ISBN/价格: | CNY20.00(估)缴送 |
---|---|
作品语种: | chi |
出版国别: | CN 530000 |
题名责任者项: | 月季‘绿萼’RcAG基因及其启动子克隆及分析/.眭梦洁著/.唐开学,关文灵指导 |
出版发行项: | 2019.6.4 |
载体形态项: | 59页:;+图表:;+30cm |
提要文摘: | 中国古老月季‘绿萼’(Rosa chinensis ‘Viridiflora’)的花朵形态十分奇特,表现为花瓣、雄蕊、雌蕊均转变为萼片状,是研究花发育的极好材料。本研究以花器官发育正常的中国古老月季 ‘月月粉’(R. chinensis ‘Old Blush’)为对照,使用实时荧光定量PCR对RcAG基因在‘绿萼’及‘月月粉’中不同组织部位的表达进行分析;采用同源序列法分别克隆了‘绿萼’和‘月月粉’的RcAG基因全长及其启动子序列,进行启动子顺式作用元件分析;并使用重亚硫酸盐测序技术分析了‘绿萼’和‘月月粉’RcAG基因启动子甲基化情况。 具体研究结果如下: 1. 使用RT-qPCR方法,分析了RcAG基因在‘绿萼’和‘月月粉’幼蕾期的表达,结果表明:RcAG基因在‘月月粉’雄蕊、雌蕊中的表达量显著高于‘绿萼’;同时在‘绿萼’各个组织部位中的表达量均低于在 ‘月月粉’中的表达。 2. 采用PCR方法,分别从‘绿萼’和‘月月粉’中克隆了RcAG基因的全长cDNA序列。结果显示,在‘月月粉’中基因RcAG全长931 bp,含有1 个738bp 的 OFR开放阅读框,共编码245个氨基酸;在‘绿萼’中,基因RcAG全长1044 bp ,有三个开放阅读框(ORF),其中,最长的一个ORF框为402bp,与‘月月粉’中RcAG具有较高的同源性,但少了112个氨基酸。推测‘绿萼’中RcAG氨基酸序列缺失可能是其不能正常表达的主要原因。 3. 克隆得到了‘绿萼’及‘月月粉’RcAG基因启动子序列,长度分别为1532 bp、1530 bp的DNA片段,两者相似度为94.25%。对其进行顺式作用元件分析。表明,‘绿萼’启动子中含有19个已知的顺式作用元件,而‘月月粉’中只含有18个,这些元件中大部分均相同;‘绿萼’RcAG基因启动子中发现的光响应元件MRE和昼夜节律调控元件circadian并未在‘月月粉’中找到,而光响应元件TCT-motif只在‘月月粉’中被发现。 4. 对‘绿萼’及‘月月粉’RcAG基因启动子序列进行亚硫酸盐测序,甲基化分析发现:所克隆的‘绿萼’启动子区域甲基化程度极高,四个CpG位点均发生甲基化,占全部CpG位点的80%,而‘月月粉’序列中只有三个CpG位点发生甲基化,占全部CpG位点的33%,远低于‘绿萼’中的比例,初步推测‘绿萼’中RcAG基因表达量偏低很可能是受到启动子甲基化的影响。 |
并列题名: | Cloning and analysis of RcAG and its promoter in Rosa chinensis ‘Viridiflora’ |
题名主题: | 月季 ‘绿萼’ 花器官发育 荧光定量PCR 基因克隆 启动子甲基化 学位论文 |
中图分类: | S685.12-533 |
个人名称等同: | 眭梦洁 著 |
个人名称次要: | 唐开学指导 |
个人名称次要: | 关文灵指导 |
团体名称等同: | 云南农业大学 授予 |
记录来源: | CN YNAU 20200311 |