
出版国别: | CN 530000 |
题名责任者项: | 和厚朴酚、厚朴酚的提取制备及其药效学评价/.邬佳莉著/.段纲,常华指导 |
出版发行项: | 2023.5.31 |
载体形态项: | 102页:;+图表:;+30cm |
一般附注: | 动物医学院, 学号2020210405 |
提要文摘: | 厚朴作为一种传统中药,有着广泛的药用价值。其主要成分中和厚朴酚、厚朴酚起到药效关键作用,具有多种生物活性。挖掘和厚朴酚、厚朴酚在兽药中的潜在药用价值,合理利用此类资源具有重要意义。 1.和厚朴酚、厚朴酚纯化、鉴定与定量分析 以和厚朴酚、厚朴酚为目标物初步提取,采用传统溶剂法浸渍、萃取粗提物。制备型高效液相色谱技术将乙酸乙酯:石油醚5:5比例萃取相分离收集出各单体化合物,利用分析型高效液相色谱、超高效液相色谱对所提和厚朴酚、厚朴酚进行定性、定量分析,建立超高效液相色谱方法并进行方法学验证,并计算其纯度及各单体得率。结果显示:经乙酸乙酯:石油醚5:5萃取相中分离收集两种单体化合物,经标准品光谱特性、保留时间比对,核磁共振碳谱、氢谱分析,确定其为和厚朴酚、厚朴酚单体。和厚朴酚、厚朴酚标准品标准曲线方程分别为y=9.65×103x-1.71×104?R2=0.9999及y=8.33×103x+1.27×104?R2=0.9999,线性范围:0.00266?-1.00?mg/mL。通过超高效液相色谱方法学验证,证实此液相方法重复性、精密度、稳定性、回收率良好,和厚朴酚、厚朴酚纯度分别为75.46%与85.02%,初步萃取后两个单体占生药量的得率分别为0.613%与3.95%。通过比旋光度测定,2个单体均为左旋体。 2.?和厚朴酚、厚朴酚单体的抗菌活性及安全性评价 纸片扩散法对和厚朴酚、厚朴酚单体进行11种常见细菌的抑菌试验。?用紫外分光光度法与高效液相色谱筛选出最佳溶剂,微量肉汤稀释法测定敏感菌株对和厚朴酚、厚朴酚单体的最小抑菌浓度(MIC)和最小杀菌浓度(MBC)。通过紫外分光光度计法测定药物对敏感菌株的杀菌曲线。结果显示:和厚朴酚、厚朴酚单体对耐药金黄色葡萄球菌、无乳链球菌、粪肠球菌有抑菌效果,最小抑菌浓度(MIC)、最小杀菌浓度(MBC)为750?μg/mL、375?μg/mL、93.75?μg/mL和1500?μg/mL、750?μg/mL、375?μg/mL。和厚朴酚、厚朴酚单体对耐药金黄色葡萄球菌、粪肠球菌、无乳链球菌的动态杀菌曲线OD值差异显著(P?0.05)。 参照国家及相关领域标准,采用最大给药量法对和厚朴酚、厚朴酚单体进行急性毒性试验,测定其生化指标、脏器指数,观察病理切片,评价和厚朴酚、厚朴酚单体对小鼠的毒性程度。急性毒性试验结果显示,10000 mg/kg剂量组14 d观察结束亦未见小鼠死亡,生化指标、肝脏、肾脏病理切片未见明显异常。? 3.?和厚朴、厚朴酚单体抑菌机制初探 紫外分光光度计法测定AKP活性,结合透射电镜对细菌细胞壁破损程度进行测定观察;电导率法、紫外分光光度计法指示其对细菌细胞膜的影响;利用十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳对给药后菌体总蛋白进行测定;DAPI荧光染色对比细菌核酸强度变化,初步探索和厚朴酚、厚朴酚单体对敏感菌株的抑菌机制。 结果表明:(1)各给药浓度AKP酶活力变化不明显,透射电镜结果显示细菌细胞壁大体结构完整,细菌细胞内容物固缩溶解;(2)电导率法、紫外分光光度计法测定溶液260、280?nm处吸光度值,结果表明各浓度和厚朴酚、厚朴酚单体作用后对三种细菌溶液电导率均有明显升高,A260、A280处吸光度值随给药浓度升高而增大;(3)经和厚朴酚、厚朴酚处理后的菌体总蛋白部分条带变淡;(4)核酸DAPI荧光强度随给药时间增长而降低。 本研究用分析型高效液相色谱、超高效液相色谱、制备型高效液相色谱,成功从厚朴中分离出和厚朴酚、厚朴酚单体。验证和厚朴酚、厚朴酚具有较强的抑制耐药金黄色葡萄球菌、粪肠球菌、无乳链球菌的作用。在给药浓度10000?mg/kg并不引起动物死亡,表明和厚朴酚、厚朴酚单体毒性为无毒。抑菌机制初步探索分析2个单体可改变3株细菌的细胞膜通透性,影响细菌内部蛋白质表达,抑制内部核酸复制。 ? 关键词:和厚朴酚;厚朴酚;急性毒性;药效学评价 |
并列题名: | Extraction and preparation of Honokiol and Magnolia and their pharmacodynamic evaluation |
题名主题: | 和厚朴酚 厚朴酚 急性毒性 药效学评价 学位论文 |
中图分类: | R285-533 |
个人名称等同: | 邬佳莉 著 |
个人名称次要: | 段纲 指导 |
个人名称次要: | 常华 指导 |
团体名称等同: | 云南农业大学 授予 |
记录来源: | CN YNAUL 20240301 |